C******T 发帖数: 300 | 1 最近需要Knockdown一个蛋白,然后把一个Mutant蛋白transfect进去看看能不能rescue
。哪位知道siRNA-resistant mutants要怎么得到?我查了一下文献,没有人提供这个
siRNA-resistant mutants要突变哪些位点?还是我买一个vector,把mutant的cDNA放
到这个vector上?
多谢多谢 |
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g*********d 发帖数: 233 | 2 1. Mutant Substitutions at Linked Nucleotide Sites.
Watterson, G A
ADV. APPL. PROB. Vol. 14, no. 2, pp. 206-224. 1982
Approximate results are obtained for the probability distribution of the
number of mutant substitutions over a given number of generations. The
distribution is a compound Poisson distribution havign a variance which
is greater than the mean. The substitutions occur in clusters. The most
extreme case of clustering is studied in this paper, which assumes that
there is no recombina... 阅读全帖 |
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d**********r 发帖数: 24123 | 3 举个例子吧:
在 time 0 的时候,Control 骨密度是 1, 在 time 3 month 的时候 Control 骨密度
是 2
在 time 0 的时候,Mutant 骨密度是 5, 在 time 3 month 的时候 Mutant 骨密度是
3
那么就用 Time 0 的数据作为Baseline,计算 Change of Baseline 为:
CFB = 2-1 = 1 , control
CFB = 3-5 = -2 , Mutant
然后,把 CFB 作为response:
Mixed Model:
CFB = treatment + 其他factors
这样来看 treatment的effects |
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A********X 发帖数: 204 | 4 Marvel宇宙中不把他当mutant,估计因为不是x-men系列故事的角色
但是从某种意义上说确实是mutant,体质特殊,除了对super soldier serum不排异以外
还可以通过自身新陈代谢不断产生super soldier serum
当然没注射serum之前这个能力等于没有
Transformer特指Cybertron来的外星机器人。。。 |
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k****n 发帖数: 42 | 5 就是说cell line 是只表达p53 mutant, 还是既表达mutant p53 , 也表达WT P53,
thanks! |
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r******k 发帖数: 446 | 6 看到一篇文章 写着mutant能进入nucleus, 而强调WT不行。 为什么呢? mutant自己
进nucleus,肯定有功能呀。跟WT有啥关系? |
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r******k 发帖数: 446 | 7 大神们, gain of function的mutant protein会不会比WT被降解的更快呢?以我所知
,一般不都是loss of function的mutant form of protein会被degrade更快么??? |
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r******k 发帖数: 446 | 8 我一般的理解是mutant 更稳定。 比如p53的mutation比 p53 WT更稳定,cause更多的
bad effect。
但是对于我这个我还真没想明白,如果mutant protein能degrade更快,能说明啥呢? |
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s******s 发帖数: 13035 | 9 我不是说了么。misfold了就容易降解。
我只能说很多lof的mutant应该会misfold, 至于你的mutant到底是啥,只有你知道
我不是这行的,knowledge就这么多了
proteasome |
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s******y 发帖数: 28562 | 10 P53 的那个mutant 是个特例。
P53 属于降解非常快的蛋白,比一般蛋白快很多倍。原因是P53 上有一些特异识别区域
让它能够降解得那么快。它的mutation如果在那些区域就有可能阻止它的降解。
但是大部分蛋白没有这种机制。所以一般是正常蛋白降解慢,mutant 因为折叠不正常
而降解快。 |
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g*****n 发帖数: 241 | 11 别人介绍了这个方法给我: “C. elegans mutant identification with a one-step
whole-genome-sequencing and SNP mapping strategy”,看上去不错,不知道版上有
没有人用过这个方法找出forward genetic screen里筛到的mutant?这个方法是否容易
,或者有没有什么瓶颈?
谢谢 |
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D*a 发帖数: 6830 | 12 有control和mutant两组小鼠,用某种treatment处理三个月,处理前和处理后分别测量骨密度,问两组小鼠的骨密度变化是否有区别?
请问各位大牛,因为本来control和mutant的骨密度就有区别,所以加上treatment的影响,不知道该用什么test啊? |
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a***a 发帖数: 40617 | 14 黑哥黑客:图一、2007年:未健身时(三年前)。 图二、2008年:健身三个月(190减到
145甩掉45斤)。 图三、2008年:吃增肌粉长肌肉(我最喜欢的时候)。 图四、2010
年:胖了(汗)。 图五、2011年:变化最大了?(去年的牛仔裤一条也穿不了)。 图
六、现在:减了10斤(又穿回去年的牛仔裤)。
基本上大型图2就有,说是3个月健身的结果。我怎么也无法相信啊。。。大家评评
要不就是传说中的1% mutant。。。 |
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a***a 发帖数: 40617 | 15 mutant就是基因“好”
看来瓜叔跟我看法一致,第一张他双臂上扬不知道本来有没有胸,有多少,
3个月胸前长那么大两陀出来太惊人了 |
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m*x 发帖数: 200 | 16 如果说是Mutant,貌似也没啥强烈的变异,只是身体变壮变灵活了,外加盾牌。
也许应该算是迷你型的Transformer. |
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d******k 发帖数: 4295 | 17 嗯,只有xmen里头的才是mutant。连holk都不算。
以外
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.2.2 |
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w********r 发帖数: 14958 | 19 美国队长天生弱小干瘦, 异于常人。 应该也算一种mutant |
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m*x 发帖数: 200 | 20 不是吧,X-men中的mutant有一部分是辐射导致的,比如某某参议员。 |
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D**S 发帖数: 24887 | 21 应该算mutant了,只不过不是天生而已.Transformer?他能嘎嘎嘎嘎几下子变成一辆车么
? |
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j****x 发帖数: 1704 | 22 一般而言,resistance factor定义为EC50(mutant)/EC50(wt),如果你要比较两个突变
,同理。(当然这里面有一个前提)
假如不显著,再换Vmax,不过就得费点口舌了 |
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f*******e 发帖数: 109 | 23 实验需要在酵母里做某个基因的knock in mutant,来验证我们结构和生化的结果,由
于从来没做过酵母,大家谁有一个现成的protocal吗?谢谢! |
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w********r 发帖数: 1431 | 24 你这个情况我觉得很难讲。
我以前做siRNA resistant的cDNA mutant,是根据SiRNA的序列,对应的每个codon都做
silent mutation,绝大部分都work。直到有一次,虽然突变了,但是仍然可以被siRNA
干掉。
后来我做rescue就设计target 3'UTR的siRNA,然后直接用wt cDNA做rescue就可以了。 |
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z*******9 发帖数: 112 | 25 有两个问题,想请教作Random Mutagenesis 的同仁,
1. 建完mutant library后,一般需要把bacteria涂板后,然后再把平板上所有的菌落
刮下,抽提DNA,
(这一步,我能不能偷懒,直接就把transformed的bacteria接种到液体培养基里,然
后直接抽最终的bacteria DNA。)
这个问题其实就是,为何建突变文库的最后为何一定要涂板培养?
2. 还有就是,这里的细胞scraper的头太硬了,每次刮菌落时都要把培养基刮下几块,
想问大家有没有推荐一个头较软的scraper,或者对刮菌落有什么建议,谢谢, |
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r**a 发帖数: 121 | 26 如果是修饰,不稀奇。
但是如果是mutant,能进入核中,这个还是有点意思的吧!
也许会引起细胞的一些功能紊乱,可能是一些疾病的机理呢
具体当然要看蛋白和其影响的过程了 |
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r******k 发帖数: 446 | 27 但若是WT也能进去呢? 那mutant 进去就没啥意义了? |
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T*****e 发帖数: 247 | 28 进核时的各种条件(刺激)都一样吗?
mutant突变的位置是在出核/入核序列上?
楼主描述的太简单了。 |
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c****1 发帖数: 1095 | 29 有可能是这么一种情况:
WT也可以入核,只不过是有条件的,只有在某条信号通路激活的情况下才行。
mutant可以无条件入核,这样就失调了。 |
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r******k 发帖数: 446 | 30 hi 您好。 我是transfect我的wt和mutat 到细胞里面,然后看他们是否被proteasome
降解。 如果一个mutant protein更容易降解,在生物学上有什么意义吗? 小弟刚入行
,多谢指点! |
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r******k 发帖数: 446 | 31 hi 您好。 我是transfect我的wt和mutat 到细胞里面,然后看他们是否被proteasome
降解。 如果一个mutant protein更容易降解,在生物学上有什么意义吗? 小弟刚入行
,多谢指点! |
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C****n 发帖数: 79 | 32 先感谢版上的各位大虾,经过trouble-shooting,CRISPR在我们这个真菌里总算work了
。不过现在有个现象我解释不清楚,由于本人遗传学不是很强,所以想再次请教一下专
家。
我拿到单mutant后,sequence了target,但是很奇怪,sequencing结果显示我们这个
diploid的真菌只有一个单一的mutated target,这是为什么呢?NHEJ是随机的,理论
上说, diploid应该会出现两个allel不同的情况。是发生了gene conversion了,还是
其他原因?谢谢 |
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C****n 发帖数: 79 | 33 我随机挑取了5个单clone, 提gDNA, PCR然后测序,这五个mutants之间的序列是不同
,但是对于每一个clone,只有一个测序结果,也就是说两个allel都突变成一样的序列
,这就很奇怪。 |
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d**********r 发帖数: 24123 | 34 If "本来control和mutant的骨密度就有区别", then you should change the
response to be the Change from Baseline. |
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D*a 发帖数: 6830 | 35 请问怎么样“control mouse should be physically very similar to trt group”?
我这两个group本来就有差别的,本来mutant就对这个parameter 有影响,现在再加上
treatment的影响,我想知道treatment对这个变化的影响是否有significant
difference. |
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发帖数: 1 | 37
Download pdf published by SfN (Chapter from 'The History of Neuroscience in
Autobiography, Volume 8' edited by Larry R. Squire)
Yuh-Nung Jan's CV
Lily Jan's CV
Yuh-Nung Jan and Lily Jan
Birth
Family History and Growing Up
National Taiwan University
The Hiking Trip to Shitou in the Spring of 1967
Graduate School Application
Graduate Study at Caltech (1968锟974)
Seymour Benzer Lab (1974锟977)
Steve Kuffler锟絪 Lab at H... 阅读全帖 |
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g*****n 发帖数: 241 | 38 谢谢大家回复,我统计方面是菜鸟,所以想请教一下大家
我的样品是这样的
1) WT, 2) mutant A (partial loss of function), 3) mutant A (null); 4)
mutant B (null), 以及mutant B和两种mutant A的组合。我想看各个mutant和WT是否
有差异,mutant A和B之间是否有差异,mutant A的partial loss of function是否和
null有差异;以及双突变是否和单突变有差异(看是否是叠加效应)。所以想两两比较。
谢谢大家 |
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c******a 发帖数: 10623 | 39 哈哈,真是有人说的对啊,这前老公还是伯克利的AP,以前发的文章挂了好多她的名字
。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。
卡卡,这下这女滴真是出名乐
http://baolab.org/Pub.html
http://neuroscience.berkeley.edu/users/users_profile.php?id=66
1. Chen C, Kano M, Abeliovich A, Chen L, Bao S, Kim JJ, Hashimoto K,
Thompson RF and Tonegawa S. (1995). Impaired motor coordination correlates
with persistent multiple climbing fiber innervation in PKC-gama mutant mice.
Cell, 83, 1233-1242.
2. Chen L, Bao S, Kim JJ, Lockard J and Thompson RF. (1996). Impaired
classical eyebli... 阅读全帖 |
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l*******r 发帖数: 39279 | 40 Cerebellar cortical inhibition and classical eyeblink conditioning.
Bao S, Chen L, Kim JJ, Thompson RF.
Proc Natl Acad Sci U S A. 2002 Feb 5;99(3):1592-7. Epub 2002 Jan 22.
Learning- and cerebellum-dependent neuronal activity in the lateral pontine
nucleus.
Bao S, Chen L, Thompson RF.
Behav Neurosci. 2000 Apr;114(2):254-61.
Impaired cerebellar synapse maturation in waggler, a mutant mouse with a dis
rupted neuronal calcium channel gamma subunit.
Chen L, Bao S, Qiao X, Thompson RF.
Proc Natl Acad... 阅读全帖 |
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c*********l 发帖数: 3438 | 41 【 以下文字转载自 SanFrancisco 讨论区 】
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标 题: 诺贝尔奖获得者Sudhof老婆是踹了原配找美国老头的中国裔女留学(转载)
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标 题: 诺贝尔奖获得者Sudhof老婆是踹了原配找美国老头的中国裔女留学生ZZ
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诺贝尔奖获得者Sudhof老婆是踹了原配找美国老头的中国裔女留学生
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新浪微博有人爆料,诺贝尔奖获得者Sudhof老婆是踹了中国原配找美国老头的中国
裔女留学生:
@walnut姐姐:他Lp和她的前lg是国内大学同学双飞,后来俩人经过奋斗成为某校ap
,那时她的前lg给她挂了很多文章。后来她搭上了sudhof,离婚又结婚又生女,然后就迅... 阅读全帖 |
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q******s 发帖数: 7469 | 42 【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
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速得了... 阅读全帖 |
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k*****e 发帖数: 22013 | 43 【 以下文字转载自 Rainbow 讨论区 】
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标 题: 转载X战警影评:变种人与Gay(剧透慎入)
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zz from douban.com
Mutant and pride ——最后Raven对Beast说
纵观X-Men电影系列,都在讲述变种人和人类的冲突,还有变种人与变种人因意
识阵营不同产生的冲突。
人类因为恐惧未知的变种人而对变种人进行各种压制。如X-Men 2中试图控制X教
授杀光全部变种人的大胖子,在X-Men 3: The Last Stand中想要治疗所有变种人的
解药和X-Men: First Class里最后对岛上所有变种人进行导弹总攻的故事一样。代表
人类群体的政府总想要抹去变种人的一切。正如代表异性群体的现实中的政府也总想
忽视或者抵制同性群体一般。
记得冰人的母亲对他说“Have you tried not to be a mutant?”影片中大多数
家人也都表现出难以接受自己的孩子... 阅读全帖 |
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L***s 发帖数: 9258 | 44 【 以下文字转载自 Returnee 讨论区 】
发信人: oceaneyes (oceaneyes), 信区: Returnee
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L***s 发帖数: 9258 | 45 【 以下文字转载自 Returnee 讨论区 】
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h***e 发帖数: 20195 | 47 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
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速得了某个行内特大的奖得了tenure,她前lg现在还是个ap,一个女人是怎么成功的
我解说一下,今年的诺贝尔生物及医学奖奖获得者Sudhof,他的老婆叫做陈路,是
无锡人,毕业于无锡二中(今辅仁中学)、无锡一小、无锡机关幼儿园。
陈路1989年考入中科大,后来去... 阅读全帖 |
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c*********o 发帖数: 8367 | 48 【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
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h***e 发帖数: 20195 | 49 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
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速得了某个行内特大的奖得了tenure,她前lg现在还是个ap,一个女人是怎么成功的
我解说一下,今年的诺贝尔生物及医学奖奖获得者Sudhof,他的老婆叫做陈路,是
无锡人,毕业于无锡二中(今辅仁中学)、无锡一小、无锡机关幼儿园。
陈路1989年考入中科大,后来去... 阅读全帖 |
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L***y 发帖数: 125 | 50 【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
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