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Biology版 - 末端有20几bp相同的片段,直接mix转化e coli
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e**r
发帖数: 1144
1
Backbone和insert末端有20几bp相同
直接mix,转化
试了一下,虽然work,但效率比较低。转化100ng左右长了不超过20个克隆. 鉴定4个有
一个是不对的
有人试过没?有没有什么提高效率的trick?
h***e
发帖数: 146
2
没有red/ET recombineering 的蛋白?
e**r
发帖数: 1144
3
没有
类似这个
http://www.biomedcentral.com/1472-6750/11/92/

【在 h***e 的大作中提到】
: 没有red/ET recombineering 的蛋白?
z*********8
发帖数: 1203
4
可以用infusion么?效率不错
b******n
发帖数: 4225
5
如果能增加一部变性复性步骤(大概30-40分钟)
我相信这个效率会更加高
有利于形成带nick环状DNA

【在 e**r 的大作中提到】
: Backbone和insert末端有20几bp相同
: 直接mix,转化
: 试了一下,虽然work,但效率比较低。转化100ng左右长了不超过20个克隆. 鉴定4个有
: 一个是不对的
: 有人试过没?有没有什么提高效率的trick?

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