M********e 发帖数: 62 | 1 不知道有没有人遇到这种情况:同一个sample,一时扩的出来,一时怎么着都没有band
,不管调DNA load量还是扩的时间,positive control倒是总还有band。同时还有另外
两个strain,都work。就这个让人摸不着头脑。 |
b***g 发帖数: 516 | 2 以前有过,我觉得是和DNA的质量有关。我原来提tailDNA的时候只用酸碱裂解,这样的
DNA非常不纯,所有有的有,有的没有。后来用了proteinaseK,效率提高了点,异丙醇
沉淀一下更好,用kit纯的完全没问题。 |
M********e 发帖数: 62 | 3 thanks!
【在 b***g 的大作中提到】 : 以前有过,我觉得是和DNA的质量有关。我原来提tailDNA的时候只用酸碱裂解,这样的 : DNA非常不纯,所有有的有,有的没有。后来用了proteinaseK,效率提高了点,异丙醇 : 沉淀一下更好,用kit纯的完全没问题。
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h********n 发帖数: 4079 | 4 我仔细研究过碱裂解的DNA做genotyping的问题, 觉得要尽量少加DNA, 否则PCR里面盐
浓度不对. 除此之外这个方法太好了, 非常快. 我用这个方法做genotyping, 基本上
没有pcr不成的情况.
【在 b***g 的大作中提到】 : 以前有过,我觉得是和DNA的质量有关。我原来提tailDNA的时候只用酸碱裂解,这样的 : DNA非常不纯,所有有的有,有的没有。后来用了proteinaseK,效率提高了点,异丙醇 : 沉淀一下更好,用kit纯的完全没问题。
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