H********g
发帖数: 43926 | 1 他们那个化学合成主要有哲学意义，或者也可能显示了一些有机合成的高超技巧。并没
有什么实际用途。
实际上我怀疑他们的路线产率应该很低，就算没有被新的合成技术代替也不可能有商业
价值。
现代肽合成是固相合成，当年发明这个的人估计已经发财了。
现在像胰岛素这样的大一点的蛋白都是用细菌或者酵母或者细胞培养来做，因为这样成
本低些。
固相合成肽：
Solid-phase peptide synthesis (SPPS), pioneered by Robert Bruce Merrifield,[
1] caused a paradigm shift within the peptide synthesis community, and it is
now the standard method for synthesizing peptides and proteins in the lab.
SPPS allows for the synthesis of natural peptides which are difficult to
express in bacteria, the inc... 阅读全帖 |
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s*******h
发帖数: 3219 | 2 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: qwxqwsean (qiu), 信区: Military
标 题: 先进技术不一定需要保密
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Apr 16 23:16:08 2015, 美东)
我发现绝大部分人对先进技术都不敏感。
以前我在一些公司打工的时候，我的工作总是特别优秀。 然而我知道打工总是不愉快
的，所以很担心自己的先进工作方法被公司里的其他人学去。
我之所以工作做的好，是因为我采用了很多我发明的工作方法，在上班时，我的这些专
利方法都被同事和上司目睹了，而我很不希望他们学会。
这方面的例子有无数，举个很小的例子：
比如几年前我在雪城一个汽车配件厂当工人时，有个产品是继电器的电磁芯，把比如２
０片硅钢片叠起来，用冲压机压上两个铆钉。 有六七个工人做这道工序，白人黑人都
有。 公司提供了一个铝合金模具，让工人把硅钢片逐个迭放在模具里，凑够２０片，
再取出来用轧机轧。
然而这个模具设计的十分脑残，如果用它干活，进度会很慢，于是工人们都不用，而是
手工取２０片硅钢片在桌上像码一迭扑克牌一样码成一叠，再拿去轧机轧。工人们围坐
在... 阅读全帖 |
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g*********y
发帖数: 123 | 4 那再细想想吧。
很难想像原始汤里就存在这些酶，还浓度那么高，而且酶是什么？是蛋白（当然也有简
单的酶，但那些简单酶不能完成复杂的合成）。那这些蛋白酶哪里来的呢？
再说离解的问题；铁生锈和蛋白分解能比么？ 多肽稳定还是氨基酸单体稳定？现在你
放什么蛋白在自然环境下不失活或/分解的？还不说三级结构，四级结构能保持多长时
间，上个问题中提到的蛋白酶，在院食堂中恐怕没等到起作用（它碰到反映物还得是正
确的次序得多长时间？别告诉我院食堂中反映物真的就像上面那张照片似的）就失效了。
再说艾滋病的例子，对，艾滋病毒只是三级或四级结构变了，就失活了，这不正说明蛋
白在自然环境下是何等脆弱的么。
从物理学的角度再说，那么准确地合成多肽的次序是熵减小的过程，没有外力是不会像
铁生锈那样自然发生的。
还有一个例子，人工合成蛋白是二十世纪的化学方面的一大进步，这可是在人工环境下
，在化学知识已很发达的情况下人工控制多步反应才做到的。即便如此，到现在也和成
不了多少种蛋白（不然很多病就不会这么难治了）。还不提从初始反应物到最终产物的
产率有多低。如果院食堂中也是这样，院食堂恐怕得比上面的照片还浓一百倍。
再说一 |
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w***e
发帖数: 1331 | 5 导师听了很高兴，就讲了那个故事给俺听。后来聊天时，俺喜欢的热力学教授还给俺讲了
另外一个故事，说很久以前，他在波颗粒的同学去公司实习，告诉人家把搅拌的方向换一
下，结果产率大大增加。嘿嘿。这就是化学工程师的乐趣。当然，咱们别忘了另外的低级
趣味，那个谜底是 Shakespeare. 俺的故事讲完了。哈。 |
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q****0
发帖数: 282 | 6 日前，国家外专局和教育部正式公布了2018年度新建高等学校学科创新引智计划（
即“111计划”）立项名单，我校生工学院张立新教授作为负责人的微生物药物的高效
“智”造学科创新引智基地获批立项。
截止目前，我校学科创新引智基地数量增至7个，除本次获批立项的微生物药物的
高效“智”造学科创新引智基地外，还包括神经退行性疾病相关蛋白与药物发现科学创
新引智基地（2007年立项）、化学反应工程科学与技术创新引智基地（2008年立项）、
先进过程装备技术创新引智基地（2012年立项）、生物材料与工程创新引智基地（2013
年立项）、结构可控分子工程创新引智基地（2015年立项）、石油化工行业智能优化制
造创新引智基地（2017年立项）。
微生物药物的高效“智”造学科创新引智基地以生物工程学院为依托，充分发挥合
成生物学及生物制造过程优化与放大等交叉学科的合作发展方向，引进4位院士，包括
韩国科学技术院（KAIST）生命科学与生物工程学院Sang Yup Lee院士、瑞典查尔姆斯
理工大学Jens Nielsen院士、德国亥姆霍兹药物研究所Rolf Müller院士、MIT... 阅读全帖 |
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i****g
发帖数: 3896 | 7 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: lrpwd (lrpwd), 信区: Biology
标 题: [原创]谈一谈屠呦呦获拉斯克奖（兼科普拉斯克奖）
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Sep 12 21:19:08 2011, 美东)
首先祝贺屠呦呦先生（是女性，这里是尊称)拿到拉斯克奖 (Lasker award),青蒿素的
研究绝对值得拿奖。在这里姑且谈谈我的几点看法。
首先我想科普一下拉斯克奖，拉斯克奖其实有四个奖项，最有名的是Lasker basic
medical research award(基础医学奖),大约50%左右的得主后来都拿了诺贝尔奖,另一
个就是屠呦呦拿的clinical medical research award(临床医学奖),也有一些得主后来
拿了诺贝尔奖,但就少很多了，这两个现在基本上每年都发。目前这两个奖一共有79个
得主先后拿了诺贝尔奖, 因此拉斯克奖也被称为 “American’s nobels”。是美国生
命医学界最高奖。其余两个名气小很多的叫Public Service 和 Special Achievement,... 阅读全帖 |
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M******a
发帖数: 6723 | 8 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: Mayingba (吳鐘學), 信区: Military
标 题: 如何评价北大化院 17 级个别学生团伙多场考试作弊一事？
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Sep 14 09:38:45 2018, 美东)
如何评价北大化院 17 级个别学生团伙多场考试作弊一事？
大一在校期间，北京大学化学与分子工程学院 17 级个别学生在多场考试中团伙舞弊被
同学举报，或得到最高退学处分。 涉事人员包括竞赛国家队成员，多名国家集训…显
示全部
「那罪行再也看不见 都躲在法律和交易后面」
612 人赞同了该回答
［9/14/2018 19:00 文末已更新］
说说最严重的这位雷同学的光辉事迹吧。
大一的时候化院有一门课叫普通化学，是化学专业理论课中最基础的一门。正常来说，
普化这门入门级课的难度并不高，几乎都是高中竞赛生的初赛考核内容（还不包括有机
）。
但是北大化院新生的基础水平还是有很大差异的，考虑到这点，学院平行设立了两个班
级：一个是李彦老师班，主要为高考生准备，讲解基础内容；一个是卞江老师班，课程
难度稍高一点，并且有一... 阅读全帖 |
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j****u
发帖数: 1413 | 9 原文参见：http://www.ustcif.org/default.php/content/947/
近日，2010年美国物理学会会士（APS Fellow）增选揭晓，中国科大四位校友增选为会
士，其
中物理学院近代物理系有三位校友丁卫星、许长补和王福强入选；另汤雷翰（777）也
当选会
士。
丁卫星校友于1991年在我校等离子体物理专业获得理学博士，现任美国加州大学洛杉矶
分校物
理和天文系研究员，同时是我校的兼职教授。他在我校工作期间，曾于1993年和1994年
连续在
Physical Review Letters 上发表研究论文。经SCI检索，这两篇论文也是首次完全由
我校工
作人员完成的发表在该杂志上的论文。到目前为止，我校已有两位自己培养的博士获得
了美国
物理学会会士称号（另一位为902校友段路明）。他的当选也显示了中国科学技术大学
在培养
等离子体物理博士人才方面的实力。丁卫星在校期间还曾荣获第11届郭沫若奖学金。
王福强博士是美国普渡大学物理系教授，我校客座教授。1988年6月毕业于我校近代物
理系核
物理专业，1996年5月毕业于哥伦比亚大学，获博士学位。毕业后到... 阅读全帖 |
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c****i
发帖数: 2635 | 10 看到的是一群，不是一只。。。小姐妹家里养的山羊。。。
唛~``````唛~```````````
可能也就刚好附近没人养而已~~`养羊挺麻烦的，要走山路要劳作而且产率还不如牛高。 |
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a***e
发帖数: 27968 | 11 AMD有GF 40+%的股份，所以有很多毛钱的关系，而且GF SOI的产能，基本就是AMD
tsmc上28nm,参数是有的，自己的test structure也是工作的，
但是nv这种高性能片子优化起来就不是那么容易了，这俩不狼狈为奸是不行的
tsmc从ati那边得到的经验，也不能全用上，大家都很被动，
费米早期的成品率有15%丫就该很高兴了
代工厂不是能帮你layout,而是没他们帮忙你layout出来谁都做不了
至于为什么代工厂基本不自己做真的芯片，这个是所谓的conflict of interest
一方面你不能和自己的客户生产类似的东西，这个是忌讳，3*代工起步困难就是
因为后面的3*电子，所以果子是他亲爹
另一方面，代工厂的经验在于可加工性，或者产率的优化，不是性能，
这是两条腿，少了谁都是瘸子
还有丫也没有渠道，arm做出来多一个负担，再说arm简单，SOC就不简单了
丫哪有那能力支持？ST这种也就卖卖通用片子，因为产能闲着也是闲着
触摸屏记得果子也是买的，丫估计有个触摸屏的协处理器，而且cpu调度是触摸屏优先的
和屏幕硬件本身应该关系不大
难
了 |
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k**z
发帖数: 3 | 13 > 尽管 java 宣称它是100%面向对象，而C++不是。但是宣称100%面
向
> 对象本身就不是什么面向对象的思想。面向对象的本质目的是提高
生
> 产率。讨论一种语言是否100%面向对象就好像讨论我们的社会性资
性
> 社一样滑稽。其实学习面向对象不一定非要使用java不可。我反而
认
> 为120%面向对象的C++是不错的选择。
面向对象的本质是一种认识世界的方法，提高生产率只是它的结果。
JAVA是纯面向对象
的语言，它强迫你使用面向对象的思想来考虑问题。用C++就可能写
出C和C++混合的代
码（许多C/C++程序员不知不觉中就这样做了）。
> Java号称跨平台，其实这是只一个梦想，也不妨用骗局这个词来形
容
>
。软件的移植性仅仅和虚机相关吗？照此理论是不是可以说符合IA32
> 体系的软件在任何IA32体系上都能正常运行。那我怎么没看见SCO
：
> ：lf 在 NT上运行？显然，除了虚机，软件二进制规范（执行文件
格
> 式、连接方法）、运行时间库和系统调用也是软件移植问题因素。
而
> java规范中显然不包括完整的运行时间库和系统调用，甚至二进制
规
> 范也 |
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m********5
发帖数: 17667 | 15 EE那么大你就说了VLSI，好像就能代表全部？
CS也那么大，结果你全算上...
另外工资水平更是大问题，EE的心气低，做CS的预期高。
今年和去年做内存的其实很热，大家都觉得有未来，但是明确不招有中国背景的
EE和其他制造业一样，在美国只会越来越差，走不了多远的
为啥今年VLSI都好找呢，我有几个猜测，前几年极度收缩，加上辅助软件导致的劳动生
产率大幅上升，还裁了不少人。现在因为新工艺出来了，老员工扔得差不多了，正好招
点低工资的新人。做EE就是要做好随时被扔掉，而且经验没法在新公司立即发挥作用的
尴尬。觉得这个无所谓，或者觉得自己能在原公司混到管理层的当然可以继续做EE |
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m****j
发帖数: 890 | 16 我们公司生产几种相似产品，原材料按各个产品计算，labor和overhead 我是按照生产
产量总和统一分配。可以算出单个产品unit cost，然后计算期末产成品价值。cost of
good sold是按照期初加本期投入减去期末倒算出来的。 这种算法没办法算出各个产
品的当月销售成本。由于企业生产不稳定，单个产品成品每个月变化较大。如果年末分
析毛利率，有什么比较系统的方法吗？ |
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g***m
发帖数: 465 | 17 其实没必要控制cycle，虽然书上这么建议的。
俺先后用过两个proofreading，先是用NEB的Deep Vent,这个酶的忠实度狠好，俺用来构
建质粒，35cycles,将近1k的三个片段拿去测序，没有错误。
后来作RT PCR的时候因为template是total poly A RNA，而Deep Vent没有Hot start，结
果不是太consistant，有时候有，有时候没有，产率也偏低。俺就换到Pfx plantium
(Invitrogen)，号称市面上忠实度最高的，现在所有RT PCR都作出来了，35cycles,3K的
片段。先拿了一个基因的三个克隆测序，结果是在两端大致1.5k的长度上DNA序列有2-4个
错误，氨基酸序列没有错误。而且由于俺同时测了三个克隆，以后可以用没有错误的克隆
拼接成error free的一个全长片段。
总的来说，Mg的浓度不要太高，酶的用量要尽可能少，然后就是wait and pray了，呵和
。
好运！ |
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t****p
发帖数: 1504 | 18 bioanalyzer更可靠一些吧。有的facility在收到样品后会自己重新用bioanalyzer确证
一下。
350-400也可用，只要大小比较均一就好。我到facility看过，不同实验室的DNA大小差
挺大的。我猜DNA大了，只是在bridge扩增的时候会跟其它样品不太同步，产率低一些
，然后读出来的信号总体上弱一点；但是如果均一，把信号整体调高估计就可以。 |
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C*******e
发帖数: 4348 | 19 谢谢
我现在的问题不是elute以后怎么分开两个蛋白
因为我们用PreScission Protease
我想的是最好能提高resin的利用率
现在连在resin上的大多是GST tag alone
严重影响了纯化蛋白的产率
而后续研究又要用大量的蛋白
而且最好是同一batch提的
现在想到也许可行的是ammonium sulfate ppt
the
seperate |
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R****n
发帖数: 708 | 20 １）大块的或者颗粒状ＦＦＰＥ sample怎么样切成薄片用于ｄｉｇｅｓｔ？
２）如何能打开ＲＮＡ和Ｐｒｏｔｅｉｎ的ｃｒｏｓｓｌｉｎｋ，提高产率？
我用ＡＭＢＩＯＮ的Ｒｅｃｏｖｅｒａｌｌ ｋｉｔ．多谢！ |
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S*****s
发帖数: 287 | 21 何必用 Kit，直接 CsCl 纯化吧。产率高很多，而且样品也很纯。我用 Clontech 的
kit 纯化出来的 BAC，如果再 setup CsCl 的话还能看到有很多杂质和 linear DNA。 |
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s********n
发帖数: 2939 | 22 Keasling青蒿素产率很高，已经很成熟了，不过这东东本来就不贵，社会影响大于经济
考虑；
Liao最近有一片文号称能到达30 g/l的butanol，已经很高了；
感觉stephanopoulos现在不是很活跃了，不过是老资格了，大家都卖面子；
nielsen主要做yeast，应用好像还不错。 |
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s********n
发帖数: 2939 | 23 ms植物细胞培养的产率也很高了现在，而且直接得到产物，现在E. coli的只是前体。 |
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s********n
发帖数: 2939 | 24 Keasling青蒿素产率很高，已经很成熟了，不过这东东本来就不贵，社会影响大于经济
考虑；
Liao最近有一片文号称能到达30 g/l的butanol，已经很高了；
感觉stephanopoulos现在不是很活跃了，不过是老资格了，大家都卖面子；
nielsen主要做yeast，应用好像还不错。 |
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s********n
发帖数: 2939 | 25 ms植物细胞培养的产率也很高了现在，而且直接得到产物，现在E. coli的只是前体。 |
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m******g
发帖数: 3924 | 26 做基础研究的这个产率已经相当高了。
继续多投投，不过大牛实验室确实是不好进。
祝福！ |
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x*****o
发帖数: 441 | 27 我在表达有的可溶蛋白的时候可能是浓度太高,也形成包涵体,但是我用supernant纯化
产率也不错. 但是这个蛋白是带his-tag的.其他的蛋白不管可不可溶都没有tag,可能提
纯有问题.
想问一下是通过破碎细胞和提纯办法使好像不溶的蛋白可溶的? |
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Q*****n
发帖数: 4546 | 29 谢谢回复。我是想提E.coli的tRNA，想先over express，不然产率大概太低了；不过我
也看到有人说overexpress的可能不够均一，因为负责后期加工的酶处理不过来，所以
有点犹豫要不要直接提 |
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z*********8
发帖数: 1203 | 30 谢谢回复。我是想提E.coli的tRNA，想先over express，不然产率大概太低了；不过我
也看到有人说overexpress的可能不够均一，因为负责后期加工的酶处理不过来，所以
有点犹豫要不要直接提.
建议不要这么做，yield很高，因为tRNA很abundant.你提的small RNA里面70%以上都是
tRNA。假若你用1Liter的菌，一个不小心提完了small tRNA就有500ug之类的。然后你
再pull down，少说还是有1-2ug。overexpression我估计不会work. |
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f**u
发帖数: 346 | 31 呵呵，你是在假设纯化的产率是100%。
我也没很仔细地想过这个技术只不过这个技术的原理并不复杂，
ChIP出来了那么多年肯定有人想过也做过，
但是目前还没成气候，所以肯定是有一些技术问题在里面的。
当然有技术问题也就说明有机会，并不一定是坏事情。
另外，需要细胞多这个很烦，但是对于去除背景来说也许是好事情。
刚才去看了看楼主提到的文章，他们用telomere的主要原因就是因为拷贝数大，
一个细胞有100个左右，这样细胞用量可以减少两个数量级。
amount
6000 |
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l***d
发帖数: 1828 | 32 首先祝贺屠呦呦先生（是女性，这里是尊称)拿到拉斯克奖 (Lasker award),青蒿素的
研究绝对值得拿奖。在这里姑且谈谈我的几点看法。
首先我想科普一下拉斯克奖，拉斯克奖其实有四个奖项，最有名的是Lasker basic
medical research award(基础医学奖),大约50%左右的得主后来都拿了诺贝尔奖,另一
个就是屠呦呦拿的clinical medical research award(临床医学奖),也有一些得主后来
拿了诺贝尔奖,但就少很多了，这两个现在基本上每年都发。目前这两个奖一共有79个
得主先后拿了诺贝尔奖, 因此拉斯克奖也被称为 “American’s nobels”。是美国生
命医学界最高奖。其余两个名气小很多的叫Public Service 和 Special Achievement,
好像轮流来发，所以一般一年就发三个奖。对于获奖人数，最近每年不超过三个，但我
看到的早期很多年份是多于三个，不知道是不是最近的规定，或者就是没有限制。
得过拉斯克奖的华人其实有好几个，不过年代都比较远，所以大部分人可能不知道。李
卓皓 (Choh Hao Li, ... 阅读全帖 |
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s*******e
发帖数: 1010 | 33 Hisx10肯定不是灵丹妙药，我做的时候大概只有一半相对于Hisx6产率有所提高。螯合
金属当然不会有太多的His参与，但也有个His的局部浓度的问题。一个明显的例子就是
我有几个即使连着Hisx10的蛋白，咪唑梯度洗脱的时候也是先洗脱单体，再提高浓度才
洗脱二聚体。如果10和20个His有差别，我认为6和10有差别是必然的。
因为还没见过有副作用的例子，所以只好一律X10了。你说的影响溶解度的情况我还没
遇到过——His-tag影响溶解度是肯定的，但是没遇到过长短Histag影响的差别明显的
情况。
至于影响结晶，从来不敢带着Tag去长晶体，无论x6还是x10，一律切掉再说。 |
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g***j
发帖数: 40861 | 35 如果等会儿有时间就提一下，不过以前没提过这个质粒，所以产率没法儿比较
those
waste |
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p*****u
发帖数: 191 | 37 刚刚建的实验室一般很难出成果，这是肯定的。如果说建了实验室三年或者5年内，每
年都有cns不断，就如同在phD或者postdoc一样的cns产率,那这无疑是一个rising star |
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L*****t
发帖数: 56 | 38 长引物的主要问题是5'容易丢碱基，我一般建议设计的时候多加几个保护碱基而不是纯化。PAGE纯化很贵，何况本来长引物产率就不高，纯化后就更少了。 |
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C*******e
发帖数: 4348 | 39 不光是丢碱基
我遇到过几次5'端连序列都有错的
PAGE纯化不算贵
HPLC纯化才贵
而且PAGE纯化自己做也挺简单的
就是要一个手持的短波UV灯而已
再少也不会有不够用的情况
纯化。PAGE纯化很贵，何况本来长引物产率就不高，纯化后就更少了。 |
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s******r
发帖数: 2876 | 40 老板想要从laser capture的少量细胞里提RNA，做array。
请教什么kit现在比较适合小量提取RNA，产率怎么样，
做array的话，还要不要纯化mRNA，哪家的kit比较好用，
array之前，RNA需要扩增吧，有什么好的kit或者protocol推荐一下。 |
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k****u
发帖数: 3454 | 41 袁隆平的杂交水稻是在没有生物技术的年代里的产品，如果当时有转基因技术，可能这
一发现会更早的出现。杂交水稻相对于当时的纯和系增产了20%，孟山都有个承诺，
2030年的玉米产率比2000年增加100%。
转基因可能造成巨大的遗传学危害，那传统的育种呢？在水稻从野生水稻到当前地里种
的水稻的这上万年的驯化过程中，基因组发生了多少变化？又有多少基因通过水平漂移
整合到了水稻基因组？ 你这个逻辑是非常可笑的。如果禁止所有可能造成巨大危害的
东西，而不去讨论实际造成危害的可能性大小和危害大小，那我们不要用电了，会电死
的；也不要用键盘了，键盘下面还写着doctor's warning，很长一串。。坐飞机掉下来
全部死光光。。
一个工科本科毕业生留 |
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a**m
发帖数: 184 | 42 BGI测序要帮你分析的，然后会霸占一作甚至通讯作者
Illumina (solexa) 要patent的，大部分人付不起 |
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d*******j
发帖数: 64 | 43 cluster不是越多越好，太多的话每个cluster信号强度降低，会造成质量下降。core的
改进可能是调整加样的量。样品不多的话没啥好优化的，多测几次把数据合并就可以了
。如果想省钱，可以加index，把多个样品放一个lane，控制每个样品的coverage。
bioanalyzer或miseq可能优化加样的量 |
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j****x
发帖数: 1704 | 44 在欧美市场就是纯公司化运作吧，应该没你说的这回事，当然如果你提出以共同署名合
作发表为条件降低费用就是另一回事了 |
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u*********1
发帖数: 2518 | 45 恩，got it
的确cluster太多，每个cluster的信号会降低，detection system就识别不出来，最后
会导致没有data产生。为了防止没有data产生，core的staff会很小心很小心的从low
starting material开始
另外，我是要测high-coverage，一个sample就要至少5个lane。。所以加index没意义
吧。。 |
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x*****o
发帖数: 441 | 47 最近需要cy3, cy5做标记, 发现实验室有的已经过期了, 今年5月过期的. 很纠结是重
新定一些还是就用这些过期的. 这个好像很贵, 一包200多. 实验室还有5,6包.
这种dye过期了有很大影响吗? 上网查了一下说是会影响label的产率和dye的亮度. |
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