C**S 发帖数: 522 | 1 用一个膜蛋白拉下来几个细胞骨架蛋白,大家觉得该怎么往下做,是不是没什么意思?
膜蛋白一定是和骨架蛋白有结合吧,没查到几篇文章研究膜蛋白和骨架蛋白作用的文章
,是不是大家觉得这都是已知的? |
s******y 发帖数: 28562 | 2 具体得看你是哪个膜蛋白。
不是所有的都和骨架蛋白有关联的,只有少数几个。
但如果你是用质谱作出来的话,很可能只是污染而已,因为骨架蛋白丰度太高了,
经常是随便啥都能拉下来
【在 C**S 的大作中提到】 : 用一个膜蛋白拉下来几个细胞骨架蛋白,大家觉得该怎么往下做,是不是没什么意思? : 膜蛋白一定是和骨架蛋白有结合吧,没查到几篇文章研究膜蛋白和骨架蛋白作用的文章 : ,是不是大家觉得这都是已知的?
|
C**S 发帖数: 522 | 3 是质谱拉下来的。还有必要接着验证吗?
【在 s******y 的大作中提到】 : 具体得看你是哪个膜蛋白。 : 不是所有的都和骨架蛋白有关联的,只有少数几个。 : 但如果你是用质谱作出来的话,很可能只是污染而已,因为骨架蛋白丰度太高了, : 经常是随便啥都能拉下来
|
s******y 发帖数: 28562 | 4 看你老板想不想这么做。如果想做的话必须先用western 来证明。
然后用纯化的蛋白来证明。
在做之前,先查查有没有人做过那个膜蛋白和骨架蛋白的关系,以及
功能上是否重要。
【在 C**S 的大作中提到】 : 是质谱拉下来的。还有必要接着验证吗?
|
C**S 发帖数: 522 | 5 没人做过这个蛋白和任何骨架作用,我查到的关于这个骨架蛋白spectrin本身的文章都
很少。
【在 s******y 的大作中提到】 : 看你老板想不想这么做。如果想做的话必须先用western 来证明。 : 然后用纯化的蛋白来证明。 : 在做之前,先查查有没有人做过那个膜蛋白和骨架蛋白的关系,以及 : 功能上是否重要。
|
s******y 发帖数: 28562 | 6 哦,是和spectrin 有关啊?
spectrin 经常会在膜旁边晃悠。貌似和某些膜蛋白应该有关系。
就看你们老板乐不乐意往下做了。
【在 C**S 的大作中提到】 : 没人做过这个蛋白和任何骨架作用,我查到的关于这个骨架蛋白spectrin本身的文章都 : 很少。
|
J********n 发帖数: 534 | 7 Spectrin有个PH domain。和一些IPs bind. 要看你蛋白的功能而定了。 |
C**S 发帖数: 522 | 8 我们老板对什么都感兴趣,除了技术上难做的。所以我们实验室通常也就拿个siRNA干
扰,测个信号通路之类的。到处捡别人剩下的渣吃。
如果是真的,该怎么接下来做?我唯一能想到的就是说这个膜蛋白和spectrin结合,来
控制tumorigenesis。我已经有了这个膜蛋白胞内段不同deletion,在肿瘤细胞
overexpression后肿瘤大小不同的结果。
【在 s******y 的大作中提到】 : 哦,是和spectrin 有关啊? : spectrin 经常会在膜旁边晃悠。貌似和某些膜蛋白应该有关系。 : 就看你们老板乐不乐意往下做了。
|
s******y 发帖数: 28562 | 9 如果这个膜蛋白从来都没有人知道可以和spectrin 有关系的话,
那么你们还是有不少东西可以做的。
的确spectrin和癌症是有一定关系的。
【在 C**S 的大作中提到】 : 我们老板对什么都感兴趣,除了技术上难做的。所以我们实验室通常也就拿个siRNA干 : 扰,测个信号通路之类的。到处捡别人剩下的渣吃。 : 如果是真的,该怎么接下来做?我唯一能想到的就是说这个膜蛋白和spectrin结合,来 : 控制tumorigenesis。我已经有了这个膜蛋白胞内段不同deletion,在肿瘤细胞 : overexpression后肿瘤大小不同的结果。
|
C**S 发帖数: 522 | 10 谢谢,我先证实一下是不是的确有结合,再向你请教。
【在 s******y 的大作中提到】 : 如果这个膜蛋白从来都没有人知道可以和spectrin 有关系的话, : 那么你们还是有不少东西可以做的。 : 的确spectrin和癌症是有一定关系的。
|
C**S 发帖数: 522 | 11 谢谢,我看一看文献。
【在 J********n 的大作中提到】 : Spectrin有个PH domain。和一些IPs bind. 要看你蛋白的功能而定了。
|
s*********y 发帖数: 387 | 12 do you have a good control.
per my experience, just the beads itself can pull down these skeleton
proteins.
【在 C**S 的大作中提到】 : 用一个膜蛋白拉下来几个细胞骨架蛋白,大家觉得该怎么往下做,是不是没什么意思? : 膜蛋白一定是和骨架蛋白有结合吧,没查到几篇文章研究膜蛋白和骨架蛋白作用的文章 : ,是不是大家觉得这都是已知的?
|
s*********y 发帖数: 387 | 13 you are quite right.
【在 s******y 的大作中提到】 : 具体得看你是哪个膜蛋白。 : 不是所有的都和骨架蛋白有关联的,只有少数几个。 : 但如果你是用质谱作出来的话,很可能只是污染而已,因为骨架蛋白丰度太高了, : 经常是随便啥都能拉下来
|