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Biology版 - 【请教】PCR后产物非常的viscous,是怎么回事啊
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求软件PCR出现两条短的两条带是怎么回事?
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话题: 产物话题: pcr话题: viscous话题: 怎么回事话题: dna
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a***n
发帖数: 71
1
产物理论大小应该在15-20kb,已经出现两次了,用来做模版的genomic DNA都没这个粘
,pepite时候有点感觉像gel,跑胶发现样品很难进样,94度3分钟处理了产物也不行,
有人有经验么? 谢谢
L*****t
发帖数: 56
2
可能是模板多次退火错配,产物只有20kb的话用针头抽吸看看能不能打碎
a***n
发帖数: 71
3
用针头难道不会把DNA给打断么?

【在 L*****t 的大作中提到】
: 可能是模板多次退火错配,产物只有20kb的话用针头抽吸看看能不能打碎
b******n
发帖数: 4225
4
跑电泳时加点SDS在loading dye中denature DNA/protein试试看能否load进well?

【在 a***n 的大作中提到】
: 产物理论大小应该在15-20kb,已经出现两次了,用来做模版的genomic DNA都没这个粘
: ,pepite时候有点感觉像gel,跑胶发现样品很难进样,94度3分钟处理了产物也不行,
: 有人有经验么? 谢谢

g*********5
发帖数: 2533
5
加点少量的蛋白酶K?
L*****t
发帖数: 56
6

20kb的话很难打碎,如果还是不行按下面说的加PK消化或者8M尿素试试看

【在 a***n 的大作中提到】
: 用针头难道不会把DNA给打断么?
a***n
发帖数: 71
7
谢谢大家回复,感激不尽,准备按照大家的建议试一试
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Keep your hands off 32P. Re: Is 同位素 32P very dangerous?求助:跑琼脂糖胶,条带漂移。
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