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r***e
发帖数: 2539 | 2 不是说myc没有具体的target吗？是整个转录系统放大。
看最近的两篇back to back文章在Cell。
Lin, C. Y. et al. Transcriptional amplification in tumor cells with elev
ated c-Myc. Cell 151, 56–67 (2012)
Nie, Z. et al. c-Myc is a universal amplifier of expressed genes in lymp
hocytes and embryonic stem cells. Cell 151, 68–79 (2012)
http://www.nature.com/nrg/journal/v13/n11/full/nrg3364.html |
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L********g
发帖数: 4204 | 3 I am planning to do some protein purifications recently.
Is there any myc affinity column purchasable? I checked GE, there is no such
commercial column. Or people usually make their own myc column?
My lab has a FPLC system so that I really wish I can buy some column that I
can hook to the system (not a syringe of myc-matrix) .
I will giv Baozi to ppl who can help. Thanks. |
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发帖数: 1 | 4 myc-tag放在中间可以被识别。
前提是你对你的蛋白质上的domain和功能有很好的了解。不要插在其中，myc-tag尽量
能够暴露在外。
放在两端也可能会破坏蛋白质功能，比如N端信号肽。又比如KASH protein，myc放在C
端一定不行。
最简单的是BLAST一下，看看那个地方不保守就放哪里。 |
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d*********s
发帖数: 390 | 5 Someone used follow Ab,Please let me know which Ab is better for confocal
microscope!
1. c-Myc Antibody (9E10): sc-40
2. c-Myc Antibody (9E10) FITC sc-40 FITC
Many thanks!
God bless you! |
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f*******d
发帖数: 92 | 6 我刚开始做蛋白质方面的东西，是小白，希望大家赐教！我有一个蛋白A，在C
terminal加了Myc tag 和his tag, 然后在hepG2里面超表达。我想用mass spec看在A蛋
白的interacting proteins, 这种情况是用Myc tag来做IP 好呢，还是直接把lysate上
Ni TNA 的柱子呢？ |
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e****s
发帖数: 1125 | 7 单纯的蛋白蛋白interaction,我个人喜欢pulldown，因为下步Western不存在IGG干扰的
问题。不过Mass Spec就不知道了。建议是Imidazole特异洗脱，别用SDS buffer直接洗。
Myc做Co-IP还是不错的Tag，而且看见过几篇mass spec based proteomics用Myc. |
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f*******d
发帖数: 92 | 8 那用Imidazole洗脱之后，蛋白之间的interaction会被打断吗？洗脱之后还要exchange
buffer吗？还是直接可以加Myc Ab呢？
Myc |
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r***e
发帖数: 2539 | 9 应该很少见。这三个myc功能有redundancy。
你能说些myc高表达的细胞株吗？可能对我有帮助，谢谢。 |
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k*****n
发帖数: 323 | 10 不光是myc吧，大家对启动子的认识还是很初级的。哪怕是核心启动子，现在发现都没
有原来想象的那么简单。就拿myc为例子，为什么有Pol II pausing,是怎么被调控的，
好多都不清楚着呢。随着eRNA和promoter的反义RNA 的发现，它们的功能和调控也值得
进一步研究 |
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c******r
发帖数: 3778 | 11 myc基本是个proliferation signal德hub，很多signal最后都是到myc这里，所以调控
太复杂了。 |
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i*********0
发帖数: 915 | 12 有不同的evidence说myc通过转录调控和DDR 的通路（by increasing replication
origin firing-replicative stress）来导致tumoric transformation。如果是通过
DDR的通路，那么myc high的tumor有没有一些共同的变化？从染色层面来看，有没有某
两个特定染色体的融合？或者特定染色体arm和fragement的transcloation等等？
有没有那位懂行的来详述一下？
谢谢！ |
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g*****n
发帖数: 241 | 13 我的目标蛋白在C-term加了两个tag，其中的myc-tag放在倒数第二个，最后一个tag有
45个氨基酸，有的人说myc-tag必须在两端才能被识别，请问我这种情况做WB的话能被
抗体识别吗（比如9E10）?
谢谢！ |
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n********n
发帖数: 10 | 14 刚用了sigma的FLAG抗体,M2挺不错的.
c-Myc一直用的是Santa Cruz的9E10,虽然很多人不喜欢这个公司,但该抗体我已经用了4
年了,一直没出过啥问题. |
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T*****n
发帖数: 274 | 15 used Sigma FLAG, Covance Myc(9E11), Roche HA(12CA5), all worked perfectly.
btw: I'm working with budding yeast. |
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w***a
发帖数: 1053 | 16 最后一个不错，其他的不知道。。。。
myc我用cell signaling 的4b11自己crosslink beads. 也很不错。 |
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w***a
发帖数: 1053 | 18 cell signaling
感觉最好的anti-myc |
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w***a
发帖数: 1053 | 19 我用的是这个
Myc-Tag (9B11) Mouse mAb #2276 |
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c******g
发帖数: 49 | 20 检测myc fusion protein, 那个公司的抗体比较好?
cell signalling的 不知道怎么回事最近不好用了 |
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b******y
发帖数: 627 | 22 Ni TNA 的柱子 is too nonspecific. But you can do Ni TNA 的柱子 and then Myc
tag来做IP. |
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S*********s
发帖数: 304 | 23 // non-denature Tandem purification
3XFLAG + HA
or
ProteinA beads(IgG domain)+HA/FLAG
His or myc affinity and specific 不够~
//denature purification
His and biotag 会比较好~ |
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Z******t
发帖数: 206 | 24 想请问有没有细胞株3种myc family protein: c-, N-, L- 都高量表达的. |
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d****7
发帖数: 109 | 25 check this paper from Rick Young's lab, it might help: Transcriptional
Amplification in Tumor Cells with Elevated c-Myc |
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m*******u
发帖数: 173 | 26 前段时间有人推荐GFP trap, 请问用myc antibody pull down是不是特异性更高一些。
请问大家有什么推荐的？多谢了 |
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i*********0
发帖数: 915 | 28 最近听报告，一个大牛说，c-myc的mRNA调控是一个graveyrard，特别是promotor调控
这一块。这个oncogene算是做的很多了吧，为啥这在表达调控一块还是解释的不多？
希望懂行的来科普一下。
谢谢！ |
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B*****e
发帖数: 1005 | 29 大牛、小牛们，尽管目前生物学不景气，但我等小民还是要过日子，手头的事还是要顺
着做下去，讨口饭吃。
求各位求推荐一下ChIP中好用的GFP, Myc和HA的抗体， 多谢！ |
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d*****i
发帖数: 44 | 30 Abcam, ChIP grade GFP（#290）和Myc（#9123）抗体，HA不知道。 |
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r******k
发帖数: 446 | 32 GFP:Abcam
Myc HA我也用的abcam 或者santa 没啥问题 |
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r**a
发帖数: 121 | 33 各位，我以前实验室用的是hybridoma bank，9E10
挺好用的，但是用的dilution是1:5的样子，但是我们实验室自己有细胞系，所以无所
谓。
现在到了新实验室，要用这个抗体，大家推荐一下哪个公司的9E10 myc tag抗体好用啊
？Western和IF上应用！
谢谢啦！ |
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m******o
发帖数: 8504 | 35 “有的人说myc-tag必须在两端才能被识别”
这个有实验根据？
楼主可以亲自试一下，然后来给大家汇报以下 |
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d****n
发帖数: 5 | 36 近年来，当国内某些网站和媒体还在争议着中医是否科学，却不知在国际上，近三十多
年来中医阴阳学说已在现代生物医学界风靡，国外的生物医学科学家们津津乐道地研究
着中国古代的哲学思想，来寻找生命科学的理论突破口。他们已阴阳学说运用在现代医
学包括分子生物医学的各个分支领域，用来阐述和分析医学生物界各种的生理功能调节
和病理的变化，从而在更高的层次归纳总结生物体内的机能活动，组织结构及其内稳态
的相互关系，并为科学研究提供前瞻性的理论指导。
阴阳学说在现代医学中的兴起
在七十年代， 当时Goldberg ND教授发现了cAMP与cGMP（环磷酸鸟苷）通常呈拮抗性，
有共同参与调节生物细胞的作用，首次提出了细胞功能调节的“阴阳学说”假设。这一
观点引起了许多学者的兴趣，生物医学界相继发表了不少有关cAMP和cGMP的这种拮抗性
调节与阴阳对立消长的学术论文。此后在八十年代，科学家们试图将阴阳学说运用于医
学各个领域。其中1986年Marx JL在《科学》杂志上发表了“细胞生长调控的阴和阳”
，可以说是阴阳学说第一次在世界顶级科学刊物上被得到了认可，确立了阴阳学说的科
学性，及在现代生物医学中的运... 阅读全帖 |
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Z******5
发帖数: 435 | 37 应该不是上样量的问题，我striping后（或者跑的久一点，从45kD处剪开），用beta-
actin杂交，内参的信号已经非常强了，而内源性的c-myc还是很弱。
我用过的两家c-myc的抗体都能杂处很多条带，其中在48-65kD之间有三条条带，转入质
粒过表达显示最上面的条带才是c-myc的（有抗体公司说是表观分子量68kD，有文章说
是64kD，不过所指的是同一条带）。你可以参考这篇文章Nucleolar localization of
hepatic c-Myc: a potential mechanism for c-Myc regulation
关于内源性c-myc杂交很弱的问题，我查过很多文章，多数都是杂带很多，64kD处很弱
。有个别条带很专一，信号很强的，我很怀疑，因为我知道有人拿其它抗体，比如
actin抗体做了个figure，然后说是c-myc杂交的，还发了不错的文章。 |
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发帖数: 1 | 38
Download pdf published by SfN (Chapter from 'The History of Neuroscience in
Autobiography, Volume 8' edited by Larry R. Squire)
Yuh-Nung Jan's CV
Lily Jan's CV
Yuh-Nung Jan and Lily Jan
Birth
Family History and Growing Up
National Taiwan University
The Hiking Trip to Shitou in the Spring of 1967
Graduate School Application
Graduate Study at Caltech (1968锟974)
Seymour Benzer Lab (1974锟977)
Steve Kuffler锟絪 Lab at H... 阅读全帖 |
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d********e
发帖数: 321 | 39 想看看蛋白A是否和蛋白B 结合，蛋白A有个myc tag, 蛋白B没有任何tag. 所以IP的时候
就是用anti-myc (9E10)来 pull down蛋白complex，然后用anti-B抗体做WB。
我的negative control 是只表达B蛋白的细胞（没有A蛋白转染表达），这个negative
control 在WB上看不到B，也就是说B和anti-myc抗体或agarose beads 没有 non-speci
fic interaction. 我觉得这个阴性对照是合理的。
可是老板今天非要说这是个 bullshit negative control, you should use mutant pr
oteins (known for no interaction with each other) as negative control.
我听了之后，真TMD要发疯了，这两个蛋白连是否有interaction的确凿证据都没有，我
怎么知道要突变哪里才能导致这A和B没有interaction?
大家说说我的negative control合理吗？老板的问题是不是很... 阅读全帖 |
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h**********r
发帖数: 671 | 40 必须是pESC系列。
当时我还问大家要不要加kozak序列，也没说出个所以然来。后来我终于等到了客服的
答复。下面就是：
The GAL1 and GAL10 yeast promoters from the pESC-Leu vector have the FLAG or
the MYC epitopes in the two MCS of the vector. Both include ATG codons at
the 5’ end of the FLAG and the MYC epitopes. If you clone into the Bgl II
or the Xho I site in frame with the ATG of the epitope tag, you will have
the start codon, kozak sequence and should get good expression of your N-
tagged protein. If you need the epitope tag at the C-terminal, ... 阅读全帖 |
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b*********8
发帖数: 44 | 41 我在烟草中共表达A/HA 和 B/Myc。然后用 anti-HA agarose bead from Sigma来纯化
，用anti-myc来检测.
1. 在50K-200KD,为什么有很多的背景带？如果曝光时间短点， 总蛋白中的背景带很少
，但IP中的
背景带还很强。请问是什么原因，如何解决？
2. 因为我有个蛋白约150KD, 正好在背景区，而且表达量比较低。请问这类蛋白浓缩一
下是否效果会好些？
3. 很多用anti-HA 或anti-myc结合Protein A/G 来做Co-IP， 也有用MIltenyi biotec
uMACS protein isolatio kit来做。那个效果会好些？
非常感谢！ |
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z******o
发帖数: 78 | 42 前三次化疗用了D美罗华：600mg d1，CTX 1.3g d2，里葆多 40mg d2，长春地辛 5mg
d2，地塞米松 15mg d2-d6，同时予以碱化、水化、止吐、利尿、保护脏器等功能。
治疗效果是PET-CT: 1.口咽部右侧软组织影，胃内异常软组织影，均伴葡萄糖代谢稍增
高。2.肝囊肿，右肾囊肿。FISH(03-21):C-Myc/IgH(-),CCND1/IgH(-),BCL2/IgH(-),
API2/MALT（-），BCL6(-)。骨穿提示：淋巴瘤本次髓象大致缓解。FISH(03-21):C-Myc
/IgH(-),CCND1/IgH(-),BCL2/IgH(-),API2/MALT（-），BCL6(-)。白细胞计数：4.6*
10E9/L,中性粒细胞计数：4.21*10E9/L，血红蛋白：109g/L，血小板计数：132*10E9/L。
最近两次化疗计量增大了，我再问一下我爸要具体的报告。
请问为什么自体干细胞移植不能叫做手术呢？
非常感谢！！！ |
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K******9
发帖数: 63 | 43 Happy Easter!
A professional piano instructor,Katie Tang, now still has some time slots
for the students. She is the teacher member and potential board member of
MTAC (Music teachers association of California) (www.mtac.org)(www.
mtacsantaclara.org) She is also the member of MYC(Music for Young Children
www.myc.com). She is an experienced teacher for all ages and all level. She
is falimiliar with the American methord as well as Chinese method. She
teaches comprehensively, including performance, |
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K******9
发帖数: 63 | 44 Happy Easter!
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K******9
发帖数: 63 | 45 Happy Easter!
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K******9
发帖数: 63 | 46 Happy Easter!
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j*********n
发帖数: 126 | 47 海棠社里八仙歌
肥狐(fox)腹笥更便便[1]，
版中唱和赖辑编，
却说心仪密立粘；
木木(seman)神龙偶蹁跹，
指点人物意悠闲[2]；
米克(myc)少言语谦然，
一曲深恨可问天[3]，
常教读罢泪欲涟；
秋堂(qiutang)远自浦江边，
蝌蚪大作辨难全，[4]
欲赏不得叹连连；
精灵(LittleSpirit)快笔各区传，
管下风月似涌泉，
上站只得数周间，
贴文早过一千篇；
虾兄(citieeg)别名堪流涎，
苦吟常为月难圆，
“不倦诗书为怕闲”[5]；
草壳(jeo)自是艺双全，
写罢白话弄文言；
锦瑟无端五十弦，
镇日意趣古诗卷，
恨不早生一千年！
注[1]：是说肥狐肚子里故实不少，不是冲着名字去的欧:-)
[2]: 不久前有人贴文说“这版上才子，才女不少啊”，木木兄
当即回贴：“子，女不少，‘才’则。。。”云云:-)
[3]: myc发的<<太常引>>是偶极推许的；
[4]：秋堂兄远来，可惜大作偶的南极星看不了压:-(
[5]: 这是引的虾兄的一句词，也曾备受赞许的。 |
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d**********u
发帖数: 4124 | 48 ☆─────────────────────────────────────☆
CaMKII (不作postdog) 于 (Sat Nov 8 01:18:35 2008) 提到:
发信人: CaMKII (不作postdog), 信区: Biology
标 题: 北大邓宏魁发了一篇Cell Stem Cell
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Nov 7 22:09:29 2008)
做的也是iPSC，看来和国外跟得很紧啊。
北大今年ms很牛，除了程和平之前发的一篇Cell，程还有一篇Nature被接受，另外尚永
丰也有一篇Cell被接受。
Cell Stem Cell, Volume 3, Issue 5, 475-479, 6 November 2008
doi:10.1016/j.stem.2008.10.002
Two Supporting Factors Greatly Improve the Efficiency of Human iPSC
Generation
Yang Zhao1, 4, Xiaolei Yin1, 2, 4, Han Qin1,... 阅读全帖 |
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f**e
发帖数: 1269 | 49 myc会干这么没创意的事吗？myc肯定是喝完了水发现走了二十几里路还没找到restroom
于是…… |
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f**e
发帖数: 1269 | 50 是说俺那贴还是myc那贴？说清楚嘛，也好让myc或者俺虚荣心得到点满足。要看笑话有
的是，俺以前好像写过一个CSCSI逸事，不晓得还在不在。找到的话贴上来给你看个够。 |
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