t****t
发帖数: 86 | 1 5小鼠神经干细胞，想分化成neuron, 用beta III tubulin 染色， 发现比例非常低，
大多数细胞都是GFAP+ astrocytes。 而且第四，五天开始，细胞开始死亡，有凋亡小
泡。分化用的medium是前人留下的配方，neurobasal A + B27 + 1% HI-FBS + 2mM
Glutamax + 0.5uM RA。每天换一半液。
折腾两个月了。。。求指教 |
a****d
发帖数: 1919 | 2 你用的是primary NSC 吗？ 培养液里面有没有bFGF和EGF？
如果是的话，撤掉bFGF和EGF，不加血清和RA，加BDNF,GDNF。这样Neuron的比例应该会
提高。 |
t****t
发帖数: 86 | 3 没Bfgf egf,那我加加看。分化过程细胞死亡正常吗？ |
a****d
发帖数: 1919 | 4 我手上的primary NSC分化的时候会有一定量的cell death，可以和astrocyte
coculture来促进survival.
【在 t****t 的大作中提到】
: 没Bfgf egf,那我加加看。分化过程细胞死亡正常吗？
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t****t
发帖数: 86 | 5 我最后要算百分比，所以可能不方便加astrocyte
我今天又看了看，加了RA的孔细胞死的非常多，没加的基本只有很少量的死亡。看来是
RA的问题。我会试试GDNF和BDNF
我听说神经干细胞分化不处理的baseline都有15-20%会变成neuron,这个是指的primary
还是cell line? 我怎么感觉我这个primary NSC没这么高啊 |
