h**********r
发帖数: 671 | 1 需要合成一段长约100bp的引物，做表达用，所以不希望有突变。请问这种情况下可以
直接合成吗？例如普通的脱盐级别能保证质量不？或者去做个基因片段的合成？
有经验的给点建议把。另外，我没做过从page胶纯化primer,所以这个也不考虑。
多谢！问题解决了，一定发包子。 |
h***e
发帖数: 146 | 2 我最长用到120bp，在sigma合成的，hplc纯化的就行
突变基本没有吧 |
A******u
发帖数: 61 | 3 hplc纯化比脱盐高级么？
【在 h***e 的大作中提到】
: 我最长用到120bp，在sigma合成的，hplc纯化的就行
: 突变基本没有吧
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n****3
发帖数: 543 | 4 用常规40－50bp左右的引物彼此重叠20bp去pcr,很容易得到你的产物，很少有突变的，
挑2－3个送去测序，一定有你要的正确克隆。hplc纯化的引物也不是100%没有突变的，
而且超贵 |
h**********r
发帖数: 671 | 5 这个想法好。不行我就把这个片段合成了，反正合成的能保证序列争取。再去和别的装
配。 |
g*********5
发帖数: 2533 | |
z*********3
发帖数: 335 | 7 I used to order from Sigma (100 to 150 bp), PAGE purified grade, and ask
Sigma to provide the PAGE gel picture for show the quality of the oligo.
Normally, <60 bp is purified by desalt column. HPLC comes between 60 to 100.
PAGE is the best for >100 bp. IMO. |
h**********r
发帖数: 671 | 8 唉，看到这个我很犹豫要不要做cDNA克隆？
苦哈哈的，还不如花点儿钱。
【在 g*********5 的大作中提到】
: IDT, <500BP, $99?
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S******l
发帖数: 14311 | 9 直接合成啊。省事
【在 h**********r 的大作中提到】
: 需要合成一段长约100bp的引物，做表达用，所以不希望有突变。请问这种情况下可以
: 直接合成吗？例如普通的脱盐级别能保证质量不？或者去做个基因片段的合成？
: 有经验的给点建议把。另外，我没做过从page胶纯化primer,所以这个也不考虑。
: 多谢！问题解决了，一定发包子。
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s******s
发帖数: 13035 | 10 普通脱盐不行, 加钱吧
【在 h**********r 的大作中提到】
: 需要合成一段长约100bp的引物，做表达用，所以不希望有突变。请问这种情况下可以
: 直接合成吗？例如普通的脱盐级别能保证质量不？或者去做个基因片段的合成？
: 有经验的给点建议把。另外，我没做过从page胶纯化primer,所以这个也不考虑。
: 多谢！问题解决了，一定发包子。
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