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Biology版 - 请做CHIP的前辈指教,对照IgG有很弱的带
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F**********6
发帖数: 90
1
做了几次CHIP,每次对照IgG都能扩增出很弱的条带(实验组的条带很强!)。请问如
何解决对照IgG有弱条带的问题?
看了些别人发表的CHIP实验数据,绝大部份对照IgG基本上没有条带。但偶然能看到一
两篇文章里的CHIP实验数据里的对照里有弱的条带。
多谢指教
m********m
发帖数: 263
2
ChIP只是反映你的目的条带的enrichment,IgG出现很弱的条带没有关系,如果想去除
,可以使用高盐buffer多洗几次。洗的次数得根据结合强弱来判定。

【在 F**********6 的大作中提到】
: 做了几次CHIP,每次对照IgG都能扩增出很弱的条带(实验组的条带很强!)。请问如
: 何解决对照IgG有弱条带的问题?
: 看了些别人发表的CHIP实验数据,绝大部份对照IgG基本上没有条带。但偶然能看到一
: 两篇文章里的CHIP实验数据里的对照里有弱的条带。
: 多谢指教

d*****s
发帖数: 647
3
短时曝光,弱带就出不来
F**********6
发帖数: 90
4
Thanks a lot.
A******y
发帖数: 2041
5
If you use IgG as control for CHIP, some reviewers will kill you saying you
didn't do the proper control. Find a transcription factor that is known NOT
to bind to the region and use it as a negative control.
Of course, if you see the non-specific band, expose less or wash harder. However, CHIP is level of enhancement very different from IP for protein.
Z******5
发帖数: 435
6
一般都是IgG做Control吧,貌似还没见过拿其它转录因子做Control的。

you
NOT
However, CHIP is level of enhancement very different from IP for protein.

【在 A******y 的大作中提到】
: If you use IgG as control for CHIP, some reviewers will kill you saying you
: didn't do the proper control. Find a transcription factor that is known NOT
: to bind to the region and use it as a negative control.
: Of course, if you see the non-specific band, expose less or wash harder. However, CHIP is level of enhancement very different from IP for protein.

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