k***g
发帖数: 4904 | 1 先说一下问题背景：没有生物背景的在使用细胞做实验。。所以希望大牛能给我扫盲一
下。。
原来在用Celltracker Orange，$225/1mg, 稀释到5ug/mL使用。似乎working solution
不能储存太长时间，而且最近快用完了，考虑有没有更便宜，操作也简单的染料，替换
这个Celltracker Orange。最好是488nm左右激发的，可以有更多显微镜可以用，不过
别的波长的如果很便宜又好用也可以考虑。做的细菌有革兰氏阳性和阴性的，希望这个
染料就是随便什么细菌都可以染，而且基本保持细胞活性，最好不改变细胞膜状态，而
是钻进膜后固定在细胞内，可以维持一段时间荧光性能。请问有什么染料可以推荐的吗？
多谢多谢了！ |
I***a
发帖数: 13467 | |
k***g
发帖数: 4904 | 3 老板就是觉得有点贵，所以我考虑是不是找点更便宜的。。
【在 I***a 的大作中提到】
: 用量好大啊，
: 老板没意见就接着用这种，也不贵啊
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I***a
发帖数: 13467 | 4 DAPI 染DNA的，358 nm，blue，很便宜， |
w*e
发帖数: 740 | 5 Hoechst
【在 I***a 的大作中提到】
: DAPI 染DNA的，358 nm，blue，很便宜，
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k***g
发帖数: 4904 | 6 非常感谢ls几位啊！不过这是紫外激发的，俺们这没有这种激光啊。。。
有没有488nm左右蓝光激发的。。 |
h**********r
发帖数: 671 | 7 找别人要个gfp转化后的菌？
我这儿有e. coli
也能做出你要的cyanobacteria.
不知道你手上的gram+的是啥 |
k***g
发帖数: 4904 | 8 对哦。我以前用个cyanobacteria就是autofluorescent，多省事
gram+的是S.aureus。不过其实不一定要用这个。我正好问问别人。
改造表达gfp的菌一般能培养多少代gfp变很弱啊？我以前见过别人用好像几代就变弱了？
【在 h**********r 的大作中提到】
: 找别人要个gfp转化后的菌？
: 我这儿有e. coli
: 也能做出你要的cyanobacteria.
: 不知道你手上的gram+的是啥
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a*******a
发帖数: 4233 | 9 CFDA SE可不可以
染细胞一个月没问题，染细菌不知道，说明上好像可以。
488激发 绿色荧光。
solution
吗？
【在 k***g 的大作中提到】
: 先说一下问题背景：没有生物背景的在使用细胞做实验。。所以希望大牛能给我扫盲一
: 下。。
: 原来在用Celltracker Orange，$225/1mg, 稀释到5ug/mL使用。似乎working solution
: 不能储存太长时间，而且最近快用完了，考虑有没有更便宜，操作也简单的染料，替换
: 这个Celltracker Orange。最好是488nm左右激发的，可以有更多显微镜可以用，不过
: 别的波长的如果很便宜又好用也可以考虑。做的细菌有革兰氏阳性和阴性的，希望这个
: 染料就是随便什么细菌都可以染，而且基本保持细胞活性，最好不改变细胞膜状态，而
: 是钻进膜后固定在细胞内，可以维持一段时间荧光性能。请问有什么染料可以推荐的吗？
: 多谢多谢了！
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h**********r
发帖数: 671 | 10 你加点相应的抗生素，可能gfp就不会弱了吧
我没有S.aureus，但做得挺多的了，有gfp的也不少
想做的话，可以写信给别人要一个过来试试
将来你还可以做个混合的microfluid培养，一个带上红的rfp,一个是gfp,多好
了？
【在 k***g 的大作中提到】
: 对哦。我以前用个cyanobacteria就是autofluorescent，多省事
: gram+的是S.aureus。不过其实不一定要用这个。我正好问问别人。
: 改造表达gfp的菌一般能培养多少代gfp变很弱啊？我以前见过别人用好像几代就变弱了？
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h**********r
发帖数: 671 | 11 正好也学学Jeff Hasty，拍拍小电影儿。 |
