e**r 发帖数: 1144 | 1 Backbone和insert末端有20几bp相同
直接mix,转化
试了一下,虽然work,但效率比较低。转化100ng左右长了不超过20个克隆. 鉴定4个有
一个是不对的
有人试过没?有没有什么提高效率的trick? | h***e 发帖数: 146 | 2 没有red/ET recombineering 的蛋白? | e**r 发帖数: 1144 | 3 没有
类似这个
http://www.biomedcentral.com/1472-6750/11/92/
【在 h***e 的大作中提到】 : 没有red/ET recombineering 的蛋白?
| z*********8 发帖数: 1203 | | b******n 发帖数: 4225 | 5 如果能增加一部变性复性步骤(大概30-40分钟)
我相信这个效率会更加高
有利于形成带nick环状DNA
【在 e**r 的大作中提到】 : Backbone和insert末端有20几bp相同 : 直接mix,转化 : 试了一下,虽然work,但效率比较低。转化100ng左右长了不超过20个克隆. 鉴定4个有 : 一个是不对的 : 有人试过没?有没有什么提高效率的trick?
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