w*****r
发帖数: 2061 | 1 是不是G418只能筛选HEK 293？HEK 293T自带G418抗性？
多谢 |
|
|
s******y
发帖数: 28562 | 3 HEK 293T 本身不带G418 抗性。
但是因为 293T可以不停的复制环状的质粒，所以不管是否稳定转染，都会有抗性，
会导致你很难筛选出被稳定转染的细胞。 |
|
s******r
发帖数: 2876 | 4 293T本身应该是G418 resistant，不然它那个大T抗原怎么进去的。
HEK 293T 本身不带G418 抗性。
但是因为 293T可以不停的复制环状的质粒，所以不管是否稳定转染，都会有抗性，
会导致你很难筛选出被稳定转染的细胞。 |
|
j*****q
发帖数: 82 | 5 提供200mg以下单克隆抗体，融合蛋白以及其他重组蛋白在CHO/HEK 293里瞬时表达蛋白
和纯化的服务。提供关于纯度，浓度，内毒，ID等其他可以订制的表征服务。
这样的服务大家有需要吗？
需要的请PM详谈。
谢谢 |
|
e****s
发帖数: 1125 | 6 200 mg蛋白？
CHO/HEK 293表达量有那么高吗？ |
|
i***R
发帖数: 663 | 7 Do you think K is charge carrier or Cl ?
Why don't change your ex solution composition to figure out.
Still, 10nA is Very high. We never see such current in blank HEK cell.
There is 100pA background current at most.
If you are not sure about your HEK cell. The easiest way is to get some
other HEK cell from other lab or ATCC. |
|
l****z
发帖数: 29846 | 8 PepsiCo has come under fire from pro-life advocates because it has been
contracting with a research firm that uses fetal cells from babies
victimized by abortions to test and produce artificial flavor enhancers.
Now, the Obama administration is set to face more criticism because an
agency has declared that Pepsi’s use of the company and its controversial
flavor testing process constitutes “ordinary business.”
In a decision delivered February 28, the Security and Exchange Commission
ruled that Pe... 阅读全帖 |
|
d****t
发帖数: 748 | 9 ☆─────────────────────────────────────☆
hek (黑头发小新) 于 (Thu Jun 9 22:59:40 2005) 提到:
lp从北航拿的ph.d.学位，具体是做金属材料腐蚀防护分析的。二月份过来
陪读以来，一直在发信联系postdoc，几十封信出去，
结果除了据信就是没回音。
现在都开始考虑考GRE重申其他专业ph.d.了，我就纳闷了，难道材料系的
postdoc就那么难申请吗？
☆─────────────────────────────────────☆
tin (大猪小猪摞一盘:微中心superbowl竞猜冠军) 于 (Thu Jun 9 23:07:28 2005) 提到:
可惜俺PostDoc时候的老板这个月退休不找人了
不然你LP倒是很适合
☆─────────────────────────────────────☆
hek (黑头发小新) 于 (Thu Jun 9 23:11:39 2005) 提到:
兄台是材料系的？
☆───────────────────────────────── |
|
h******y
发帖数: 351 | 10 Although the HEK/OATs over-expressing cells can be used to study drug uptake
, they do not form epithelial barrier on Transwell, so it is impossible to
study drug efflux using this model. Plus, HEKs lack other important
membrane transporters besides OATs/OCTs.
What do you think about primary RPTECs? Do they suffice for in vitro cell
model?
OCT2 |
|
|
s*******k
发帖数: 11 | 12 Slaap in vrede, onze geliefde heks, Beatrice
Alagherius Dantes, Firenze, 1318.
以下内容转载自站外私信 有本事的人就是有本事 写出来的东西崇拜到不行
让国人清醒清醒，不要睡在所谓“五千年文明的泱泱大国”里做梦了，对于所提到的那
些事实，我基本也认可，比如说在文明的古老性上来说，四大文明古国里中国是时间最
短了，印度、巴比伦什么的都是六七千年（没查证，但至少巴比伦比中国久远），中国
顶多只能说4000年，而且夏商周断代工程里用了很多伪书中的记载当证据，很不靠谱。
问题在于，我虽然清楚事实，但我并不觉得事实有多重要，换句话说，在政治需要和当
代人的生存面前，事实只是个可变参数罢了。
拿“5000年文明史”来说吧，清朝的时候没这个说法，这个说法产生于近代，最开始大
概是说3000年，后来说是4000年，再后来觉得5000年听起来比较整，于是就这么流传下
来了，提出这个说法的目的是为了唤起国人的民族自尊心，相信中华历史悠久，自古牛
X，人才辈出，现在虽然国难当头，但大家要有信心，不会亡国的。类似的口号、文章
很多，具... 阅读全帖 |
|
m***n
发帖数: 12188 | 13 把古汉语词和古玛雅语词进行比较，对应关系就更为突出，亲属关系更
加清楚：ka苦：ka苦的；kai歌：kai歌唱；hiua雨：ha雨，水；miua无：ma没，
不，无；tau刀：ta刀；ta肚：taa肚子；diek直：tek（toh）直；piek壁：
pak墙壁；chiak赤：chak红色的；shiuok数：xok（x在此读sh）数；dok读：xok读；
biuat伐（砍）：bat斧；liang亮：lem亮；diang长：tam深，长；iang央：yam在
中央；giuan倦：kan疲倦；giang强：kan强有力的；huang黄：kan黄色的；
sheng生：sian生的时间；dzian前：tan在前。
这里的古汉语是上古汉语，为语言学大师王力所构拟，主要是《诗经》里的
词。玛雅语是中古语，也有的是上古语、原始玛雅语的词。
由于玛雅人和中国人之间隔着浩瀚的太平洋，所以这些相同或相似的词不可能是互相借
用的外来语，而只能是共同语言的遗迹。又由于这样的词数量很大，对应规律性很强，
所以不可能是偶然的相似，而只能是必然性的显示。
玛雅语和汉语共有的基本词汇，提供了计算玛雅语和汉语分开的时间。... 阅读全帖 |
|
b******d
发帖数: 9694 | 14 原文在http://www.mitbbs.com/pc/pccon_7803_122415.html并附在本文后面。
现在回过头来看原文预测， 很遗憾股市点位以及时间点的预测差了许多， 但是中国经
济以及股市基本上是朝预测的方向行进的， 接下来中国政府的任何救市救经济（也许
股市短期会反弹个10%-20%）基本上都是徒劳的， 中国经济将不以任何人的意志为转移
一路狂奔到崩盘的。 通常情况下股市都是走在经济的前列的， 如果说过去一年多中国
的无数企业以及老百姓已经强烈的感受到中国经济放缓甚至几乎停滞不前所带来的阵痛
的话， 那么接下来三年中国老百姓将经历的痛苦和绝望将远超他们已经感受到的痛苦
十倍百倍不止。 祥林输我不得不维持原来的预测甚至比原来的预测还要悲观， 接下来
三年由于外资疯狂撤离，再加上贪官污吏以及有钱人疯狂移民海外，上海股指一定会跌
破1000点，上海北京的房价在现在的基础上至少要崩盘50%以上， 其他地方就更惨不忍
睹了；人民币跌破10一定是板上钉钉的事， 极端情况下跌到20祥林输我也不会觉得奇
怪。 可以说中国经济发展到今天应该是世界经济发展史自有记录以来的最为奇特最为... 阅读全帖 |
|
m****s
发帖数: 18160 | 15 此表为精华区内所有feedback的统计（从04/01/2006开始）。制作此表的目的是为了让
大家能够了解近期feedback情况。由于feedback数量庞大，在制作此表的过程中采用了
电脑程序，以后也将继续使用此程序。所以，希望大家以后在留feedback时，能采用模
板发文，这样才能保证feedback能被正确的统计。
[0] MITBBS
[-] MITBBS
以下这些feedback题目都不合格：
1) 【＋】MITBBS
2) ++++++MITBBS
3) (+) MITBBS
4) [+] MITBBS, JIAOYOU8, HUAREN (只有第一个ID会被统计到)
5) [MITBBS]+++++
6) [+] 未名空间
最后更新：
+/0 feedbacks updated to Jul 29, 2012.
- feedbacks updated to Jul 29, 2012.
?? 3 0 0
?JINGO 1 0 0
A321321321 3 0 0
A7 17 0 0
AAAAA1 3 0 0
AAABBC 2 0 0
AAAPPP 1 0 0
A... 阅读全帖 |
|
K****D
发帖数: 30533 | 16 此表为精华区内所有feedback的统计（从04/01/2006开始，更古老的feedback已经
删除）。制作此表的目的是为了让大家能够了解近期feedback情况。
由于feedback数量庞大，在制作此表的过程中采用了电脑程序，以后也将继续使用
此程序。所以，希望大家以后在留feedback时，能采用模板发文，这样才能保证
feedback能被正确的统计。
正确的题目格式为 (replace MITBBS with the ID you are leaving feedback for):
[+] MITBBS
[0] MITBBS
[-] MITBBS
以下这些feedback题目都不合格：
1) 【＋】MITBBS
2) ++++++MITBBS
3) (+) MITBBS
4) [+] MITBBS, JIAOYOU8, HUAREN (只有第一个ID会被统计到)
5) [MITBBS]+++++
6) [+] 未名空间
最后更新：
+/0 feedbacks updated to Jun 30, 2011.
- feedbacks updated to Jun 30... 阅读全帖 |
|
m****s
发帖数: 18160 | 17 此表为精华区内所有feedback的统计（从04/01/2006开始）。制作此表的目的是为了让
大家能够了解近期feedback情况。由于feedback数量庞大，在制作此表的过程中采用了
电脑程序，以后也将继续使用此程序。所以，希望大家以后在留feedback时，能采用模
板发文，这样才能保证feedback能被正确的统计。
[0] MITBBS
[-] MITBBS
以下这些feedback题目都不合格：
1) 【＋】MITBBS
2) ++++++MITBBS
3) (+) MITBBS
4) [+] MITBBS, JIAOYOU8, HUAREN (只有第一个ID会被统计到)
5) [MITBBS]+++++
6) [+] 未名空间
最后更新：
+/0 feedbacks updated to Aug 26, 2011.
- feedbacks updated to Aug26, 2011.
===========================================
ID + 0 -
============... 阅读全帖 |
|
m****s
发帖数: 18160 | 18 此表为精华区内所有feedback的统计（从04/01/2006开始）。制作此表的目的是为了让
大家能够了解近期feedback情况。由于feedback数量庞大，在制作此表的过程中采用了
电脑程序，以后也将继续使用此程序。所以，希望大家以后在留feedback时，能采用模
板发文，这样才能保证feedback能被正确的统计。
[0] MITBBS
[-] MITBBS
以下这些feedback题目都不合格：
1) 【＋】MITBBS
2) ++++++MITBBS
3) (+) MITBBS
4) [+] MITBBS, JIAOYOU8, HUAREN (只有第一个ID会被统计到)
5) [MITBBS]+++++
6) [+] 未名空间
最后更新：
+/0 feedbacks updated to Aug 26, 2011.
- feedbacks updated to Aug26, 2011.
===========================================
ID + 0 -
============... 阅读全帖 |
|
m******s
发帖数: 665 | 19 自2006年1月份以来二手市场建立了feedback制度，方便大家在交易的过程中给大家提
供一个公平交易的评价方式。
为了便于大家查找信誉，请标题用规范的格式。
以下这些feedback题目都不合格
1，【+】MITBBS
2，+++++++MITBBS
3，(+)MITBBS
4,[+]MITBBS,JIAOYOU8,HUAREN(只有第一个会被统计到)
5，[MITBBS]+++++
6,[+]未名空间
本次统计的截止日期为：
+ 的统计截止日期到 Sun Aug 15 2012
- 的统计截止日期到 Sun Aug 15 2012
id + 0 -
?? 3 0 0
?JINGO 1 0 0
A321321321 3 0 0
A7 17 0 0
AAAAA1 3 0 0
AAABBC 2 0 0
AAAPPP 1 0 0
AAATY 1 0 0
AADDOO 5 0 0
AANON 6 0 0
abao2000 2 0 0
abc111 1 0 0
ABCD123 5 0 0
ABCDEFGHIJK 1 0 0
ABED 32 1 0
ABERDE... 阅读全帖 |
|
m******s
发帖数: 665 | 20 H123456 1 0 0
H2000 2 0 0
H5 17 0 0
HAGE 1 0 0
HAGUE 1 0 0
HAHAQJ 2 0 0
HAHAWA 2 0 0
haibara 3 0 0
HALIFAX 2 0 0
HALLOTONY 3 0 0
HALO 1 0 0
HamihamihA 1 0 0
HAMSTER 1 0 0
HANEL 3 0 1
HANGGATOR 8 0 0
HANNAHER 3 0 0
HANNAHH 1 0 0
HANNAX 6 0 0
hanstar 1 0 0
HANVIN 1 0 0
hanweifish 1 0 0
HAOBAOBAO100 2 0 0
HAOC 1 0 0
HAOGG 1 0 0
HAOMAN 7 0 0
haoman888 2 0 0
HAOYULIU0010 6 0 0
HAPPIGEE 2 0 0
HAPPPPY 1 0 0
HAPPY101 1 0 0
HAPPY22 6 0 0
happyandsad 1 0 0
HAPPYANGEL 16 0 0
HAPPYANGLE 1 0 0
happybaby 1 0 ... 阅读全帖 |
|
k*****n
发帖数: 9823 | 21 现有78人报名，但最终能拿到多少还不能确定。
另外，我发现绝大多数都是从不露面的ID，如果按报名先后来算的话对经常来本版灌水
的ID不太公平。
我待会统计一下报名前发文超过10篇的ID，团购耳机数量不足的话我会优先考虑他们。
以下是名单，若有遗漏，请发信告知
ID后的数字是近一年内发文数目（至少有1篇的只有35人，其中还有不少是昨天和今天发文的）
aaaty 50
agoo 0
alpha 0
animalright 0
atwoseven 12
aural 0
battery 0
birdf 0
bleet 0
callbut 0
cdenen 0
comid 0
cssaceo 0
dash1 63
dendron 1
devtt 0
didarsmile 0
dynkin 70
ericliquid 4
eudreamality 3
fancieryu 0
fmurfin 0
galapagos 0
gjmylove 1
hek 1
hitchhiker 4
hte 0
huyouncic 0
iamspoon 0
ibd 26
ibjobseeker 0
ichor 2
ij |
|
l*********i
发帖数: 22 | 22 http://ucsfhr.ucsf.edu/careers/
Req Number 23180BR
Job Title Staff Research Associate I or II
Job Summary Incumbent will perform over expression of crystallographic
amounts of mammalian membrane proteins in Pichia and Saccharomyces yeast
cells (If needed, expression levels will also be determined in E. coli and
mammalian cells such as HEK); design and construct suitable expression
vectors; determine expression levels from small-scale cultures; grow
fermentor-size cultures once adequate expressio |
|
z****l
发帖数: 5282 | 23 ☆─────────────────────────────────────☆
zuomai (拭者如风) 于 (Mon Dec 26 09:30:40 2005) 提到:
tmd.一大早就打过来告诉我这个.
要fax好些东西,account也suspend了.
看来都要cancel了.
真tmd衰啊.
☆─────────────────────────────────────☆
hek (黑头发小新) 于 (Mon Dec 26 10:16:42 2005) 提到:
reason?
☆─────────────────────────────────────☆
Cabbage (@圆白菜: 热爱生命,远离灌水@) 于 (Mon Dec 26 13:02:58 2005) 提到:
cft again
☆─────────────────────────────────────☆
Cabbage (@圆白菜: 热爱生命,远离灌水@) 于 (Mon Dec 26 13:03:20 2005) 提到:
花的太多,让amex不安了 |
|
z****l
发帖数: 5282 | 24 ☆─────────────────────────────────────☆
hek (黑头发小新) 于 (Fri Jan 27 11:07:25 2006) 提到:
AMEX Blue Cash
Citi Mastercard divident
Discover Platinum
MBNA Charles Schwab Platinum
Chase Amazon platinum
Thanks
☆─────────────────────────────────────☆
prospect (好好想想) 于 (Fri Jan 27 11:09:59 2006) 提到:
Amex blue cash, 2% surchage
MBNA Charles, maybe less, forget le.
AMEX Blue Cash
Citi Mastercard divident
Discover Platinum
MBNA Charles Schwab Platinum
Chase Amazon platinum
Thanks
☆───────────────── |
|
c*******o
发帖数: 27734 | 25 ☆─────────────────────────────────────☆
duckdada (duck) 于 (Fri Nov 6 18:53:35 2009, 美东) 提到:
请教大家：在这里毕业又做了博后的，应该办几份证明？（读书和博后的学校不一样）
谢谢啦！
☆─────────────────────────────────────☆
hek (黑头发小新) 于 (Fri Nov 6 19:11:18 2009, 美东) 提到:
多了有用么？
☆─────────────────────────────────────☆
ananpig (安安猪－最爱看超级大法官) 于 (Fri Nov 6 19:15:53 2009, 美东) 提到:
这个恐怕要多办几份。回去用一份少一份，没机会再办了
☆─────────────────────────────────────☆
duckdada (duck) 于 (Fri Nov 6 19:18:36 2009, 美东) 提到:
不是说要多。是想问一下要不要博士的办一份，博后的办一份 |
|
z****u
发帖数: 305 | 26 节选自环球财经（www.chineseworldnet.com）网站，有效期至当前，罗列所有到今天
（2011年3月18日）开盘为止创52周新高的股票，特此存档！
# 公司名稱 (代號) 開市價 最高價 最低價 收市價 成交量
1 PEABODY ENERGY (NYSE:BTU) 69.07 70.84 68 70.12 8,576,640
2 CAPSTONE TURBINE (NASDAQ:CPST) 1.85 1.88 1.76 1.77 7,400,432
3 CONSOL ENERGY (NYSE:CNX) 53.57 55.49 52.67 55.33 6,972,713
4 CSX (NYSE:CSX) 74.98 77.24 74.48 75.72 5,327,296
5 HECKMANN (NYSE:HEK) 6.18 6.35 6.12 6.21 4,064,357
6 WESTERN FOREST PRODUCTS (TSX:WEF) 0.96 1.23 0.96 1.18 3,921,072
7 AMERICAN CAPITAL AGENCY (NASDAQ:... 阅读全帖 |
|
w****r
发帖数: 245 | 27 大侠，分类都分好了，求神签
# Basic Materials, Agricultural Chemicals
AGU Agrium Inc.
AVD American Vanguard Corp.
CAGC China Agritech Inc.
CF CF Industries Holdings, Inc.
CGA China Green Agriculture, Inc.
CMP Compass Minerals International
COIN Converted Organics Inc.
IPI Intrepid Potash, Inc.
MON Monsanto Co.
MOS Mosaic Co.
NOEC New Oriental Energy & Chemical
POT Potas... 阅读全帖 |
|
B*******n
发帖数: 20645 | 28 Largest NYSE Short Interest Positions as of Feb. 15
Ticker Avg. Daily
Symbol Company Feb. 15 Jan. 31 Volume
=============================================================================
SPY SPDR S&P 500 ETF 313,917,094 289,628,960 146,913,689
NOK NOKIA CORP-ADR 215,707,954 195,140,945 25,880,627
IWM ISHARES-RUS 2000 208,862,217 197,574,989... 阅读全帖 |
|
n**x
发帖数: 606 | 29 Russell 2000:
AAON
AAT
AATI
AAWW
ABAX
ABBC
ABCB
ABCD
ABCO
ABD
ABFS
ABG
ABM
ABMD
ABVT
ACAT
ACC
ACCL
ACET
ACHN
ACIW
ACLS
ACO
ACOM
ACOR
ACPW
ACTG
ACTV
ACUR
ACW
ACXM
ADC
ADPI
ADTN
ADVS
AEA
AEC
AEGR
AEIS
AEL
AEPI
AF
AFAM
AFCE
AFFX
AFFY
AFP
AFSI
AGII
AGM
AGX
AGYS
AH
AHC
AHS
AHT
AI
AIMC
AIN
AINV
AIQ
AIR
AIRM
AIS
AIT
AKR
AKRX
ALC
ALCO
ALE
ALG
ALGN
ALGT
ALIM
ALJ
ALK
ALKS
ALNC
ALNY
ALOG
ALSK
ALTE
ALTH
ALX
AM
AMAG
AMCC
AMED
AMKR
AMN
AMPE
AMRC
AMRI
AMRS
AMSC
AMSF
AMSG
AMSWA
AMWD
ANAC
ANAD
ANDE
ANEN
ANGO
ANH... 阅读全帖 |
|
|
|
|
|
f*******d
发帖数: 12693 | 34 wat the hek，我说的是飞版的美腿少男啊。 |
|
g*****A
发帖数: 14950 | 35 包子在笼里
满嘴都是牙齿
4&(
` ~&&\yM#1
,_'Q!!NMW&
WCb 7N@4D Q%,,
PM'*MDk#M0p,
]@J0&e~~4r' ,+bQEQ
F8I&#' _&B$$bW#&$
&0A1 L#DE&E~!Q&Q,
_=, ,#0RN1 _T@0$' ZN$Q. grNq5
^ 'd ,0K0pK^ g*Q0g' #Q4p&,/g9X*&#,_/ (q
TA1 ,sDQWh4^ x&NM0` _ #FQ#K#fA# `*K#XWP~-
^&p,wNMM0qD: /HE#EN' ..#g)~ '@NG0Qx, `=X*
' '43$'hEk##m0D04f_g ~^ ~ `-00**0
=0#ONq2W0BF^#, _ p,,
` ^''~ ... 阅读全帖 |
|
p*****y
发帖数: 44 | 36 Transfect HEK cell to produce retro virus. 260:280=1.9 Qiagen大提的质粒
效果不怎么好，尤其试用VSVG做envelope protein, 请问有没有别的方法提高DNA纯度？
文献说CSCL最好，但是太麻烦。试过醋酸钠重新沉淀，酚，氯仿抽提一下，纯度没见到
变化，再转染，不产生病毒了！
求其他纯化方法！ |
|
R*****w
发帖数: 447 | 37 Thank you very much, sunnyday!
I figured it out and found that pcDNA3.1 does have sv40 origin.
The following is some information from Wiki, in case someone else is
interested in this:
HEK 293 cells were generated in early 70s by transformation of cultures of
normal human embryonic kidney cells with sheared adenovirus 5 DNA in Alex
Van der Eb's laboratory in Leiden, Holland.
An important variant of HEK293 cell line is the 293T cell line that contains
, in addition, the SV40 Large T-antigen, that |
|
H*****e
发帖数: 120 | 38 Also asking:
Can 293T cells stably infected by one retro- or lenti-virus produce virus if
transfected with the packing system again? |
|
r***e
发帖数: 2539 | 39 如果你的问题是：一个已经整合了lenti-vector的293T细胞，再转进packaging mix，能
不能自己produce virus?
这个肯定不行的。你仔细看下lenti vector的结构就知道了，vector是有external pro
moter能转录整个viral RNA，而整合以后的片段不行。这也是safety的设计， 在第三代
lenti viral vector的LTR自己没有转录活性了，叫做self inactivated。
if |
|
r***e
发帖数: 2539 | 40 你是说带有sv40 ori的质粒能被T antigen复制吧
？ |
|
s******y
发帖数: 28562 | 41 Oh...I thought it was accidentally made with antigen T by virus infection or
something. Guess I was wrong.
So it was intentionally made by stable transfection? |
|
c**n
发帖数: 73 | 42 I use 4% Paraformaldehyde to fix 293 HEK cells for 15 min.
I always put cells on cover slips coated with fibronectin or polyL lysin and
then fix them. It works fine.
PBS). |
|
s******y
发帖数: 28562 | 43 你是想要表达外源的ICAM-1？ 还是你想要那个悬浮细胞本身就表达ICAM-1？
如果是前者，你可以用HEK 293T, 如果是后者，那我不知道 |
|
l********t
发帖数: 2 | 44 pcdna3.1 v5-his和PCAGGS-GFP磷酸钙共转染原代神经细胞，然后染色GFP和V5tag，GFP
信号很强，但是V5信号非常弱，表达很低。但是HEK上共转染，GFP和V5都很强。是因为
PCDNA的promoter在神经细胞里不太好使吗？考虑要不要subclone到pcaggs载体里去。 |
|
m****M
发帖数: 360 | 45 谢谢大家的指点。
是不是说蛋白含量很少的蛋白就不容易检测到。如果一个蛋白含量占主 （９５％，注
：不是IgG），另外一个蛋白占５％。这个蛋白我只能拿到最多６０％的序列？
最近从HEK２９３细胞里纯化蛋白，发现总有几个蛋白跟我的主要蛋白一起纯化出来。
跑native PAGE gel看不到这些杂蛋白，而且主蛋白分子量比预测的大。但是跑变性胶
就可以看到这些杂蛋白，而且主蛋白分子量和预测的一样大。对这些杂蛋白很感兴趣，
想知道是什么蛋白。
MS 是目前鉴定蛋白序列最牛X的方法了吧？
哪位给普及一下MS的优缺点？不胜感激 |
|
g*********5
发帖数: 2533 | 46 qiagen,invitrogen,fermentus,sigma的小抽试剂盒都用过，hek 没有问题。 |
|
m****n
发帖数: 1066 | 47 HEK 293, human embryoni kidney. |
|
j****3
发帖数: 48 | 48 实验室有floxed的老鼠，打算注射Adnovirus给Cre recombinase...从一家公司买了一
个Ad-Cre,是有CMV promoter的，已经感染了HEK293细胞，收了细胞后（还没提纯），
现在想先看看病毒带的Cre序列有没有表达。跑了PCR可以看到带，但是WESTERN BLOT(
把HEK细胞裂解在RIPA buffer)用抗体却找不到Cre蛋白.咋回事呢？从没和病毒打过交
道，如果问的太傻，请尽量拍砖。。多谢 |
|
T*****u
发帖数: 3257 | 49 养着养着就变成一坨一陀的，啥原因？有人遇到同样情况吗？同时养的正常HEK细胞是
好的。有可能是serum不好吗？ |
|
W*******n
发帖数: 2762 | 50 细胞用的，用his-tag在c terminal, 已经建立在stable cell (HEK 293),直接分泌到
胞外，然后收培养液提纯，但表达效率不高。
如果transient expression, 就麻烦。不知道有人比较过没有？ |
|
