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Biology版 - RNAscope 请教
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M*******C
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最近在试RNAscope,ACDbio,用的是RNAscope® 2.5 HD Detection Reagent-RED
老鼠的皮肤石蜡切片。用了Kit里的Positive Probe, Negative Probe, 我的target
probe, 还有以前同事的一个已知work的probe也做阳性对照。试了4次了,
用同样的片子试几种probe,现在的情况是:
positive probe 看到强的signal,dots,就算work了。
target probe 也看到些红色signal,算work。
但negative probe 也出现一些紫红,虽然明显比target probe 弱,理论上Negative只
应该有Hematoxylin的蓝色。
用同事的probe的片子,很强的信号在皮肤的真皮位置(是期待的结果),但问题是我
的片子在皮肤的表皮,也看到一些信号,这个不是期待的,同事以前用这个probe做老
鼠的片子,表皮只有Hematoxylin的蓝色。
感觉Negative和同事probe的结果,出现的不想要的信号,可能是同样的原因引起的,
但不知道是什么原因?做这个的同事已经离开lab。
另外还有一些常规问题,这家公司说要在一个专门的HybEZ™ Oven 里做,40C。
我们没有这个oven,现在是用平时的digital incubator做,incubator setting 40C
显示40C的情况下,但片子在的塑料盒里温度竟然才28C。所以不知道是否应该升高
incubator的setting直到盒子里达到40C?
谢谢!
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