m***6
发帖数: 424 | 1 Is there anyone who did lysosome staining?
I need good staining result. But with lysotracker could be done well.
Who could give some suggestions?
Thank you very much. |
z*y
发帖数: 84 | 2 Have you tried lysotracker or not? You can try LAMP-1 or LAMP-2, both of
which are lysosome makers. |
S*****s
发帖数: 287 | 3 Lysotracker 不错，不过只适合做 live cell imaging。用 PFA fix 之后就没信号了
。如果一定要做 fixed cells 的话还是用抗体吧。 |
j****g
发帖数: 406 | 4 我用Invitrogen的Lysotracker从来都是fix后再看的，好像没有大问题啊。
倒是mitotracker fix后在显微镜下bleach非常快。
【在 S*****s 的大作中提到】
: Lysotracker 不错，不过只适合做 live cell imaging。用 PFA fix 之后就没信号了
: 。如果一定要做 fixed cells 的话还是用抗体吧。
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m***6
发帖数: 424 | 5 谢谢各位兄弟姐妹，我试过了lysotracker不行所以才问的，live cell，1000uM都不行
，哎，麻烦死了，LAMP老板不让试，说人家都是lysotracker染的你怎么染不上？ |
P*******D
发帖数: 523 | 6 你用的lysotracker啥颜色的dye？一般红色的比绿色的好用，bleach的慢。1000 uM太
高了。
【在 m***6 的大作中提到】
: 谢谢各位兄弟姐妹，我试过了lysotracker不行所以才问的，live cell，1000uM都不行
: ，哎，麻烦死了，LAMP老板不让试，说人家都是lysotracker染的你怎么染不上？
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S*****s
发帖数: 287 | 7 不好意思一直没登陆 MIT。我以前试过 Lysotracker。按照 Invitrogen 的 Manual 做
的染色，不过我染色之后试了一下Paraformaldehyde 固定。没有加 PFA 的细胞能看
到类似于网上图片的染色 pattern，加了 PFA 的细胞就没信号了。1000uM 看起来浓度
有点高。我刚查了一下 Invitrogen 的 Manual，推荐的浓度是 50-70nM。你是不是重
新 dilute 一下原液？
【在 m***6 的大作中提到】
: 谢谢各位兄弟姐妹，我试过了lysotracker不行所以才问的，live cell，1000uM都不行
: ，哎，麻烦死了，LAMP老板不让试，说人家都是lysotracker染的你怎么染不上？
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m***6
发帖数: 424 | 8 嘿嘿，谢谢你啊
confocal老师也说是固定的时候bleach out的
呵呵，不过不固定怎么看啊？活细胞看吗？
【在 S*****s 的大作中提到】
: 不好意思一直没登陆 MIT。我以前试过 Lysotracker。按照 Invitrogen 的 Manual 做
: 的染色，不过我染色之后试了一下Paraformaldehyde 固定。没有加 PFA 的细胞能看
: 到类似于网上图片的染色 pattern，加了 PFA 的细胞就没信号了。1000uM 看起来浓度
: 有点高。我刚查了一下 Invitrogen 的 Manual，推荐的浓度是 50-70nM。你是不是重
: 新 dilute 一下原液？
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t******n
发帖数: 354 | 9 lamp2 santa cruz
【在 m***6 的大作中提到】
: Is there anyone who did lysosome staining?
: I need good staining result. But with lysotracker could be done well.
: Who could give some suggestions?
: Thank you very much.
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