r*********n
发帖数: 13992 | 1 俺养的细胞无论如何过不了Paraformaldehyde处理这一步，处理完了细胞就剩不下几个
，你想后面还有很多步骤呢。
试了好几次了，最后做完一个细胞也没有了，chamber slide预先再涂一遍poly-l-
lysine也没用，郁闷之级啊。
对了，细胞是colon cancer cells
先谢了 | r*********n
发帖数: 13992 | 2 要不要试一试用ice-cold methanol固定？ | w********u
发帖数: 5457 | 3 warm PBS wash only once, or without PBS wash, suck out the medium and
directly fix cells by PFA.
try 1% PFA, or ice-cold methanol.
try lower cell confluence
try BD poly-D-lysine coated chamber slides | m*****n
发帖数: 760 | 4 1. do not wash the plate.
2. add 4% PFA into the well immediately after you withdraw the medium
(one well each time, never let the well dry)
3. or add same volume of 8% PFA directly into the culture
without the withdrawl of the medium.
4. 10 minutes fixation, then wash with PBS.
【在 r*********n 的大作中提到】
: 俺养的细胞无论如何过不了Paraformaldehyde处理这一步，处理完了细胞就剩不下几个
: ，你想后面还有很多步骤呢。
: 试了好几次了，最后做完一个细胞也没有了，chamber slide预先再涂一遍poly-l-
: lysine也没用，郁闷之级啊。
: 对了，细胞是colon cancer cells
: 先谢了
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