e*****n
发帖数: 15 | 1 哎，都博士二年级了，还问这样的问题，真不好意思
我是用qiagen blood & tissue kit 提brain tissue的DNA，~ 20 mg， handbook上面
说 brain tissue的话25mg 的DNA 产量 15 ~ 30 ug， 那理论上我应该得到12 ~ 24 ug。
但是我做了几次，最好的那次是200ul elution buffer，浓度 ~ 30 ug/ml, DNA 总量
是6 ug。
今天又做了2个sample，200 ul elution buffer，浓度只有10 ug/ml, 再用新的100ul
elution buffer, 浓度~10 ug/ml， DNA 总量大概只有3 ug。跑了一块胶，可以确定是
有DNA的。
实在想不出来是什么原因。 我disrupt tissue的时候是用23 G的needle做的，然后加
proteinase K消化了6个小时，液体很澄清，应该不会是消化的不好吧。很简单的实验
，就是做不好，哎。。。。
Sample比较珍贵，不敢再做了。。。希望大家能帮我一下啊，谢谢大家！！ | f******p
发帖数: 178 | 2 稀释太多了，我每次只用50ul稀释
ug。
100ul
【在 e*****n 的大作中提到】
: 哎，都博士二年级了，还问这样的问题，真不好意思
: 我是用qiagen blood & tissue kit 提brain tissue的DNA，~ 20 mg， handbook上面
: 说 brain tissue的话25mg 的DNA 产量 15 ~ 30 ug， 那理论上我应该得到12 ~ 24 ug。
: 但是我做了几次，最好的那次是200ul elution buffer，浓度 ~ 30 ug/ml, DNA 总量
: 是6 ug。
: 今天又做了2个sample，200 ul elution buffer，浓度只有10 ug/ml, 再用新的100ul
: elution buffer, 浓度~10 ug/ml， DNA 总量大概只有3 ug。跑了一块胶，可以确定是
: 有DNA的。
: 实在想不出来是什么原因。 我disrupt tissue的时候是用23 G的needle做的，然后加
: proteinase K消化了6个小时，液体很澄清，应该不会是消化的不好吧。很简单的实验
| e*****n
发帖数: 15 | 3 那最后能得到DNA的总量能达到handbook上的 ~ 20 ug么？
【在 f******p 的大作中提到】
: 稀释太多了，我每次只用50ul稀释
:
: ug。
: 100ul
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