L*********x
发帖数: 2191 | 1 我有个挺厚的样品，想在显微镜下从前到后都看清楚，这个怎么调光圈什么的？
还是说只要确定了物镜就没法改景深了？ |
b*******t
发帖数: 33714 | 2 focus到不同深度就好了，但是如果很厚的话要用long working distance的objective
【在 L*********x 的大作中提到】
: 我有个挺厚的样品，想在显微镜下从前到后都看清楚，这个怎么调光圈什么的？
: 还是说只要确定了物镜就没法改景深了？
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t****g
发帖数: 35582 | 3 换低倍物镜。
或者confocal scan了重构。
【在 L*********x 的大作中提到】
: 我有个挺厚的样品，想在显微镜下从前到后都看清楚，这个怎么调光圈什么的？
: 还是说只要确定了物镜就没法改景深了？
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t****g
发帖数: 35582 | 4 long WD，还要高NA的话，那价钱就是指数增长了。
objective
【在 b*******t 的大作中提到】
: focus到不同深度就好了，但是如果很厚的话要用long working distance的objective
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p********e
发帖数: 16048 | 5 佛版一般希望减小景深。。。。。。
【在 L*********x 的大作中提到】
: 我有个挺厚的样品，想在显微镜下从前到后都看清楚，这个怎么调光圈什么的？
: 还是说只要确定了物镜就没法改景深了？
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x5
发帖数: 27871 | 6 用电镜，景深大, stereoscope也好些
要不confocal section, 或者micro-CT
【在 L*********x 的大作中提到】
: 我有个挺厚的样品，想在显微镜下从前到后都看清楚，这个怎么调光圈什么的？
: 还是说只要确定了物镜就没法改景深了？
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b*******t
发帖数: 33714 | 7 这是没有办法的事情。。。
【在 t****g 的大作中提到】
: long WD，还要高NA的话，那价钱就是指数增长了。
:
: objective
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b*******t
发帖数: 33714 | 8 lz要的不是真的景深吧
【在 p********e 的大作中提到】
: 佛版一般希望减小景深。。。。。。
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L*********x
发帖数: 2191 | 9 打算用epifluorescence 看看就好了，不想上confocal, 物镜已经用了4x,再小就看不
清样品了。
如果不重新买镜头，基本就没办法了吧？
现在用的nikon CFI Plan Apo 4x/0.2 |
b*******t
发帖数: 33714 | 10 调物距阿。。真的要一次看清么
【在 L*********x 的大作中提到】
: 打算用epifluorescence 看看就好了，不想上confocal, 物镜已经用了4x,再小就看不
: 清样品了。
: 如果不重新买镜头，基本就没办法了吧？
: 现在用的nikon CFI Plan Apo 4x/0.2
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t****g
发帖数: 35582 | 11 nod，我觉得他的真实要求是要long working distance。
太厚了就用两台，一个倒置的看下面，一个up right的看上面一半。
【在 b*******t 的大作中提到】
: 这是没有办法的事情。。。
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N**********r
发帖数: 351 | 12 大师已经有讲解：
http://www.mitbbs.com/mitbbs_article.php?board=PhotoGear&id=313
............2*N*d*s*f^2*(s-f)
DOF=s2-s1= -------------------
............f^4-N^2*d^2*(s-f)^2
N=f/D |
L*********x
发帖数: 2191 | 13 真的要一次看清啊，trace motion....
【在 b*******t 的大作中提到】
: 调物距阿。。真的要一次看清么
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b*******t
发帖数: 33714 | 14 看transmission就比较困难了吧
【在 t****g 的大作中提到】
: nod，我觉得他的真实要求是要long working distance。
: 太厚了就用两台，一个倒置的看下面，一个up right的看上面一半。
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t****g
发帖数: 35582 | 15 不知道，我没有实战经验:)
【在 b*******t 的大作中提到】
: 看transmission就比较困难了吧
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v***a
发帖数: 23651 | 16 显微镜你也懂啊？
【在 b*******t 的大作中提到】
: 看transmission就比较困难了吧
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b*******t
发帖数: 33714 | 17 多厚？什么substrate?
【在 L*********x 的大作中提到】
: 真的要一次看清啊，trace motion....
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b*******t
发帖数: 33714 | 18 不懂装懂，努力要懂
【在 v***a 的大作中提到】
: 显微镜你也懂啊？
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c********y
发帖数: 30813 | 19 终于来了一个可以挑战你的光学大牛了。。。
【在 t****g 的大作中提到】
: 不知道，我没有实战经验:)
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t****g
发帖数: 35582 | 20 没带相机，要不然给你们show一个最近烧的Nikon，六个物镜，几个灯泡，乱七八糟的
filter，一个ccd相机。
【在 c********y 的大作中提到】
: 终于来了一个可以挑战你的光学大牛了。。。
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v***a
发帖数: 23651 | 21 手机呢
【在 t****g 的大作中提到】
: 没带相机，要不然给你们show一个最近烧的Nikon，六个物镜，几个灯泡，乱七八糟的
: filter，一个ccd相机。
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t****g
发帖数: 35582 | 22 扔车里了。
【在 v***a 的大作中提到】
: 手机呢
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x**0
发帖数: 6149 | 23 Confocal Z-section + Image-Pro Extended Depth of Field
包子
【在 L*********x 的大作中提到】
: 我有个挺厚的样品，想在显微镜下从前到后都看清楚，这个怎么调光圈什么的？
: 还是说只要确定了物镜就没法改景深了？
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b*******t
发帖数: 33714 | 24 时间会流逝阿
【在 x**0 的大作中提到】
: Confocal Z-section + Image-Pro Extended Depth of Field
: 包子
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x**0
发帖数: 6149 | 25 除非被摄物动的很快，不然也应该来得及的吧？
真的动的很快的话就用video camera了，呵呵
【在 b*******t 的大作中提到】
: 时间会流逝阿
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b*******t
发帖数: 33714 | 26 不知道lz说的 trace motion是什么样的motion
不过一般flow cytometry的确是用video camera拍的
然后逐帧做correlation
【在 x**0 的大作中提到】
: 除非被摄物动的很快，不然也应该来得及的吧？
: 真的动的很快的话就用video camera了，呵呵
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B*G
发帖数: 13438 | 27 确实，楼主好像对分辨率要求不高，才用了4倍物镜，直接用camcorder加近摄镜试试？
很多实验室都用两三百块钱的小高清camcorder做实验的。
【在 b*******t 的大作中提到】
: 不知道lz说的 trace motion是什么样的motion
: 不过一般flow cytometry的确是用video camera拍的
: 然后逐帧做correlation
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N******t
发帖数: 16051 | 28
你想做什么阿，epifluorescence不可能从前到后没有干扰的看清的，上confocal吧
也木有那么难，我刚train过，每天俩小时，七天。。
【在 L*********x 的大作中提到】
: 打算用epifluorescence 看看就好了，不想上confocal, 物镜已经用了4x,再小就看不
: 清样品了。
: 如果不重新买镜头，基本就没办法了吧？
: 现在用的nikon CFI Plan Apo 4x/0.2
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N******t
发帖数: 16051 | 29
？？？？
【在 b*******t 的大作中提到】
: 不知道lz说的 trace motion是什么样的motion
: 不过一般flow cytometry的确是用video camera拍的
: 然后逐帧做correlation
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b*******t
发帖数: 33714 | 30 那些小破ccd很便宜的，一般都是软件record
【在 B*G 的大作中提到】
: 确实，楼主好像对分辨率要求不高，才用了4倍物镜，直接用camcorder加近摄镜试试？
: 很多实验室都用两三百块钱的小高清camcorder做实验的。
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b*******t
发帖数: 33714 | 31 confocal要train那么久！！
我们都是自己搭显微镜的 @__@
【在 N******t 的大作中提到】
:
: ？？？？
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N******t
发帖数: 16051 | 32
而且要收一千大洋！！黑吧
我train了好多天都没干活，完了老板随口说 it's free, right? 我说。。。您没搞错
吧。。。-_-"
【在 b*******t 的大作中提到】
: confocal要train那么久！！
: 我们都是自己搭显微镜的 @__@
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b*******t
发帖数: 33714 | 33 阿！！还不如买张机票过来跟我玩。。。
【在 N******t 的大作中提到】
:
: 而且要收一千大洋！！黑吧
: 我train了好多天都没干活，完了老板随口说 it's free, right? 我说。。。您没搞错
: 吧。。。-_-"
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N******t
发帖数: 16051 | 34
不是我的钱呀 ＝（
【在 b*******t 的大作中提到】
: 阿！！还不如买张机票过来跟我玩。。。
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t****g
发帖数: 35582 | 35 train 7天才1000块？
你们找的劳模trainer?
【在 N******t 的大作中提到】
:
: 不是我的钱呀 ＝（
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b*******t
发帖数: 33714 | 36 叫老板买。。
【在 N******t 的大作中提到】
:
: 不是我的钱呀 ＝（
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v***a
发帖数: 23651 | 37 partially paid at initial sales
【在 t****g 的大作中提到】
: train 7天才1000块？
: 你们找的劳模trainer?
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N******t
发帖数: 16051 | 38
pia
7天十四个小时
而且其中一半时间他在喝咖啡让我自己练习
【在 t****g 的大作中提到】
: train 7天才1000块？
: 你们找的劳模trainer?
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N******t
发帖数: 16051 | 39
我找找明年有没有在你们那开的会。。。
话说明年五月半个月都会在东北部开会也
【在 b*******t 的大作中提到】
: 叫老板买。。
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b*******t
发帖数: 33714 | 40 我们train machine shop那么多吓人的东西也就几百块一周。。
【在 N******t 的大作中提到】
:
: 我找找明年有没有在你们那开的会。。。
: 话说明年五月半个月都会在东北部开会也
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b*******t
发帖数: 33714 | 41 我们有san jose的会。。。
【在 N******t 的大作中提到】
:
: 我找找明年有没有在你们那开的会。。。
: 话说明年五月半个月都会在东北部开会也
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t****g
发帖数: 35582 | 42 美国开会太无聊，吃喝还得自理。
当年读研的时候，去交大开会，管吃管住，还管玩。
【在 b*******t 的大作中提到】
: 我们有san jose的会。。。
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N******t
发帖数: 16051 | 43
劳模？
【在 b*******t 的大作中提到】
: 我们train machine shop那么多吓人的东西也就几百块一周。。
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N******t
发帖数: 16051 | 44
不用吧，你什么会阿
【在 t****g 的大作中提到】
: 美国开会太无聊，吃喝还得自理。
: 当年读研的时候，去交大开会，管吃管住，还管玩。
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N******t
发帖数: 16051 | 45
啥时侯。。。我和猫爹想春天过去看大树。。
【在 b*******t 的大作中提到】
: 我们有san jose的会。。。
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v***a
发帖数: 23651 | 46 你在东岸还是西岸啊
【在 b*******t 的大作中提到】
: 我们有san jose的会。。。
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N******t
发帖数: 16051 | 47
给我50个包子告诉你
【在 v***a 的大作中提到】
: 你在东岸还是西岸啊
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N******t
发帖数: 16051 | 48
懒懒你在machine shop里一定要把飘飘长发扎好阿～
另外告诉我怎么改昵称？lol
【在 b*******t 的大作中提到】
: 我们train machine shop那么多吓人的东西也就几百块一周。。
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D*****I
发帖数: 8268 | 49 是只要看还是要截图？
样品多厚？
【在 L*********x 的大作中提到】
: 我有个挺厚的样品，想在显微镜下从前到后都看清楚，这个怎么调光圈什么的？
: 还是说只要确定了物镜就没法改景深了？
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D*****I
发帖数: 8268 | 50 自理就算了，找机会报销好了
最不好的是管饭然后给吃三明治啊之类的很贱的东西。。
【在 t****g 的大作中提到】
: 美国开会太无聊，吃喝还得自理。
: 当年读研的时候，去交大开会，管吃管住，还管玩。
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P*********g
发帖数: 1336 | 51 看了半天，只有这个是正解。
EXTENDED DEPTH OF FIELD/FOCUS == 简写为 EDF
常用的分析软件都有这个功能。比如IMAGE-PRO, METAMORPH，或者免费的IMAGEJ+
PLUGIN
有两种EDF.看你是什么照片。
如果是荧光，你CAPTURE Z STACK，CONFOCAL可以，普通WIDE FIELD 光学显微镜也可以
。只要是若干张相片，在不同的FOCUS就可以。每个相片之间的距离（在Z方向）必须是
一样的。当然如果实在没有钱，也有人用手动聚焦，照若干张，算Z STACK的。
然后就是EDF软件合成为一张。这一张相片就包含各个Z POSITION清楚的东西－－就相
当与那么厚的SAMPLE你一下就看清楚了。
这个原理就是软件把每个相片里面（与其他上下相片比）最亮的像素给保留下来了。因
为OUT OF FOCUS的亮度一般没有IN FOCUS的时候亮。
如果是TRANSMITTED LIGHT,比如BRIGHTFIELD,不是荧光（FLUORESCENCE),也是用EDF,但
是用另外的ALGORITHM.因为这个时候，图片中最亮的地方不是样品，而是背景。一般用
BEST CONTRACT什么的ALGORITHM.
总之：要照Z STACK一堆相片，然后POST PROCESSING.
【在 x**0 的大作中提到】
: Confocal Z-section + Image-Pro Extended Depth of Field
: 包子
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b*******t
发帖数: 33714 | 52 美国人阿
【在 N******t 的大作中提到】
:
: 懒懒你在machine shop里一定要把飘飘长发扎好阿～
: 另外告诉我怎么改昵称？lol
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b*******t
发帖数: 33714 | 53 5月好像
【在 N******t 的大作中提到】
:
: 懒懒你在machine shop里一定要把飘飘长发扎好阿～
: 另外告诉我怎么改昵称？lol
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b*******t
发帖数: 33714 | 54 中间
【在 v***a 的大作中提到】
: 你在东岸还是西岸啊
|
b*******t
发帖数: 33714 | 55 ............
【在 N******t 的大作中提到】
:
: 懒懒你在machine shop里一定要把飘飘长发扎好阿～
: 另外告诉我怎么改昵称？lol
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b*******t
发帖数: 33714 | 56 扎好的，项链要脱掉，还一定要戴皮带
有一次我忘记带了，trainer把他的给我，hll地圈在pg上。。。
【在 N******t 的大作中提到】
:
: 懒懒你在machine shop里一定要把飘飘长发扎好阿～
: 另外告诉我怎么改昵称？lol
|
B*G
发帖数: 13438 | 57 machine shop有啥吓人的？说说看？学校里training最贵的经历是EBeam，假如MBE也让
train的话可能更贵...
【在 b*******t 的大作中提到】
: 我们train machine shop那么多吓人的东西也就几百块一周。。
|
B*G
发帖数: 13438 | 58 所以找不到同学玩的化，一定要第一天就在会场找两个buddy开始一起混，不然过两天
别人都混成帮了也没人搭理你了，当然要是poster section碰到无知小姑娘的话...
【在 t****g 的大作中提到】
: 美国开会太无聊，吃喝还得自理。
: 当年读研的时候，去交大开会，管吃管住，还管玩。
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r*********n
发帖数: 13992 | 59 XYZ终于来了。。。
【在 x**0 的大作中提到】
: Confocal Z-section + Image-Pro Extended Depth of Field
: 包子
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b*******t
发帖数: 33714 | 60 trainer讲很吓人的血淋淋的故事。。。还给我们看他断掉又接上的手指。。。
E beam我们好像免费train的？不记得了
【在 B*G 的大作中提到】
: machine shop有啥吓人的？说说看？学校里training最贵的经历是EBeam，假如MBE也让
: train的话可能更贵...
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L*********x
发帖数: 2191 | 61 谢谢！
【在 P*********g 的大作中提到】
: 看了半天，只有这个是正解。
: EXTENDED DEPTH OF FIELD/FOCUS == 简写为 EDF
: 常用的分析软件都有这个功能。比如IMAGE-PRO, METAMORPH，或者免费的IMAGEJ+
: PLUGIN
: 有两种EDF.看你是什么照片。
: 如果是荧光，你CAPTURE Z STACK，CONFOCAL可以，普通WIDE FIELD 光学显微镜也可以
: 。只要是若干张相片，在不同的FOCUS就可以。每个相片之间的距离（在Z方向）必须是
: 一样的。当然如果实在没有钱，也有人用手动聚焦，照若干张，算Z STACK的。
: 然后就是EDF软件合成为一张。这一张相片就包含各个Z POSITION清楚的东西－－就相
: 当与那么厚的SAMPLE你一下就看清楚了。
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L*********x
发帖数: 2191 | 62 确实动很快，所以很纠结。。。
【在 x**0 的大作中提到】
: 除非被摄物动的很快，不然也应该来得及的吧？
: 真的动的很快的话就用video camera了，呵呵
|
P*********g
发帖数: 1336 | 63 问题是有多快，一秒钟就挪一个地方，难。
如果能够做一个5－10个IMAGE的Z STACK， BEFORE IT MOVES,你可以做XYZT。
就是做一个Z STACK,然后紧接着做下一个，同样的地方。
那个Z STACK可以用MAXIMUM PROJECTION压缩成一张清楚的图片。
然后整个TIME LAPSE可以整成一个MOVIE. |
S*A
发帖数: 7142 | 64 这个在不是很常见么，就是叠很多 focus point 的照片就完了。
专业的还有自动步进和拍摄的器材，100 多张照片随便拍。
不然调一下拍一张烦死你。 |
C*********y
发帖数: 2738 | |
N******t
发帖数: 16051 | 66
很吓人的阿！你忘了那个什么学校的女生半夜在machine shop 头发被夹住一下就挂掉
了的事么？@@
【在 B*G 的大作中提到】
: machine shop有啥吓人的？说说看？学校里training最贵的经历是EBeam，假如MBE也让
: train的话可能更贵...
|
b*******t
发帖数: 33714 | 67 我们trainer就讲了这个故事！！
【在 N******t 的大作中提到】
:
: 很吓人的阿！你忘了那个什么学校的女生半夜在machine shop 头发被夹住一下就挂掉
: 了的事么？@@
|
b*******t
发帖数: 33714 | 68 还有削耳朵什么的
【在 N******t 的大作中提到】
:
: 很吓人的阿！你忘了那个什么学校的女生半夜在machine shop 头发被夹住一下就挂掉
: 了的事么？@@
|
N******t
发帖数: 16051 | 69
这个是大牛，崇拜
【在 P*********g 的大作中提到】
: 看了半天，只有这个是正解。
: EXTENDED DEPTH OF FIELD/FOCUS == 简写为 EDF
: 常用的分析软件都有这个功能。比如IMAGE-PRO, METAMORPH，或者免费的IMAGEJ+
: PLUGIN
: 有两种EDF.看你是什么照片。
: 如果是荧光，你CAPTURE Z STACK，CONFOCAL可以，普通WIDE FIELD 光学显微镜也可以
: 。只要是若干张相片，在不同的FOCUS就可以。每个相片之间的距离（在Z方向）必须是
: 一样的。当然如果实在没有钱，也有人用手动聚焦，照若干张，算Z STACK的。
: 然后就是EDF软件合成为一张。这一张相片就包含各个Z POSITION清楚的东西－－就相
: 当与那么厚的SAMPLE你一下就看清楚了。
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N******t
发帖数: 16051 | 70
5月啥时侯？？我基本上半个月都在东岸。。
【在 b*******t 的大作中提到】
: 5月好像
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N******t
发帖数: 16051 | 71
他的腰好粗 @@
【在 b*******t 的大作中提到】
: 扎好的，项链要脱掉，还一定要戴皮带
: 有一次我忘记带了，trainer把他的给我，hll地圈在pg上。。。
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b*******t
发帖数: 33714 | 72 心里默念
上北下南左西右东。。。
【在 N******t 的大作中提到】
:
: 他的腰好粗 @@
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N******t
发帖数: 16051 | 73
我高中的老师，自己把两个指头锯掉了，没街上。。
【在 b*******t 的大作中提到】
: trainer讲很吓人的血淋淋的故事。。。还给我们看他断掉又接上的手指。。。
: E beam我们好像免费train的？不记得了
|
b*******t
发帖数: 33714 | 74 @______@
【在 N******t 的大作中提到】
:
: 我高中的老师，自己把两个指头锯掉了，没街上。。
|
N******t
发帖数: 16051 | 75
真的有？？=O
【在 b*******t 的大作中提到】
: 还有削耳朵什么的
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b*******t
发帖数: 33714 | 76 不知道真假
【在 N******t 的大作中提到】
:
: 真的有？？=O
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N******t
发帖数: 16051 | 77
错了，左冬右西～
【在 b*******t 的大作中提到】
: 心里默念
: 上北下南左西右东。。。
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b*******t
发帖数: 33714 | 78 阿。。
【在 N******t 的大作中提到】
:
: 错了，左冬右西～
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N******t
发帖数: 16051 | 79
就在自己家的车库里，用电锯@@
【在 b*******t 的大作中提到】
: @______@
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N******t
发帖数: 16051 | 80
嗯 //点头
【在 b*******t 的大作中提到】
: 阿。。
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b*******t
发帖数: 33714 | 81 阿 不听不听不听！！！！
【在 N******t 的大作中提到】
:
: 嗯 //点头
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N******t
发帖数: 16051 | 82
pat pat =X
【在 b*******t 的大作中提到】
: 阿 不听不听不听！！！！
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