l******g 发帖数: 1145 | 1 我cross了两个转基因的老鼠,发现大约1/3的老鼠从postnatal 3天到2周,出现不同
程度的体型变小,以及预期中其他的一些表型。老鼠就算只有sibling的1/2大小,但
还是生活自理,三周就可以wean了。
问题1,
现在我想quantify老鼠body size的变化,测体重是比较有效的手段吗?
我担心的是,不是所有老鼠都变小,体重平均后,也许会弱化差异。
ps,下周第一批老鼠要拉去做echo,到时麻倒了,肯定会拍比较照片。
问题2,
如果检测体重的话,需要连续测多久?可以只测到6周成年的时候吗?
concern是,现在的老鼠只是第一次cross后的double het,本来是没预期有表型的。按
计划要继续cross将一个基因完全knockout,预期得到更严重的表型。
所以说,所有的female老鼠都要用来breeding,等到怀孕后,体重肯定就不准了。就算
是公老鼠,用来breed后,都会变肥(难怪男人一结婚就发福),可能体重也不准了。
是不是测体重只能到breeding前? |
w******y 发帖数: 2504 | 2 断奶后监测体重,食物摄取,也可以做做METABOLIC CHAMBER看看数据的变化。体重监
测到成年应该就能说明问题了,不过成年不是3个月吗? |
D*a 发帖数: 6830 | 3 小小鼠体重必需每天测,周末不间断测到你想停的那天,然后小鼠体重变化很大,所以
通常取当天以及前后1天的平均值作为当天individual体重,然后组内按照通常的方法
算平均值。只要指头能标号把老鼠分出来就可以开始监测了。
可以麻醉量鼻子到尾巴nose-rump距离作为身长,如果你的KO影响growth的话身长比体
重更有说服力,坏处是身长不能每天麻醉,所以还是得测体重。你正好要麻醉就拿
个尺子量量吧。但是这个要压背轻扯尾巴让老鼠趴平,但是又不能扯过了,因为你越扯
越长嘛,你自己练练。尾巴往身子刚刚长毛的地方有个关节,看不见,但是手能摸到,
我是手掐在那里量鼻子到手指甲尖的距离。
测体重当然要处男女鼠,否则谁知道为神马变化啊。不过6周根本不能生孩子,测到6周
肯定没问题啊。ls说得对成年应该是3个月。 |
d*******8 发帖数: 93 | 4 You heard about heterozygous insufficiency? sometimes even it is not
complete ko, you would still be able to see a phenotype. |
D*a 发帖数: 6830 | |
C**********r 发帖数: 8189 | |
c******e 发帖数: 543 | |
a********d 发帖数: 195 | 8 ...隔行如隔山
这也能上十大。。。
【在 D*a 的大作中提到】 : 这也能上十大。。。
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c**********r 发帖数: 2372 | 9 居然是十大啊
现象很明显
恭喜啊
不过
“我担心的是,不是所有老鼠都变小,体重平均后,也许会弱化差异。”
我觉得如果不去测整体而只挑出体重偏小的个体的话,不科学呢。 |
m******5 发帖数: 1383 | 10 这个为什么能上十大啊……我这也有个老鼠突变后体型明显变小,更搞笑的是体型和基
因剂量成正比 |
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l******g 发帖数: 1145 | 11 metabolic chamber是看体重变化是否代谢改变引起的吗?
其实机制我们已经清楚,细胞里的实验已经基本完成,现在是在相关动物模型里验证一
下。不出意料的话,应该是某心血管疾病引起的body size变化。
如果echo结果证明心血管的确出问题的话,还需要测代谢率吗?
现在最头疼的是,就是老鼠数量太少,又想观察表型,又想尽快breeding。。。
【在 w******y 的大作中提到】 : 断奶后监测体重,食物摄取,也可以做做METABOLIC CHAMBER看看数据的变化。体重监 : 测到成年应该就能说明问题了,不过成年不是3个月吗?
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J*******n 发帖数: 10 | 12 如果小鼠明显变小的话,你担心体重不准的话,可以每周测一次体长。将小鼠麻醉后,
趴着放平,测量头到尾的长度。 |
l******g 发帖数: 1145 | 13 多谢建议!
每天测体重,实在有点搞不过来,能够每周测一次,然后把相同时间点很多老鼠的数据
叠加在一起吗?
量身长是个很好的建议,正好每个月都要去echo一下,准备带把尺子去。
另,我一直以为小鼠6周就成年了。。。我们一般6周就用来breeding,生得还挺顺的。
【在 D*a 的大作中提到】 : 小小鼠体重必需每天测,周末不间断测到你想停的那天,然后小鼠体重变化很大,所以 : 通常取当天以及前后1天的平均值作为当天individual体重,然后组内按照通常的方法 : 算平均值。只要指头能标号把老鼠分出来就可以开始监测了。 : 可以麻醉量鼻子到尾巴nose-rump距离作为身长,如果你的KO影响growth的话身长比体 : 重更有说服力,坏处是身长不能每天麻醉,所以还是得测体重。你正好要麻醉就拿 : 个尺子量量吧。但是这个要压背轻扯尾巴让老鼠趴平,但是又不能扯过了,因为你越扯 : 越长嘛,你自己练练。尾巴往身子刚刚长毛的地方有个关节,看不见,但是手能摸到, : 我是手掐在那里量鼻子到手指甲尖的距离。 : 测体重当然要处男女鼠,否则谁知道为神马变化啊。不过6周根本不能生孩子,测到6周 : 肯定没问题啊。ls说得对成年应该是3个月。
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l******g 发帖数: 1145 | 14 是的,30%左右的penetrance其实已经不错了。
比较意外,是其中一个基因的完全ko完全没有表型,所以没有预期double het会有表型
。现在比较担心完全ko后,就embryonic lethal了,只能分析下genetic interaction。
【在 d*******8 的大作中提到】 : You heard about heterozygous insufficiency? sometimes even it is not : complete ko, you would still be able to see a phenotype.
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l******g 发帖数: 1145 | 15 如果我测了三周和四周的体重,是不是就是(四周体重-三周体重)/三周体重?
还是应该除以四周体重?
【在 c******e 的大作中提到】 : 我们测的是体重增加的百分比。
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l******g 发帖数: 1145 | 16 我打算追踪一只老鼠,秀一下对比图片,追求下视觉效果。。。
【在 c**********r 的大作中提到】 : 居然是十大啊 : 现象很明显 : 恭喜啊 : 不过 : “我担心的是,不是所有老鼠都变小,体重平均后,也许会弱化差异。” : 我觉得如果不去测整体而只挑出体重偏小的个体的话,不科学呢。
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l******g 发帖数: 1145 | 17 再问个白痴的问题,小鼠多大可以被麻醉?就用isoflurane吗?
我担心一不小心就搞死几只。。
【在 J*******n 的大作中提到】 : 如果小鼠明显变小的话,你担心体重不准的话,可以每周测一次体长。将小鼠麻醉后, : 趴着放平,测量头到尾的长度。
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D*a 发帖数: 6830 | 18 小小鼠体重变化很大,尤其是weaning学吃东西的时候还可能往下降,这个就看你的表型
到底多么强了,差得多肯定就可以少用几只,不行就只能加大n了。每天测的话曲线漂
亮很多,要不你就每周测但是连测两三天作为individual的周体重,我觉得也可以。我
们测幼鼠都是每天测的,不过我们是搞growth的。我们10%的体重差,10只反正是不够.
..
isoflurane应该是常用的吧,关键是老鼠麻醉后不能趴着,正好堵住鼻孔,要侧身,把
鼻子露出来,我有惨痛教训啊 T.T
另外那个问题,初始体重是100%,不是现在体重,要不然你不都算出来降低了吗
【在 l******g 的大作中提到】 : 多谢建议! : 每天测体重,实在有点搞不过来,能够每周测一次,然后把相同时间点很多老鼠的数据 : 叠加在一起吗? : 量身长是个很好的建议,正好每个月都要去echo一下,准备带把尺子去。 : 另,我一直以为小鼠6周就成年了。。。我们一般6周就用来breeding,生得还挺顺的。
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D*a 发帖数: 6830 | 19 老鼠都小一半了够呛六周能breeding吧。。。
【在 l******g 的大作中提到】 : metabolic chamber是看体重变化是否代谢改变引起的吗? : 其实机制我们已经清楚,细胞里的实验已经基本完成,现在是在相关动物模型里验证一 : 下。不出意料的话,应该是某心血管疾病引起的body size变化。 : 如果echo结果证明心血管的确出问题的话,还需要测代谢率吗? : 现在最头疼的是,就是老鼠数量太少,又想观察表型,又想尽快breeding。。。
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c******e 发帖数: 543 | 20 我们做的是药物实验。先测给药前体重,然后每周测量体重/给药前体重
【在 l******g 的大作中提到】 : 如果我测了三周和四周的体重,是不是就是(四周体重-三周体重)/三周体重? : 还是应该除以四周体重?
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m******5 发帖数: 1383 | 21 楼主方便说一下是哪类心血管问题么?
我也在做这么一个基因,也观察到老鼠体型减小的问题,请问怎么判断体型减小是不是
心血管系统引起的? |