s******a
发帖数: 472 | 1 我用PCR阳性率有２５％，估计最后southern大多是假阳性吧。
PS：我的上游引物在homologous arm外，下游引物在insert。
大家最后southern阳性率多少呢？我看有筛５００个才１个的。像我就挑了２００多是
不是很可能１个都没有呢。 |
y***j
发帖数: 11235 | |
s******a
发帖数: 472 | 3 看来只能烧高香了
【在 y***j 的大作中提到】
: 有可能。
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H****N
发帖数: 997 | 4 Depending on the gene, it can be as high as 50%, or as low as <1%. |
d****d
发帖数: 214 | 5 我上一次knockin 做PCR筛选，居然用错了引物（本来应该用external pair的，实际用
了internal pair),到第二轮筛选的时候才意识到第一轮筛选的错误。当时以为这下完
了，要被老板骂死了。幸运的是就这样筛选出来的“假阳性”居然到后来发现都是“真
阳性”，可见这次targeting的整合率要接近100%。我想整合率高低很大程度上取决于
targeting construct的好坏吧。
【在 s******a 的大作中提到】
: 我用PCR阳性率有２５％，估计最后southern大多是假阳性吧。
: PS：我的上游引物在homologous arm外，下游引物在insert。
: 大家最后southern阳性率多少呢？我看有筛５００个才１个的。像我就挑了２００多是
: 不是很可能１个都没有呢。
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s******a
发帖数: 472 | 6 运气真好
【在 d****d 的大作中提到】
: 我上一次knockin 做PCR筛选，居然用错了引物（本来应该用external pair的，实际用
: 了internal pair),到第二轮筛选的时候才意识到第一轮筛选的错误。当时以为这下完
: 了，要被老板骂死了。幸运的是就这样筛选出来的“假阳性”居然到后来发现都是“真
: 阳性”，可见这次targeting的整合率要接近100%。我想整合率高低很大程度上取决于
: targeting construct的好坏吧。
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