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Biology版 - side population staining 是不是特 tricky 啊?
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b*****l
发帖数: 9499
1
会不会因为细胞数目,密度,hoechst 浓度,总量等等的很小的变化,导致 FACS 的结
果大相径庭啊?如果这样的话,如何保证各次实验间 parallel ?
h********0
发帖数: 944
2
你把条件都固定下来,不是就PARALLEL了

【在 b*****l 的大作中提到】
: 会不会因为细胞数目,密度,hoechst 浓度,总量等等的很小的变化,导致 FACS 的结
: 果大相径庭啊?如果这样的话,如何保证各次实验间 parallel ?

b*****l
发帖数: 9499
3
每次的细胞数目都不一样啊。然后听说要固定下来细胞数目才能保证 para?

的结

【在 h********0 的大作中提到】
: 你把条件都固定下来,不是就PARALLEL了
h********0
发帖数: 944
4
把浓度固定下来也行,标准是一个MILLION的CELL在1ML里,你自己UP OR DOWN SCALE不
就行了
b*****l
发帖数: 9499
5
要是我自己就好办了啊。是合作者。说,必须 1 million/ml,而且必须 1ml。体积,密
度变了,SP 的比例都变,他没办法解决。
问题是到哪里搞 1 million 的 primary SP 去啊。。。
各位做血做 bone marrow 用到 SP 的,都咋整?

【在 h********0 的大作中提到】
: 把浓度固定下来也行,标准是一个MILLION的CELL在1ML里,你自己UP OR DOWN SCALE不
: 就行了

x***g
发帖数: 923
6
1 million/ml是指whole marrow吧?怎么可能是SP cells。
另外SP就是个joke,goodle瞎忽悠的。不就是Hoechst low的细胞么。

,密

【在 b*****l 的大作中提到】
: 要是我自己就好办了啊。是合作者。说,必须 1 million/ml,而且必须 1ml。体积,密
: 度变了,SP 的比例都变,他没办法解决。
: 问题是到哪里搞 1 million 的 primary SP 去啊。。。
: 各位做血做 bone marrow 用到 SP 的,都咋整?

c******r
发帖数: 3778
7
没明白啊?
1 million/ml是指所有的cells啊,没stain怎么知道有多少sp呢?
你们做这个干吗用啊?过去很多人做sp是因为在老鼠上没有好的stem cell marker,而
sp有stem cell的properties,所以用来做stem cell selection。看你要研究的问题,
现在有很多markers可以用了,为啥一定要做sp?

,密

【在 b*****l 的大作中提到】
: 要是我自己就好办了啊。是合作者。说,必须 1 million/ml,而且必须 1ml。体积,密
: 度变了,SP 的比例都变,他没办法解决。
: 问题是到哪里搞 1 million 的 primary SP 去啊。。。
: 各位做血做 bone marrow 用到 SP 的,都咋整?

b*****l
发帖数: 9499
8
SP 也不简单就是 Hoechst low 吧。还是要在对角线上方的。
对了,为啥要在对角线上方?有啥说法没有?因为某种特殊的化学环境导致的红蓝 cha
nnel 信号不同?化学位移?

【在 x***g 的大作中提到】
: 1 million/ml是指whole marrow吧?怎么可能是SP cells。
: 另外SP就是个joke,goodle瞎忽悠的。不就是Hoechst low的细胞么。
:
: ,密

b*****l
发帖数: 9499
9
嗯,1 million/ml 是全部细胞。
做血的话,SP 还是比较经典的吧。

院]

【在 c******r 的大作中提到】
: 没明白啊?
: 1 million/ml是指所有的cells啊,没stain怎么知道有多少sp呢?
: 你们做这个干吗用啊?过去很多人做sp是因为在老鼠上没有好的stem cell marker,而
: sp有stem cell的properties,所以用来做stem cell selection。看你要研究的问题,
: 现在有很多markers可以用了,为啥一定要做sp?
:
: ,密

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