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Biology版 - Ni-NTA亲和层析柱纯化蛋白的问题
相关主题
Re: His tag的蛋白质不能纯化, 救命FPLC后imidazole仍残存,怎么办
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相关话题的讨论汇总
话题: 蛋白话题: 纯化话题: ni话题: 亲和层析话题: nta
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a*****3
发帖数: 565
1
想请教纯化蛋白的专家几个问题
1,用Ni-NTA亲和层析柱纯化蛋白,收集到的样品是带有完整的6xhis序列的蛋白
还是洗的时候被洗脱了。
2,有没有人碰到过纯化蛋白没有活性的情况?听说还是很有可能的。
3,如果有可能失活,哪类蛋白比较容易过柱后失去活性呢?
先谢谢了
l*****m
发帖数: 98
2
1, the sample you get will be those proteins without histine tag. the his-
tagged protein only comes out when you wash them with imidazole
2, i think they will still have the activity if it is folded
3, i donot know.

【在 a*****3 的大作中提到】
: 想请教纯化蛋白的专家几个问题
: 1,用Ni-NTA亲和层析柱纯化蛋白,收集到的样品是带有完整的6xhis序列的蛋白
: 还是洗的时候被洗脱了。
: 2,有没有人碰到过纯化蛋白没有活性的情况?听说还是很有可能的。
: 3,如果有可能失活,哪类蛋白比较容易过柱后失去活性呢?
: 先谢谢了

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请蛋白纯化专家指点求助:如何回答审稿人关于纯化获得可溶、膜蛋白的意外收获?
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[合集] 看了上面的讨论,向作结构的请教一下His protein purification 求助
Re: His tag的蛋白质不能纯化, 救命FPLC后imidazole仍残存,怎么办
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