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NanoST版 - AFM做RNA成像 求助
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i******r
发帖数: 1415
1
组里人都不了解应该如何处理生物样品
我就是简单地把mica泡在RNA里面 然后拿出来吹干 然后做AFM 啥都没有。。。
我感觉我这个办法肯定不对
不知道对RNA DNA一类样品正确的处理方法应该是怎么样的
谢谢
t****r
发帖数: 784
2
你必须想办法让RNA能够bind到mica的surface上面
一般可以用electrostatic force
取决于RNA的charge的状态

【在 i******r 的大作中提到】
: 组里人都不了解应该如何处理生物样品
: 我就是简单地把mica泡在RNA里面 然后拿出来吹干 然后做AFM 啥都没有。。。
: 我感觉我这个办法肯定不对
: 不知道对RNA DNA一类样品正确的处理方法应该是怎么样的
: 谢谢

y***e
发帖数: 6082
3
记得当年上课学过,貌似能很清晰的看到单链核酸

你必须想办法让RNA能够bind到mica的surface上面
一般可以用electrostatic force
取决于RNA的charge的状态

【在 t****r 的大作中提到】
: 你必须想办法让RNA能够bind到mica的surface上面
: 一般可以用electrostatic force
: 取决于RNA的charge的状态

i******r
发帖数: 1415
4
还记得是怎么做的吗?
谢谢

【在 y***e 的大作中提到】
: 记得当年上课学过,貌似能很清晰的看到单链核酸
:
: 你必须想办法让RNA能够bind到mica的surface上面
: 一般可以用electrostatic force
: 取决于RNA的charge的状态

S*****P
发帖数: 323
5
把mica在镁离子里面泡一会

【在 i******r 的大作中提到】
: 还记得是怎么做的吗?
: 谢谢

i******r
发帖数: 1415
6
可我RNA的buffer里面就有镁离子啊。。。
但是还是看不见东西。。。

【在 S*****P 的大作中提到】
: 把mica在镁离子里面泡一会
p****e
发帖数: 105
7
用2-5mM Mg离子处理一下mica,10uL, 30second. 用氮气吹一下。
2-5uL RNA 0.1-1ug/uL放到mica上,30second,氮气吹干。如果太多盐晶体,用2uL水
洗洗。
z*****6
发帖数: 1486
8
RNA做成水溶液。。在mica 上放几分钟后,用Mg溶液洗。
但是这种结合力,我的经验告诉我还是不够高。。你可以看到RNA,但是未必是舒展状
态。。大多是团块。
我后来采用ATPES treatment.. 你去搜搜 Lyubchenko的文章。。有详细介绍。还有最
近进展。
i******r
发帖数: 1415
9
谢谢!

【在 p****e 的大作中提到】
: 用2-5mM Mg离子处理一下mica,10uL, 30second. 用氮气吹一下。
: 2-5uL RNA 0.1-1ug/uL放到mica上,30second,氮气吹干。如果太多盐晶体,用2uL水
: 洗洗。

i******r
发帖数: 1415
10
多谢!

【在 z*****6 的大作中提到】
: RNA做成水溶液。。在mica 上放几分钟后,用Mg溶液洗。
: 但是这种结合力,我的经验告诉我还是不够高。。你可以看到RNA,但是未必是舒展状
: 态。。大多是团块。
: 我后来采用ATPES treatment.. 你去搜搜 Lyubchenko的文章。。有详细介绍。还有最
: 近进展。

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