l******a
发帖数: 3339 | 1 我养的细胞中总是有黑点，数量跟细胞数量成反比。跟我公用培养箱的人也有这个问题
，即使用保证
质量的cell stock加新配的media也一样会有黑点，不想bacteria感染，跟下面两个帖
子的现象
非常想，真不知道该怎么办了：
http://www.scientistsolutions.com/t11616-
black+dots+in+cell+culture.html
http://www.biomart.cn/experiment/430/488/490/496/17440.htm
please give some suggestion. |
h******y
发帖数: 351 | 2 It might be Mycoplasma contamination. You can get a detection kit to test it.
http://www.atcc.org/CulturesandProducts/CellBiology/KitsPanels/
【在 l******a 的大作中提到】
: 我养的细胞中总是有黑点，数量跟细胞数量成反比。跟我公用培养箱的人也有这个问题
: ，即使用保证
: 质量的cell stock加新配的media也一样会有黑点，不想bacteria感染，跟下面两个帖
: 子的现象
: 非常想，真不知道该怎么办了：
: http://www.scientistsolutions.com/t11616-
: black+dots+in+cell+culture.html
: http://www.biomart.cn/experiment/430/488/490/496/17440.htm
: please give some suggestion.
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j******i
发帖数: 939 | 3 How do you thaw your serum? If you thaw serum under 37, this might produce
more precipitates and cause nutrition loss. Try thaw your serum 4 degree
overnight might help. |
m**********d
发帖数: 137 | 4 我们实验室也发生过类似的情况，最后证明是yeast contamination，用以下的
protocol很快就解决问题了
13ml complete culture media + 100-500 microlitter amphotericinB(depend on
your cell line) + 1ml pen/strep antibiotic
treat之后你在显微镜下能看到黑点死了漂起来，大概treat3-4d, trypsinize,
replate之后就很干净了，不放心的话再做一下hoechst staining。 |
l******a
发帖数: 3339 | 5 不是，一开始我也以为是，加了mycoplasma抗生素，还是没用。
test it.
http://www.atcc.org/CulturesandProducts/CellBiology/KitsPanels/
ycoplasmaDetectionKit/tabid/1789/Default.aspx
【在 h******y 的大作中提到】
: It might be Mycoplasma contamination. You can get a detection kit to test it.
: http://www.atcc.org/CulturesandProducts/CellBiology/KitsPanels/
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l******a
发帖数: 3339 | 6 That is a good points, thank you. But I do not think it is the reason
here.
produce
degree
【在 j******i 的大作中提到】
: How do you thaw your serum? If you thaw serum under 37, this might produce
: more precipitates and cause nutrition loss. Try thaw your serum 4 degree
: overnight might help.
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l******a
发帖数: 3339 | 7 好，谢谢，我试试。
on
【在 m**********d 的大作中提到】
: 我们实验室也发生过类似的情况，最后证明是yeast contamination，用以下的
: protocol很快就解决问题了
: 13ml complete culture media + 100-500 microlitter amphotericinB(depend on
: your cell line) + 1ml pen/strep antibiotic
: treat之后你在显微镜下能看到黑点死了漂起来，大概treat3-4d, trypsinize,
: replate之后就很干净了，不放心的话再做一下hoechst staining。
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a****n
发帖数: 43 | 8 我们也有这个问题。
我们的方法是在培养基里加庆大霉素，阿奇霉素，和plasmocin(invivogen），或者加
四环素和plasmocin。过两天就干净了。
【在 l******a 的大作中提到】
: 我养的细胞中总是有黑点，数量跟细胞数量成反比。跟我公用培养箱的人也有这个问题
: ，即使用保证
: 质量的cell stock加新配的media也一样会有黑点，不想bacteria感染，跟下面两个帖
: 子的现象
: 非常想，真不知道该怎么办了：
: http://www.scientistsolutions.com/t11616-
: black+dots+in+cell+culture.html
: http://www.biomart.cn/experiment/430/488/490/496/17440.htm
: please give some suggestion.
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l******a
发帖数: 3339 | 9 就是说还是细菌感染？我已经加了plasmocin和pen/strep了？
【在 a****n 的大作中提到】
: 我们也有这个问题。
: 我们的方法是在培养基里加庆大霉素，阿奇霉素，和plasmocin(invivogen），或者加
: 四环素和plasmocin。过两天就干净了。
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