l******n
发帖数: 298 | 1 刚看见，，，，
内皮细胞肯定是cd31,这个用confocal做吧，我的是别人做的，肯定是不好做，挑点好
结果就行了，别跟他们较劲。
macrophage经典的还是F4/80,老鼠就是这个，moma-2也不错哦。cd68好像用人多一点，
cd11b就不是很清楚，与分化有关但是不是特异macrophage marker.
Stefanie Dimmeler,做了不少cd31,你看看她有没有相关的cd31.把他的文章引用上，美
国的话做内皮我知道有douglas losordo,他应该也有相关的文章。
祝福好运。 |
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y****y
发帖数: 123 | 2 德国一家公司的CD31据说是唯一可以染老鼠paraffin的
但是好像二抗那步比较麻烦
明天去看看号
顺便问一下BD的CD31染冰冻用什么固定比较好?
formalin可以么 |
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n***w
发帖数: 2405 | 4 hello，有哪位大侠知道好用的agrin antibody, 最好是wb和ihc（mouse）都可以的。
。。
另外，endothelial markers无外乎cd31, cd34, endomucin, meca32, etc....但是在
我的ko里，cd31貌似是change的，所以我想找一个不太可能变化的marker，求大侠们推
荐以及探讨。。
谢谢。 |
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发帖数: 1 | 5 看文先做好心理准备，可能会引起不适。
研究团队对1例进行了肺移植手术的危重症新冠肺炎患者的全肺进行了活检，通过HE染
色、免疫组织化学染色和特殊染色(包括Masson染色、PAS染色和六胺银染色)对其病理
变化进行了描述。全肺组织呈弥漫性充血或部分出血坏死。右肺右叶外缘明显可见出血
性坏死。肺切面有严重的充血和出血改变。
他们首次描述了新冠肺炎危重症患者的主要病理变化。该研究展示了危重症患者的临床
病理活检，这可能为深入了解该病的发病机制和严重程度提供了依据。
截至目前，关于流行病学和临床特征的研究已不断累积。多数患者出现发热、咳嗽等症
状，但小部分患者出现急性呼吸衰竭、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、感染性休克等严重
并发症。值得注意的是，目前来看，新冠肺炎的危重症患者预后差，死亡率高。
研究中这例患者66岁，2020年1月4日从武汉返回深圳，并出现高热和咳嗽症状。除8年
高血压病史外，无其他基础疾病，心功能良好。胸部X线检查可见左右肺亮度增高、多
发阴影。该例患者被诊断为新冠肺炎（危重型）和严重ARDS，并发呼吸衰竭，行肺移植
手术。
研究团队在P3实验室对肺病理组织进行了固定、脱... 阅读全帖 |
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I*******e
发帖数: 45 | 6 爸爸不久前脖子上长了一个肿块，去海淀医院做了切片检查，病理诊断为：
（右颈部）：送检为破碎的淋巴结结构，淋巴结内可见巢片状梭形细胞浸润，结合免疫
组化AE1/AE3阳性改变，比较符合淋巴结转移性恶性肿瘤，请临床检查肺、鼻咽等器官
，必要时上级医院会诊。
免疫组化结果：AE1/AE3+, CD3-, CD20--, CD34-, CD31-, CD68-, CD21-, Ki67>5%+,
SMA-, S100-
北京肿瘤医院后来诊断为： （右颈部）淋巴结内转移之低分化癌
医生说已属晚期，目前只能化疗，而且预后很不好，一年的生存期都很少。
这两天去做了pet-ct，结果还没出来。
我想请问一下，目前我们能为爸爸做些什么？他目前还不知道结果，但频繁的检查想必
心里也能猜出几分，再加上过年我打算请假回家，他很开心，不过我也怕他心理有负担。
他目前身体状况还算正常，只是心理上有时会低落。不知道我们怎么可以帮助他尽量保
持乐观平和的心态。
爸爸他六年前做过心脏搭桥手术，目前情况很稳定。但我们很担心化疗对他身体的影响
。不知道除了化疗之外，还能考虑什么治疗手段。
谢谢大家的帮助！ |
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h****g
发帖数: 439 | 7 测肿瘤血管的渗透性。sacrifice老鼠前2小时iv注射FITC-dextran，取肿瘤块OCT
frozen. 然后切成5um的切片，用acetone固定。
但是只能看到很少的大血管有荧光，绝大部分cd31（血管内皮marker）阳性的地方都没
看到dextran阳性。
想来想去也不知道哪出错了。是不是用acetone固定对FITC-dextran有影响，或者我切
片固定的过程中没注意避光？
哪位有经验的给说说？ |
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h****g
发帖数: 439 | 8 另外，你一般切多厚来观察FITC-Dextran？ 10um？
还有，最后怎么分析结果呢？是根据像素值大小来分辨哪是血管里的，哪是血管外的?
还是染cd31还判断？
谢谢！！ |
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h********0
发帖数: 944 | 9 想分离移植在裸鼠上的人肿瘤细胞，用什么MARKER来分选比较好？目前想到的是鼠的H-
2KD和CD31。想找一个人细胞的MARKER，有什么推荐的吗？ |
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x*****a
发帖数: 972 | 10 最好的情况是直接测nitric oxide的产生量，我用ELISA试过，不行，太低了，虽然有
读数，但是我
觉得不reliable。
退而求其次就是看eNOS的表达。qPCR是看基因的增加的吧，基因的增加不代表蛋白也会
增加，这个没错
吧？所以我偏好直接测蛋白的含量。
我可以用CD31把endothelial cells隔离出来，这个不难；然后在这个sub-population
里再比较
看eNOS的表达是否有变化。我是担心muscle cell在western blot中会带来noise，掩盖
了eNOS
的信号。
“还可以知道有多少细胞增加了该蛋白”，这个，能说说怎么做么？谢谢啊 |
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p****l
发帖数: 291 | 11 测NO用Invitrogen的kit
测蛋白采用ELISA呢
qPCR可以作为fig用的，如果你想看处理前后这个gene表达的变化，或者不同细胞之间
比较
你既然可以CD31去定义内皮细胞，那么就sort出来，再western blot就不会有muscle
cell干扰了
population |
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x*****a
发帖数: 972 | 12 Lonza好像只保证15个doubling。你买的amp是passage 3，一般我只用到passage 7，
passage 8应该也没问题。有的实验室用到passage 10。
我曾经用flow cytometry测了下CD31，大约75%的positive吧。 |
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z****u
发帖数: 1007 | 14 这个是GS IB4, 不过CD31也染过，还有DiI perfusion也试过。都效果不错。 |
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n***w
发帖数: 2405 | 15 我也来搭个车来说说自己关于不同条件的fix下的对于IHC的影响。
我是做眼睛的， 我做过如下的比较，
1. Whole globe: O/N fix in 4% PFA
2. Whole globe: 1hour RT in 4% PFA
3. Slit the cornea (more access to PFA) : O/N in 4% PFA
4. Slit the cornea: 1hour RT in 4% PFA
I compared immunogenicity of CD31 and PDGFRb.
Results were:
1>=4>2=3
As for the brain, I usually perfuse and fix with 4% PFA and post-fix in 4%
PFA O/N.
Today I didn't perfuse, I guess I may just leave the brains in 4% PFA for
36hours.
别。 |
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D*a
发帖数: 6830 | 16 用在paraffin的小鼠胚胎肺组织IHC上，
microvascular/capillary 我们用了vWF，reviewer让我们重复，推荐的是CD31, CD34
或者VE-cadherin，不知道哪个公司的好用？
免疫系统完全没概念，据说可以用CD11b看macrophage，但是据说CD11b在paraffin的组
织上不管用？其他的不知道了。。。
因为有时间限制，所以想最好是不要试太久，能一次管用最好拉～
有包子滴～ |
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n***w
发帖数: 2405 | 17 起码我用的millipore hamster anti-cd31在paraffin上不好使。你可以试试BD
pharmingen的。
macrophage的话，还可以用CD45. 但是我没有做过染色。 |
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S******9
发帖数: 2837 | 18 CD31 BD
Macrophage: mac3 or F4/80 |
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D*a
发帖数: 6830 | 19 CD31 BD 和 F4/80请问有reference么？ |
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D*a
发帖数: 6830 | 20 CD31 BD 和 mac3 or F4/80 请问有reference么？ |
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x*****a
发帖数: 972 | 21 CD31在macrophage也有大量表达。如果看Murine macrophage，F4/80是个比较接受的
marker，但是F4/80在有些dendritic cell或者monocyte上也有表达，所以F4/80是个不
完全纯粹的marker。
CD34是个stem cell/progenitor cell的marker，如果是非常成熟的endothelial cells
，是不太表达这个的，你染出来的可能是较为后期的endothelial progenitor cell。
其实vWF就是最好的了，既然染出来了，就可以了啊。VE那个当然也行。 |
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C**S
发帖数: 522 | 22 BD的CD31抗体在paraffin切片上不好用，只能做冰冻切片。 |
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n******w
发帖数: 70 | 23 vascular ECs CD31 MEC13.3鼠组织paraffin上不工作(工作了效果也不好，不会将所有
ec染上)，替代者可以是cd34（每一个batch差别比较大）, isolectin b4(效果很好，
vector lab)。
macrophage用f4/80不错，paraffin上效果挺好。
以上抗体我都用过，信息没错。
CD34 |
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n***w
发帖数: 2405 | 24 我的antibody用于IHC（flow）可以，但是WB不行啊。。。
大家有啥可以推荐的吗？
谢谢。 |
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D*a
发帖数: 6830 | 25 我那个帖子里那个德国公司dianova送free sample，可以要个试试，我今天刚要了很痛
快。 |
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l******n
发帖数: 298 | 26 abcam有的我用过，ab76533，很好用。75kd左右，jurkat做control |
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D*a
发帖数: 6830 | 29 德国人说英语啊，大哥。。。
网站有英语版，我当时也是找了半天。标签很小。 |
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n***w
发帖数: 2405 | 30 lol. 找到了，联系了他们的北美distributor.
谢谢。 |
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b******9
发帖数: 425 | 31 做了CD31的IHC staining，想quantify staining的面积，算vessel density。请问该
用什么软件呢？ 最好是免费的。多谢多谢！ |
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p*****r
发帖数: 334 | 32 朋友的亲戚，女，32岁，发现是脑胶质细胞瘤，以下是病理诊断：
（小脑蚓部）多坨，工3.5*3*1cm大，镜下见分化好的胶质细胞增生，多灶出血，未见
明显血管瘤成分，经合免疫组化结果：GFAP(++),Syn(+）,CD34少数血管（+），Ki-67
（-），NSE（+），F8（-）,MBP(+),NF(+),CD31(-),血管网织细胞瘤依据不足，结合临
床手术所见较符合分化好的胶质细胞瘤，伴囊性变（WHO II级）。
现在是手术做了，但是医院让上化疗，家属不同意，让我问问美国有什么更先进的手段
。让我去问问美国的医生。如果可以的话，可以送到美国来。
我本人不是做神经放面的，我是不认识一个神经科的医生。所以在这发个贴子问问。
1，有必要做化疗不？
2，还有什么好的办法?
3, 可能送到没国来不？
他们总觉得这边什么都好，我只要随便找个同事聊聊就行了，我们主要是做research的
，对这些方面还不如国内的。唉，不知道怎么向他解释。 |
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