j******i
发帖数: 939 | 1 请问你们在细胞系里边的同源重组效率是多少？用的是什么细胞？我们用ZFN, 在没有
使用药物的情况下，最多只能达到8%。 如果是primary细胞，效率就更低了。 |
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n***y
发帖数: 114 | 2 联系党生，发Cell Research就可以了，不用公布细节的，就说patent pending。专利
要申请的，在这之前，你要保证公司内部不要流出细节 |
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w***r
发帖数: 709 | 3 稳定，重复性好，对于急需发文章的大牛，或博后来说不是太重要
公司就没法自己骗自己了，长木有一手资料，不是纸上谈兵，这个技术的应用价值巨大
不过从发文章角度，新颖性可能不是太强，别人一学就会，影响生意
ES |
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w***a
发帖数: 4361 | 4 真正work得很好的技术都是超级简单的技术，比如PCR，RNAi。
还是可以申请专利赚钱的，卖专利比卖产品效率高呀。
ES |
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H*********a
发帖数: 133 | 5 有位国内显微注的高手现在在美国，她准备今年6月底开始在美国找microinjection位
置。她有7,8年的专职microinjection经历。主要从事：
Nuclear transfer cloning
intracytoplasmic sperm injection
pronuclear injection
blastocyst, 8-cell embryo microinjection of ES cells.
Rederivation
能否指点在美国如何找到专职的显微注射位置？她非常喜欢microinjection，不想找其
它位置。
ES |
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v********e
发帖数: 1597 | 6 你这么说起来，我想你们没必要申请专利，也不要发表文章，除非你觉得技术被拿走泄
密的可能性很大；而且申请专利未必能保护的了你们，你想啊，别人要是也用你的技术
做敲除，你找出证据说别人侵权的难度很大；而且，你的专利并不是单独的，你需要用
别人的专利去覆盖，不管是talen,还是cas9,现在肯定已经不少专利的，你们要花很多
钱和精力去处理专利的问题，不划算 |
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w***a
发帖数: 4361 | 7 开玩笑吧，单独的实验室嫌麻烦不注册专利而去发个文章也就算了。
公司如果有核心技术不用专利保护是很危险的，让别人抢注了，你自己哭都没地方去。
至于专利怎么撰写，那是律师的事情。 |
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r***z
发帖数: 19 | 8 我猜是donor片段两端设计成带有ngg序列的，利用改造过的不会发生切割的cas9指引
donor到要替换的位点，提高效率 |
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T****u
发帖数: 424 | 9 it won't work in this way |
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j******i
发帖数: 939 | 10 我猜可能有更有效的deliver方法，比如virus. 这样显微注射的要求就降低了。 |
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d*p
发帖数: 534 | 13 Unfortunately, I am working on it. |
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j********o
发帖数: 1085 | 14 好像没有吧，难道基因打靶那次，需要把cre loxp的credit也拿走？ |
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l**********k
发帖数: 189 | 15 我们本来是一家做大小鼠基因打靶的公司（其实现在仍然是）。随着业务的扩大
，我们决定利用人源化小鼠、免疫缺陷鼠等模式动物开展对外药物研发服务。现在想找
一个总监级的带头人，把公司的抗体药物研发发现和服务做起来。需要您有博士学位，
免疫学背景，有抗体药物研发经验，了解从单抗制备、抗体人源化到药效评价整个过程
，同时需要您有带团队的能力。工作地点在北京或是江苏海门（距上海1个多小时开车
距离）。我计划在3月初到Boston和SF招人，如果您觉得自己比较合适这个职位并愿意
加入我们，欢迎您先跟我们联系。麻烦您写信到 [email protected]
/* */，写上请转沈博士
就可以了。我们的人事部门会转给我。谢谢。 |
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C******y
发帖数: 3249 | 16 这些伪大师，伪反动学术权威，当然不会有提出双螺旋的天才思维，退一步要求，他们
也发明不出荧光蛋白，基因打靶，这些已经在健康产业广泛使用的获得诺贝尔奖的技术。
他们就是学术界的郭伯雄，徐才厚，他们提拔的这一批，要象军队悄悄的换掉全部军官
一样，全部换掉。
邓右这个把人变成鬼的社会，全面倒退到解放前。怎么可以和先主席解放出来的那一代
女科学家相比？先主席给屠呦呦的，不但有一个诺贝尔奖，还有一个英俊爆表的男神级
的爱人，这样的爱人，对女科学家的身体也是很好的。
邓右社会出来的，就是这些鬼。不解放能行吗？不推翻反动派能行吗？
ibp |
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发帖数: 1 | 17 1 北京大学生命科学学院魏文胜课题组
我们使用了文章中报道的高效ssDNA，同时自己设计了其他2条针对体内其他基因位点的
ssDNA，与NgAgo表达质粒共转HEK293T细胞与HeLa细胞，2天及5天后，用T7E1检测切割
效率，这三条针对2个不同基因的ssDNA，在HEK293T和HeLa两个细胞系中，无论转染一
次还是在8到12小时后再转染一次ssDNA，都没有检测到切割。
针对敲除后能使细胞有表型变化的某特定基因，我们设计了ssDNA，与NgAgo表达质粒共
转HeLa细胞5天后，发现细胞表现出了一定的对应表型，但是把这部分细胞收集起来提
取基因组，对靶位点测序，没有发现基因组序列的任何改变。
我们针对某特定基因设计了6种ssDNA，用特异的荧光报告系统检测是否有靶点DSB产生
，结果显示所有实验组均没有检测到对靶位点DNA序列的切割活性。
2 中科院动物研究所王皓毅课题组
我们在293T细胞中表达带有Flag标签的NgAgo ，在不同时间点检测NgAgo蛋白表达。发
现转染6小时后开始检测到目的蛋白，随着时间的延长蛋白量增加。在人类293T细胞系
中重复原文章中Figure ... 阅读全帖 |
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l*********y
发帖数: 12 | 18 我的几个朋友在赛业做基因敲除小鼠，对他们的服务都很满意。赛业的几个技术骨干好
像都是从美国主要模式动物公司海归的，应该水平不错。据说赛业保证germline，不然
不收费。
在国内做克隆美国打靶当然好，不过打靶载体的设计需要有经验的人员把关才好。 |
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s*******w
发帖数: 2257 | 19 陶铸之女陶斯亮：人民已为林彪集团平反
大中小2015-12-27 21:32:51
多维历史
2014年是林彪集团核心成员李作鹏、邱会作的百年诞辰，在“李作鹏、邱会作百年纪念
赠书会”上，与会红二代分别作了发言，陶铸之女陶斯亮称：“我觉得现在今天参加这
个邱会作叔叔和李作鹏叔叔的这个活动，我觉得有个想法，就是不管过去怎么样，人民
已经为他们平反啦，我曾经听张思之说过一句话，他是公审时的大律师，他跟我说，那
根本就不是法律审判，是政治审判。他说如果让再做他们的律师，我会做无罪辩护。”
，以下是回忆发言实录，摘自第四野战军第一门户网站。
2006年11月16日，陶铸之女陶斯亮出席暨南大学百年校庆活动
李冰天：父亲李作鹏临终前说自己的骨头都是红的
尊敬的各位老大哥、老大姐，尊敬的各位战友、朋友、同学们，尊敬的各位嘉宾：
大家好！
今年四月是我父亲和邱会作伯伯诞辰一百周年。邱伯伯是4月16日生人，我父亲是4月22
日生人。我和路光大哥在这里共同请大家聚会，这是一个很真情、很友情、很亲情的聚
会。我首先代表邱、李两家人衷心感谢大家的光临！
我父亲和邱伯伯都是江西老表，是穷苦人出身。他们和其他老前... 阅读全帖 |
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S*********4
发帖数: 5125 | 20 定向能武器最有可能的方向还是在太空被用于导弹拦截。
863-高技术研究发展计划—中国版的“星球大战”计划(希望不要请去喝茶）[博客帖]
文章提交者：梅晓方 加贴在 尖端科技
工程总投资：2000亿元以上
工程期限：1986年——2020年
1991年，邓小平为“863”计划实施5周年挥毫题词：“发展高科技，实现产业化”。
863计划即中国国家高技术研究发展计划。
1980年代以来，科学技术迅速发展，对人类产生了巨大的影响，引起了经济、社会、文
化、政治、军事等各方面深刻的变革。1983年3月美国提出“星球大战”计划，欧洲的
尤里卡计划、日本的“今后10年科学技术振兴政策”等着眼于21世纪的战略计划也先后
应运而生。
863计划的目标
希望在15年内，达到：
1、在几个最重要高技术领域，跟踪国际水平，缩小同国外的差距，并力争在我们有优
势的领域有所突破，为本世纪末特别是下世纪初的经济发展和国防安全创造条件；
2、培养新一代高水平的科技人才；
3、通过伞型辐射，带动相关方面的科学技术进步；
4、为下世纪初的经济发展和国防建设奠定比较先进的技术基础，并为高技术本身的发
展创造良好的条件；
5... 阅读全帖 |
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S*********4
发帖数: 5125 | 21 863-高技术研究发展计划—中国版的“星球大战”计划(希望不要请去喝茶）[博客帖]
文章提交者：梅晓方 加贴在 尖端科技
工程总投资：2000亿元以上
工程期限：1986年——2020年
1991年，邓小平为“863”计划实施5周年挥毫题词：“发展高科技，实现产业化”。
863计划即中国国家高技术研究发展计划。
1980年代以来，科学技术迅速发展，对人类产生了巨大的影响，引起了经济、社会、文
化、政治、军事等各方面深刻的变革。1983年3月美国提出“星球大战”计划，欧洲的
尤里卡计划、日本的“今后10年科学技术振兴政策”等着眼于21世纪的战略计划也先后
应运而生。
863计划的目标
希望在15年内，达到：
1、在几个最重要高技术领域，跟踪国际水平，缩小同国外的差距，并力争在我们有优
势的领域有所突破，为本世纪末特别是下世纪初的经济发展和国防安全创造条件；
2、培养新一代高水平的科技人才；
3、通过伞型辐射，带动相关方面的科学技术进步；
4、为下世纪初的经济发展和国防建设奠定比较先进的技术基础，并为高技术本身的发
展创造良好的条件；
5、把阶段性研究成果同其它推广应用计划密切衔接，迅速地... 阅读全帖 |
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w*********g
发帖数: 30882 | 22 863-高技术研究发展计划
——中国版的“星球大战”计划
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工程总投资：2000亿元以上
工程期限：1986年——2020年
1991年，邓小平为“863”计划实施5周年挥毫题词：“发展高科技，实现产业化”。
863计划即中国国家高技术研究发展计划。
1980年代以来，科学技术迅速发展，对人类产生了巨大的影响，引起了经济、社会、文
化、政治、军事等各方面深刻的变革。1983年3月美国提出“星球大战”计划，欧洲的
尤里卡计划、日本的“今后10年科学技术振兴政策”等着眼于21世纪的战略计划也先后
应运而生。
什么是“863”计划？
1986年3月，王大珩、王淦昌、杨嘉墀、陈芳允四位老科学家联合向中共中央写了
一封信，题为《关于跟踪世界战略性高科技发展的建议》，信中恳切地指出，面对着世
界新技术革命的挑战，中国应该不甘落后，要从现在就抓起，用力所能及的资金和人力
跟踪新技术的发展进程，而不能等到十年、十五年经济实力相当好时再说，否则... 阅读全帖 |
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w*********g
发帖数: 30882 | 23 863-高技术研究发展计划
——中国版的“星球大战”计划
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工程总投资：2000亿元以上
工程期限：1986年——2020年
1991年，邓小平为“863”计划实施5周年挥毫题词：“发展高科技，实现产业化”。
863计划即中国国家高技术研究发展计划。
1980年代以来，科学技术迅速发展，对人类产生了巨大的影响，引起了经济、社会、文
化、政治、军事等各方面深刻的变革。1983年3月美国提出“星球大战”计划，欧洲的
尤里卡计划、日本的“今后10年科学技术振兴政策”等着眼于21世纪的战略计划也先后
应运而生。
什么是“863”计划？
1986年3月，王大珩、王淦昌、杨嘉墀、陈芳允四位老科学家联合向中共中央写了
一封信，题为《关于跟踪世界战略性高科技发展的建议》，信中恳切地指出，面对着世
界新技术革命的挑战，中国应该不甘落后，要从现在就抓起，用力所能及的资金和人力
跟踪新技术的发展进程，而不能等到十年、十五年经济实力相当好时再说，否则... 阅读全帖 |
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h*****l
发帖数: 3857 | 24 2014年是林彪集团核心成员李作鹏、邱会作的百年诞辰，在“李作鹏、邱会作百年纪
念赠书会”上，与会红二代分别作了发言，陶铸之女陶斯亮称：“我觉得现在今天参加
这个邱会作叔叔和李作鹏叔叔的这个活动，我觉得有个想法，就是不管过去怎么样，人
民已经为他们平反啦，我曾经听张思之说过一句话，他是公审时的大律师，他跟我说，
那根本就不是法律审判，是政治审判。他说如果让再做他们的律师，我会做无罪辩护。
”，以下是回忆发言实录，摘自第四野战军第一门户网站。
2006年11月16日，陶铸之女陶斯亮出席暨南大学百年校庆活动
李冰天：父亲李作鹏临终前说自己的骨头都是红的
尊敬的各位老大哥、老大姐，尊敬的各位战友、朋友、同学们，尊敬的各位嘉宾：
大家好！
今年四月是我父亲和邱会作伯伯诞辰一百周年。邱伯伯是4月16日生人，我父亲是4
月22日生人。我和路光大哥在这里共同请大家聚会，这是一个很真情、很友情、很亲情
的聚会。我首先代表邱、李两家人衷心感谢大家的光临！
我父亲和邱伯伯都是江西老表，是穷苦人出身。他们和其他老前辈一样，在生与死
的战火考验中结下了深厚的革命情谊，是无话不说的老战友、老朋友。
在“红旗卷起... 阅读全帖 |
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s*********a
发帖数: 3436 | 25 强文转帖：今夜，我意识到我是一个江苏人
2016-05-13 知足者老张 南京择校
来源：新浪微博 作者：知足者老张，本文已获授权
博客地址：http://blog.sina.com.cn/njdrwzp1974
今天微信里不断有朋友用《关于江苏省高等学校跨省招生的说明》来骚扰我。其实我很
迷惑，我亲生的孩子还没迎来她十周岁的生日，况且我虽然已经坚持自学四十余年目前
依然还在不断自学，但我近期并没有再次回到校园的打算。这个说明书按理来说一定是
与我无关的，而朋友们发来给我，无非是因为我脾气不太好，而且也一直管不住自己的
臭嘴。我正确的做法应该是蹲在某个角落里微笑着看事情会如何走向，当然我也坚信我
们是一个有主义的国家，一但决定下来就凭微信圈里转个十万八千次，作用不会太大。
不过就是删贴的同志们辛苦一下，多加两个班而已，相信事情很快也就会被淡忘留下一
道淡淡的不痛不痒的疥疤。天津港那么大动静，长江游轮那么大灾难，百度那么大影响
，不也是说过去就过去了吗。很多不公只有加注在自己身上时才叫不公才捶天顿地，加
在别人的身上只叫新闻或是谈资罢了。显然如果人人都持有这种态度，充耳不闻身边事
，一心... 阅读全帖 |
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B*V
发帖数: 3365 | 26 863-高技术研究发展计划
——中国版的“星球大战”计划
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工程总投资：2000亿元以上
工程期限：1986年——2020年
1991年，邓小平为“863”计划实施5周年挥毫题词：“发展高科技，实现产业化”。
863计划即中国国家高技术研究发展计划。
1980年代以来，科学技术迅速发展，对人类产生了巨大的影响，引起了经济、社会、文
化、政治、军事等各方面深刻的变革。1983年3月美国提出“星球大战”计划，欧洲的
尤里卡计划、日本的“今后10年科学技术振兴政策”等着眼于21世纪的战略计划也先后
应运而生。
什么是“863”计划？
1986年3月，王大珩、王淦昌、杨嘉墀、陈芳允四位老科学家联合向中共中央写了
一封信，题为《关于跟踪世界战略性高科技发展的建议》，信中恳切地指出，面对着世
界新技术革命的挑战，中国应该不甘落后，要从现在就抓起，用力所能及的资金和人力
跟踪新技术的发展进程，而不能等到十年、十五年经济实力相当好时再说，否则... 阅读全帖 |
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M*V
发帖数: 3205 | 27 863-高技术研究发展计划
——中国版的“星球大战”计划
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工程总投资：2000亿元以上
工程期限：1986年——2020年
1991年，邓小平为“863”计划实施5周年挥毫题词：“发展高科技，实现产业化”。
863计划即中国国家高技术研究发展计划。
1980年代以来，科学技术迅速发展，对人类产生了巨大的影响，引起了经济、社会、文
化、政治、军事等各方面深刻的变革。1983年3月美国提出“星球大战”计划，欧洲的
尤里卡计划、日本的“今后10年科学技术振兴政策”等着眼于21世纪的战略计划也先后
应运而生。
什么是“863”计划？
1986年3月，王大珩、王淦昌、杨嘉墀、陈芳允四位老科学家联合向中共中央写了
一封信，题为《关于跟踪世界战略性高科技发展的建议》，信中恳切地指出，面对着世
界新技术革命的挑战，中国应该不甘落后，要从现在就抓起，用力所能及的资金和人力
跟踪新技术的发展进程，而不能等到十年、十五年经济实力相当好时再说，否则... 阅读全帖 |
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c**********r
发帖数: 891 | 28 大哥你把“转基因”一箩筐，“传统食物”一箩筐，这么划分很不专业：
同样是“转——基因”，随机打靶插入的和定点插入的不一样，用病毒转的又跟用农杆
菌转的不一样，改造过基因的是西红柿、母猪还是嗜油细菌也不一样，相互比较风险可
能差别很大，放在一起讨论有什么意义？
什么“传统食物”，小龙虾、土豆和玉米都不是中国土生土长的，中国人在百万年的进
化中从没接触过这些东西，你觉得是不是也不该吃这些？ |
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c**********r
发帖数: 891 | 29 大哥你把“转基因”一箩筐，“传统食物”一箩筐，这么划分很不专业：
同样是“转——基因”，随机打靶插入的和定点插入的不一样，用病毒转的又跟用农杆
菌转的不一样，改造过基因的是西红柿、母猪还是嗜油细菌也不一样，相互比较风险可
能差别很大，放在一起讨论有什么意义？
什么“传统食物”，小龙虾、土豆和玉米都不是中国土生土长的，中国人在百万年的进
化中从没接触过这些东西，你觉得是不是也不该吃这些？ |
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l**********k
发帖数: 189 | 30 谢谢支持。我们一定会坚持做品牌。因为开始的时候市场团队小，所以我们就将服务对
象主要集中在国内顶尖机构。现在我们在国内著名的大学（清华、北大等）和科学院所
（中科研动物所、发育所、神经所、生化细胞所等）建立了很好的信誉。他们帮我们宣
传对我们在国内站稳推动特别大。看得出来很多教授也希望国内有真正一家提供高水平
服务的公司。
由于我们去年才完成融资，资金比较充足。这样也可以保证我们将技术和服务做得更精
细，并不断开发新服务，新项目。明年初我们会推出包括大鼠的基因敲进、cKO、细胞
系的基因敲进/敲除、人胚胎干细胞的打靶、以及模式动物的表型分析，繁殖和供应等
。也许时间会漫长，但不管怎样，我的目标就是在国内建立一个国际标准的模式动物交
流、繁殖和供应中心。只有这样，才能帮助中国的科研科医药发展。 |
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V******t
发帖数: 444 | 31 比如实验需要NIH3T3敲除某基因，能否用老鼠胚胎干细胞打靶的原理，做基因敲除呢？
怎么很少看到有人做这样的事情呢？ |
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b*****e
发帖数: 5133 | 32 这个我相信。
其他人都是练出来的，比如上周的Mike滑索打靶全中完全是他在USPSA中的目标转换和
快速瞄准经验帮了他。
Dustin好像是迄今天赋最高的一个，比第一季的Kelly和第二季的Jay都厉害，不服不行
啊，爹妈没遗传给我们足够射击的基因。 |
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m*********k
发帖数: 10521 | 33 本次统计截止时间为：2013-03-15 02:00:00 （美东时间）
成功奖励 10 伪币的用户: absmit, aoyao, archers, arita, authenticsam,
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