promoter region mutation求助！谢谢 - Biology版 - 未名存档

本页内容为未名空间相应帖子的节选和存档，一周内的贴子最多显示50字，超过一周显示500字访问原贴

Biology版 - promoter region mutation求助！谢谢

相关主题
● Quick change mutated 4 bp at the same time?	● Re: Northern vs RT-PCR
● point mutation	● 新泽西公司找有genomics背景的PhD Scientist
● DNA SEQUENCE的问题	● 求教：怎么定义splicing site mutation
● 克隆promoter+gene CDS	● 请教：怎样correct质粒中的一个点突变呢
● 问大家一个问题：关于野生型P53表达的	● 哪位TX做过 Single site mutant?
● 某个基因的mutation analysis，200个病人样本，请问什么方法比较好	● 包子求这里有人买过Origene的expression ready cDNA clone么？准确性如何？
● DNA SEQUENCE的问题	● 分子生物学弱人来问个PCR的问题
● 请教Sanger sequencing的问题	● 请教基因测序

相关话题的讨论汇总
话题: promoter话题: region话题: mutation话题: pcr话题: repeat

进入Biology版参与讨论

1

(共1页)

z*******9 发帖数: 112	1 我以前做基因的突变总是用overlapping PCR，这次我需要在Promoter region做修饰，例如再加一个promoter的repeat，我还是如法炮制，总是不灵，PCR终产物始终没有我的insert，估计是由于promoter的repeat sequence导致的pcr失败。请问各位对于promoter region的manipulation还有没有其他的trick，谢谢，
z*******9 发帖数: 112	2 自己顶，谢谢，
b******n 发帖数: 4225	3 老方法，promoter引入酶切位点，然后把要重复的片段插进去很早还有用同切酶的，保证可以插入multiple repeat 【在 z*******9 的大作中提到】 : 自己顶，谢谢，
H*******i 发帖数: 196	4 质粒里面没有BsaI位点得话，可以用末端酶切BsaI构建（当然也可以尝试其他同类型酶），这样不会引入多余序列。如果有得话可以用bsaI方法构建包含你promoter的片段，然后用各种方法和其他部分连起来另外promoter不长得话也可以直接合出来然后用PCR和原来部分连起来（有些时候不太容易，promoter 或者重复序列repeat次数超过需要，不过一般换换条件啥的总能挑到对的）
z*******9 发帖数: 112	5 谢谢，

1

(共1页)

进入Biology版参与讨论

相关主题
● 请教基因测序	● 问大家一个问题：关于野生型P53表达的
● 求问下怎么在96孔板里面screen point mutation？	● 某个基因的mutation analysis，200个病人样本，请问什么方法比较好
● CRISPR point mutation作出来了	● DNA SEQUENCE的问题
● 【请教】为什么在diploid中 CRISPR induced NHEJ 只产生一种mutant	● 请教Sanger sequencing的问题
● Quick change mutated 4 bp at the same time?	● Re: Northern vs RT-PCR
● point mutation	● 新泽西公司找有genomics背景的PhD Scientist
● DNA SEQUENCE的问题	● 求教：怎么定义splicing site mutation
● 克隆promoter+gene CDS	● 请教：怎样correct质粒中的一个点突变呢

相关话题的讨论汇总
话题: promoter话题: region话题: mutation话题: pcr话题: repeat

未名新帖统计// 7月16日

#	版面	帖数(主题数)
-	全站	4871 (796)
1	Military	3777 (569)
2	Stock	341 (51)
3	Joke	117 (17)
4	History	116 (3)
5	Automobile	100 (9)
6	USANews	55 (9)
7	Midlife	45 (1)
8	Headline	41 (41)
9	Dreamer	33 (13)
10	FleaMarket	32 (20)
11	Living	30 (7)

* 这里只显示发帖超过25的版面，努力灌水吧:-)