询问技术问题：关于抗体浓缩 - Biology版

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Biology版 - 询问技术问题：关于抗体浓缩

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话题: 浓缩话题: 纯化话题: 抗体话题: 单克隆话题: 腹腔

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K*F
发帖数: 120

某实验室寄给我针对某一个蛋白质motif的一个单克隆抗体（未经过纯化的小鼠腹腔液体），小弟正
在做对该motif的免疫沉淀。做了两次，run gel之后可以略微看到条带，但是明显亮度太浅了。我
的positive control是Qiagen公司的5xhis单克隆抗体，我的蛋白质80%-90%可以被pull
down下来。所以我需要对我的单克隆抗体进行浓缩，而且那个实验室的postdoc也告诉我，他们也
是浓缩了做IP。
问题：
（1）我只有1ml的单抗（未经过纯化的小鼠腹腔液体）。我时候需要用Pierce公司的
protein A column进行纯化？1ml腹腔液体够么？
（2）我能不能不经过protein A column纯化，直接用Minipore的浓缩用的柱子进行抗
体浓缩？

d******1
发帖数: 709

（2）我能不能不经过protein A column纯化，直接用Minipore的浓缩用的柱子进行抗
体浓缩？
应该可以，都是蛋白，不过要小心浓缩过头

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