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Biology版 - 窃喜,建立了一个方法
相关主题
我无意中搞出个大肠杆菌,8小时就能长成不小的菌落问个培养细菌的问题
这个好求大肠杆菌发酵培养基配方
忙了五个星期,NgAGO重复实验总算告一段落再问一个pcr的问题
文章提前发到biorxiv上的目的是什么?请专家谈谈德国的E. Coli事件
请问大肠杆菌为什么是微生物的模式生物?德国豆芽大肠杆菌这件事,大家怎么看?
表达蛋白的问题J. Bacteriol 上好多测序的文章!!!
请教大肠杆菌蛋白表达体系可以对蛋白进行磷酸化修饰吗?☆有人用过Bugbuster Master Mix裂解大肠杆菌提蛋白吗?
分析primer 的软件弱问,transformation之后摇菌时间过长怎么办
相关话题的讨论汇总
话题: 方法话题: 蛋白话题: 鍋氫话题: axiv话题: nature
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1 (共1页)
h******y
发帖数: 173
1
是鉴定(或研究)某一类蛋白的方法,目前使用的方法做起来比较麻烦、耗时,需要实
验技巧和特定的生物材料(不同遗传背景的细胞),只有某些实验室能做。
我们建立的方法是基于大肠杆菌的,做起来非常简单,能做大肠杆菌的实验室都能做。
如果这个方法能被认可,会极大推动这类蛋白的研究(由于方法问题,目前发现的这类
蛋白比较有限,如果用我们的方法,会有很多这类蛋白会被鉴定出来)。
这个方法的原理简单明了,说出来做生物的基本都能明白。我们目前已经验证了这个方
法是工作的、可靠的。
我们也不明白为什么这个方法没有人先建立起来,我们从5月底有想法,到现在基本上
做完了。问题:这个方法能发什么水平的杂志?
M**********7
发帖数: 127
2
大哥,我想说一个词,那就是
诺奖级……
h******y
发帖数: 173
3

哥,不要调笑俺啊~~~
这个方法原理太简单了,但是却十分有效。
现有的方法我们实验室引进了,但是做起来太耗时,做一次实验需要几个星期(还不包
括构建克隆),这才促使我们去建立一个新方法。用现有的方法所用的时间就是从PCR
开始到筛选克隆的时间。

【在 M**********7 的大作中提到】
: 大哥,我想说一个词,那就是
: 诺奖级……

M**********7
发帖数: 127
4
如果确实比现有的方法更简便更有效,更经济,那么能发什么样的文章,取决于你这技
术的应用范围广不广,越广越牛逼。

PCR

【在 h******y 的大作中提到】
:
: 哥,不要调笑俺啊~~~
: 这个方法原理太简单了,但是却十分有效。
: 现有的方法我们实验室引进了,但是做起来太耗时,做一次实验需要几个星期(还不包
: 括构建克隆),这才促使我们去建立一个新方法。用现有的方法所用的时间就是从PCR
: 开始到筛选克隆的时间。

d****i
发帖数: 2346
5
说了半天我不知道是什么技术。。。。。能share吗?不能的话等你发了文章第一时间
post到这里。
h*****6
发帖数: 90
6
投小一点的杂志,要保证文章能发表,影响因子不去考虑。不要投大杂志,大杂志审稿
人都比较牛,如果觉得你的东西有点意思,会压着你的文章不发,然后让自己的实验室
往后做。如果这样,你就悲剧了。因为你的工作量不大,拒你是天经地义,大佬实验室
人多势众,搞工作量大的文章轻而易举。
n******7
发帖数: 12463
7
是的,其实实用的东西我觉得发哪里不重要,引用率说话
可以去bioarxv先占个坑

【在 h*****6 的大作中提到】
: 投小一点的杂志,要保证文章能发表,影响因子不去考虑。不要投大杂志,大杂志审稿
: 人都比较牛,如果觉得你的东西有点意思,会压着你的文章不发,然后让自己的实验室
: 往后做。如果这样,你就悲剧了。因为你的工作量不大,拒你是天经地义,大佬实验室
: 人多势众,搞工作量大的文章轻而易举。

C*****l
发帖数: 3211
8
开个玩笑。。。
联系这个ID名。。。怎么感觉像。。经验之谈。

【在 h*****6 的大作中提到】
: 投小一点的杂志,要保证文章能发表,影响因子不去考虑。不要投大杂志,大杂志审稿
: 人都比较牛,如果觉得你的东西有点意思,会压着你的文章不发,然后让自己的实验室
: 往后做。如果这样,你就悲剧了。因为你的工作量不大,拒你是天经地义,大佬实验室
: 人多势众,搞工作量大的文章轻而易举。

a****n
发帖数: 3082
9
阿凯舞,当物理方法发表出来再说

【在 h*****6 的大作中提到】
: 投小一点的杂志,要保证文章能发表,影响因子不去考虑。不要投大杂志,大杂志审稿
: 人都比较牛,如果觉得你的东西有点意思,会压着你的文章不发,然后让自己的实验室
: 往后做。如果这样,你就悲剧了。因为你的工作量不大,拒你是天经地义,大佬实验室
: 人多势众,搞工作量大的文章轻而易举。

t**m
发帖数: 158
10
啥水平的文章得看你这类蛋白是啥吧?
单发方法很难发好文章。用这个方法做出点东西来然后一起发应该好一点

【在 h******y 的大作中提到】
: 是鉴定(或研究)某一类蛋白的方法,目前使用的方法做起来比较麻烦、耗时,需要实
: 验技巧和特定的生物材料(不同遗传背景的细胞),只有某些实验室能做。
: 我们建立的方法是基于大肠杆菌的,做起来非常简单,能做大肠杆菌的实验室都能做。
: 如果这个方法能被认可,会极大推动这类蛋白的研究(由于方法问题,目前发现的这类
: 蛋白比较有限,如果用我们的方法,会有很多这类蛋白会被鉴定出来)。
: 这个方法的原理简单明了,说出来做生物的基本都能明白。我们目前已经验证了这个方
: 法是工作的、可靠的。
: 我们也不明白为什么这个方法没有人先建立起来,我们从5月底有想法,到现在基本上
: 做完了。问题:这个方法能发什么水平的杂志?

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n******g
发帖数: 2201
11
你们实验室在河北吗?

【在 h******y 的大作中提到】
: 是鉴定(或研究)某一类蛋白的方法,目前使用的方法做起来比较麻烦、耗时,需要实
: 验技巧和特定的生物材料(不同遗传背景的细胞),只有某些实验室能做。
: 我们建立的方法是基于大肠杆菌的,做起来非常简单,能做大肠杆菌的实验室都能做。
: 如果这个方法能被认可,会极大推动这类蛋白的研究(由于方法问题,目前发现的这类
: 蛋白比较有限,如果用我们的方法,会有很多这类蛋白会被鉴定出来)。
: 这个方法的原理简单明了,说出来做生物的基本都能明白。我们目前已经验证了这个方
: 法是工作的、可靠的。
: 我们也不明白为什么这个方法没有人先建立起来,我们从5月底有想法,到现在基本上
: 做完了。问题:这个方法能发什么水平的杂志?

b******e
发帖数: 53
12
Sounds like the positive hit from a phage display screening
m******5
发帖数: 224
13
诺奖没跑了

【在 h******y 的大作中提到】
: 是鉴定(或研究)某一类蛋白的方法,目前使用的方法做起来比较麻烦、耗时,需要实
: 验技巧和特定的生物材料(不同遗传背景的细胞),只有某些实验室能做。
: 我们建立的方法是基于大肠杆菌的,做起来非常简单,能做大肠杆菌的实验室都能做。
: 如果这个方法能被认可,会极大推动这类蛋白的研究(由于方法问题,目前发现的这类
: 蛋白比较有限,如果用我们的方法,会有很多这类蛋白会被鉴定出来)。
: 这个方法的原理简单明了,说出来做生物的基本都能明白。我们目前已经验证了这个方
: 法是工作的、可靠的。
: 我们也不明白为什么这个方法没有人先建立起来,我们从5月底有想法,到现在基本上
: 做完了。问题:这个方法能发什么水平的杂志?

n******g
发帖数: 2201
14
phage display 很容易做吗?楼主说她的方法很简单

【在 b******e 的大作中提到】
: Sounds like the positive hit from a phage display screening
h******y
发帖数: 173
15

原理太简单了,一说就漏了:)
以前没人做,估计是没想到这么简单。现在准备写文章,读到一篇文献,按照这篇文献
的结论,我们这个方法很难建立起来。
好在当初没读到这篇文献。

【在 d****i 的大作中提到】
: 说了半天我不知道是什么技术。。。。。能share吗?不能的话等你发了文章第一时间
: post到这里。

h******y
发帖数: 173
16

说得我也有点担心了。因为条件我们都摸好了,别人重复的话两个星期足够了。

【在 h*****6 的大作中提到】
: 投小一点的杂志,要保证文章能发表,影响因子不去考虑。不要投大杂志,大杂志审稿
: 人都比较牛,如果觉得你的东西有点意思,会压着你的文章不发,然后让自己的实验室
: 往后做。如果这样,你就悲剧了。因为你的工作量不大,拒你是天经地义,大佬实验室
: 人多势众,搞工作量大的文章轻而易举。

h******y
发帖数: 173
17

哎呀,俺们是在天朝,还是要追求影响因子的呀。

【在 n******7 的大作中提到】
: 是的,其实实用的东西我觉得发哪里不重要,引用率说话
: 可以去bioarxv先占个坑

h******y
发帖数: 173
18

不敢在河北呀,既不姓韩也不姓高还不姓沈:)

【在 n******g 的大作中提到】
: 你们实验室在河北吗?
c********6
发帖数: 693
19
韩韩春雨居然出来指导你发诺奖级文章
h******y
发帖数: 173
20

兄弟,我是支持你反韩嘀~~~~~俺和他一丁点关系都没有啊

【在 c********6 的大作中提到】
: 韩韩春雨居然出来指导你发诺奖级文章
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c********6
发帖数: 693
21
我是指前面那位han2016,他在指导你,明显他就是韩春雨

【在 h******y 的大作中提到】
:
: 兄弟,我是支持你反韩嘀~~~~~俺和他一丁点关系都没有啊

h******y
发帖数: 173
22

被韩主席关注,倍感荣幸啊。

【在 c********6 的大作中提到】
: 我是指前面那位han2016,他在指导你,明显他就是韩春雨
h*****6
发帖数: 90
23
我不是韩副主席。
不是吹牛,韩要是有我这个水平,肯定不会被人吊打这么长时间。韩是个土鳖,不知道
上辈子积了什么德,好不容易发个自然杂志的文章,却遭到自己同胞的疯狂围剿,我实
在看不下去,忍不住出手了。
中国人这种疯狂内斗,是非常罕见的。印度人就很少看到这个情况,因为再傻都知道,
团结就是力量。

【在 h******y 的大作中提到】
:
: 被韩主席关注,倍感荣幸啊。

c********6
发帖数: 693
24
你就等着受死吧,韩春雨你有没有想过你的家人怎么看你这个伪君子

【在 h*****6 的大作中提到】
: 我不是韩副主席。
: 不是吹牛,韩要是有我这个水平,肯定不会被人吊打这么长时间。韩是个土鳖,不知道
: 上辈子积了什么德,好不容易发个自然杂志的文章,却遭到自己同胞的疯狂围剿,我实
: 在看不下去,忍不住出手了。
: 中国人这种疯狂内斗,是非常罕见的。印度人就很少看到这个情况,因为再傻都知道,
: 团结就是力量。

M**********7
发帖数: 127
25
要团结起来斗骗子,不让老鼠屎坏了一锅粥。
把骗子从团体里面通通赶出去,才能团结。
不然一群科学家怎么跟一些骗子团结?如果团结了,你告诉我他们是一伙骗子,还是一
群科学家?
我建议你滚出MITBBS

【在 h*****6 的大作中提到】
: 我不是韩副主席。
: 不是吹牛,韩要是有我这个水平,肯定不会被人吊打这么长时间。韩是个土鳖,不知道
: 上辈子积了什么德,好不容易发个自然杂志的文章,却遭到自己同胞的疯狂围剿,我实
: 在看不下去,忍不住出手了。
: 中国人这种疯狂内斗,是非常罕见的。印度人就很少看到这个情况,因为再傻都知道,
: 团结就是力量。

h*****6
发帖数: 90
26
团结是无条件的。如果每个人都提个条件,团结不是一句空话?
造假是非常不好的,但是科学有解决造假的办法。这个办法就是不断的质疑和反质疑。
如果像你这样,企图用行政手段,打压反对意见,要搞一言堂,其实是变相支持造假。
因为搞一言堂,就是叫科学滚蛋了,没有科学的方法,想怎么造假就怎么造假。

【在 M**********7 的大作中提到】
: 要团结起来斗骗子,不让老鼠屎坏了一锅粥。
: 把骗子从团体里面通通赶出去,才能团结。
: 不然一群科学家怎么跟一些骗子团结?如果团结了,你告诉我他们是一伙骗子,还是一
: 群科学家?
: 我建议你滚出MITBBS

c********6
发帖数: 693
27
造假就滚出碗里,给中国开眼界丢脸的东西

【在 h*****6 的大作中提到】
: 团结是无条件的。如果每个人都提个条件,团结不是一句空话?
: 造假是非常不好的,但是科学有解决造假的办法。这个办法就是不断的质疑和反质疑。
: 如果像你这样,企图用行政手段,打压反对意见,要搞一言堂,其实是变相支持造假。
: 因为搞一言堂,就是叫科学滚蛋了,没有科学的方法,想怎么造假就怎么造假。

h*****6
发帖数: 90
28
能心平气和地讨论问题,是每个科学家最基本的要求。即使你认为别人的观点非常。。
。。。。, 也要静下心来,把自己的反驳观点讲出来。喊个口号,从科学的角度看,
没有任何意义。

【在 c********6 的大作中提到】
: 造假就滚出碗里,给中国开眼界丢脸的东西
c********6
发帖数: 693
29
跟你这种伪君子心平气和?造假就不要怕人骂

【在 h*****6 的大作中提到】
: 能心平气和地讨论问题,是每个科学家最基本的要求。即使你认为别人的观点非常。。
: 。。。。, 也要静下心来,把自己的反驳观点讲出来。喊个口号,从科学的角度看,
: 没有任何意义。

h*****6
发帖数: 90
30
我肯定不会和你对喊口号,
但是非常愿意和你讨论问题,就事论事。如果今天不行,希望明天可以,明天不行,还
有后天。

【在 c********6 的大作中提到】
: 跟你这种伪君子心平气和?造假就不要怕人骂
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求作农杆菌感受态细胞的经验这个好
农杆菌电击转化忙了五个星期,NgAGO重复实验总算告一段落
我无意中搞出个大肠杆菌,8小时就能长成不小的菌落文章提前发到biorxiv上的目的是什么?
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c********6
发帖数: 693
31
不管今天明天,韩春雨造假了就必须遗臭万年

【在 h*****6 的大作中提到】
: 我肯定不会和你对喊口号,
: 但是非常愿意和你讨论问题,就事论事。如果今天不行,希望明天可以,明天不行,还
: 有后天。

w****e
发帖数: 1883
32
一看这说话风格,好像又是韩老师的一个马甲。
c********6
发帖数: 693
33
他就是韩春雨,一条快要跳墙的狗

【在 w****e 的大作中提到】
: 一看这说话风格,好像又是韩老师的一个马甲。
K******S
发帖数: 10109
34
nature method 上

【在 h******y 的大作中提到】
: 是鉴定(或研究)某一类蛋白的方法,目前使用的方法做起来比较麻烦、耗时,需要实
: 验技巧和特定的生物材料(不同遗传背景的细胞),只有某些实验室能做。
: 我们建立的方法是基于大肠杆菌的,做起来非常简单,能做大肠杆菌的实验室都能做。
: 如果这个方法能被认可,会极大推动这类蛋白的研究(由于方法问题,目前发现的这类
: 蛋白比较有限,如果用我们的方法,会有很多这类蛋白会被鉴定出来)。
: 这个方法的原理简单明了,说出来做生物的基本都能明白。我们目前已经验证了这个方
: 法是工作的、可靠的。
: 我们也不明白为什么这个方法没有人先建立起来,我们从5月底有想法,到现在基本上
: 做完了。问题:这个方法能发什么水平的杂志?

c********6
发帖数: 693
35
只要不像韩春雨那样就行

【在 K******S 的大作中提到】
: nature method 上
h******y
发帖数: 173
36

谢谢你的建议,我也是想试一试,就怕文章的分量不够。
(数据量不太多,但结果很明确)

【在 K******S 的大作中提到】
: nature method 上
h******y
发帖数: 173
37

肯定不会那样的,肯定的。
我这个方法非常好验证,如果我提供质粒,2-3天就能验证完(时间基本消耗在培养大
肠杆菌上了)。

【在 c********6 的大作中提到】
: 只要不像韩春雨那样就行
w******e
发帖数: 144
38
鐢宠涓撳埄锛屾寕axiv鍗犲潙锛屾姇鏂囩珷銆br />
鐗涗笢瑗夸笉閮芥槸鍙戣〃鍑烘潵鍚庣畝鍗曟槗鎳傦紝浣嗗埆浜哄氨鏄病鎯冲埌涔堬紵
鏃㈢劧杩欎箞绠崟锛宎xiv鍗犲潙credit灏遍兘鏈変簡锛屽紩鐢ㄤ篃寰堥珮鍚с璇
濊杩欎箞绠崟鍒汉鎸夌収杩欎釜鍋氫笉寮曠敤浣犳枃绔狅紝璇磋窡浣犵殑涓嶄竴
鏍峰拫鍔烇紵
D********d
发帖数: 2154
39
多向韩主席取经,放大成诺奖级发现,要发表在ncs上,找一个二流院校做依靠。
成功就是你的呢。

【在 h******y 的大作中提到】
: 是鉴定(或研究)某一类蛋白的方法,目前使用的方法做起来比较麻烦、耗时,需要实
: 验技巧和特定的生物材料(不同遗传背景的细胞),只有某些实验室能做。
: 我们建立的方法是基于大肠杆菌的,做起来非常简单,能做大肠杆菌的实验室都能做。
: 如果这个方法能被认可,会极大推动这类蛋白的研究(由于方法问题,目前发现的这类
: 蛋白比较有限,如果用我们的方法,会有很多这类蛋白会被鉴定出来)。
: 这个方法的原理简单明了,说出来做生物的基本都能明白。我们目前已经验证了这个方
: 法是工作的、可靠的。
: 我们也不明白为什么这个方法没有人先建立起来,我们从5月底有想法,到现在基本上
: 做完了。问题:这个方法能发什么水平的杂志?

h******y
发帖数: 173
40

堬紵
#65533;
怎么是乱码?能再发一次么?

【在 w******e 的大作中提到】
: 鐢宠涓撳埄锛屾寕axiv鍗犲潙锛屾姇鏂囩珷銆br />
: 鐗涗笢瑗夸笉閮芥槸鍙戣〃鍑烘潵鍚庣畝鍗曟槗鎳傦紝浣嗗埆浜哄氨鏄病鎯冲埌涔堬紵
: 鏃㈢劧杩欎箞绠崟锛宎xiv鍗犲潙credit灏遍兘鏈変簡锛屽紩鐢ㄤ篃寰堥珮鍚с璇
: 濊杩欎箞绠崟鍒汉鎸夌収杩欎釜鍋氫笉寮曠敤浣犳枃绔狅紝璇磋窡浣犵殑涓嶄竴
: 鏍峰拫鍔烇紵

相关主题
请问大肠杆菌为什么是微生物的模式生物?分析primer 的软件
表达蛋白的问题问个培养细菌的问题
请教大肠杆菌蛋白表达体系可以对蛋白进行磷酸化修饰吗?求大肠杆菌发酵培养基配方
进入Biology版参与讨论
T****i
发帖数: 15191
41
能发个小文章和申请专利同时进行吗?

【在 h******y 的大作中提到】
: 是鉴定(或研究)某一类蛋白的方法,目前使用的方法做起来比较麻烦、耗时,需要实
: 验技巧和特定的生物材料(不同遗传背景的细胞),只有某些实验室能做。
: 我们建立的方法是基于大肠杆菌的,做起来非常简单,能做大肠杆菌的实验室都能做。
: 如果这个方法能被认可,会极大推动这类蛋白的研究(由于方法问题,目前发现的这类
: 蛋白比较有限,如果用我们的方法,会有很多这类蛋白会被鉴定出来)。
: 这个方法的原理简单明了,说出来做生物的基本都能明白。我们目前已经验证了这个方
: 法是工作的、可靠的。
: 我们也不明白为什么这个方法没有人先建立起来,我们从5月底有想法,到现在基本上
: 做完了。问题:这个方法能发什么水平的杂志?

n******7
发帖数: 12463
42
biorxiv不影响发表
先占坑吧
尽量投审稿快的杂志
毕竟你这个很容易被抄
还是不要贪大

【在 h******y 的大作中提到】
:
: 堬紵
: #65533;
: 怎么是乱码?能再发一次么?

g********0
发帖数: 6201
43
看到没,现在生物界这些大佬多么的贪婪无耻,弄的晚辈都得象防贼一样防着他们。生
物研究啥时能天下无贼啊?

【在 n******7 的大作中提到】
: biorxiv不影响发表
: 先占坑吧
: 尽量投审稿快的杂志
: 毕竟你这个很容易被抄
: 还是不要贪大

K******S
发帖数: 10109
44
then try nature protocol. Quite a few very simple and easy to do protocols
in my field made there.

【在 h******y 的大作中提到】
:
: 堬紵
: #65533;
: 怎么是乱码?能再发一次么?

j*******u
发帖数: 81
45
听起来就是simplify了某个biological readout
其实这种方法很多,估计都发不大
就是看似用很简单的方法筛严谨地需要复杂方法才能筛的东西
你觉得复杂的东西条件好的实验室根本看不上眼

【在 h******y 的大作中提到】
: 是鉴定(或研究)某一类蛋白的方法,目前使用的方法做起来比较麻烦、耗时,需要实
: 验技巧和特定的生物材料(不同遗传背景的细胞),只有某些实验室能做。
: 我们建立的方法是基于大肠杆菌的,做起来非常简单,能做大肠杆菌的实验室都能做。
: 如果这个方法能被认可,会极大推动这类蛋白的研究(由于方法问题,目前发现的这类
: 蛋白比较有限,如果用我们的方法,会有很多这类蛋白会被鉴定出来)。
: 这个方法的原理简单明了,说出来做生物的基本都能明白。我们目前已经验证了这个方
: 法是工作的、可靠的。
: 我们也不明白为什么这个方法没有人先建立起来,我们从5月底有想法,到现在基本上
: 做完了。问题:这个方法能发什么水平的杂志?

h******y
发帖数: 173
46

纯基础研究的方法,申请专利的意义不大,没人会付使用费呀。

【在 T****i 的大作中提到】
: 能发个小文章和申请专利同时进行吗?
h******y
发帖数: 173
47

在网上查了半天biorxiv,有两个问题不大确认:
1、在biorxiv上发了之后,会不会影响投稿?
2、是不是占了坑之后就不怕别人抢了?

【在 n******7 的大作中提到】
: biorxiv不影响发表
: 先占坑吧
: 尽量投审稿快的杂志
: 毕竟你这个很容易被抄
: 还是不要贪大

n******7
发帖数: 12463
48
1.现在大部分杂志都接受这种pre-print的稿件了
我之前看到哪里说NPG旗下的不接受,专门查了一下
Preprint servers
The Nature journals support the posting of submitted manuscripts on
community preprint servers such as arxiv and bioarxiv. We do, however, ask
you to respect the following summary of our policies:
The original submitted version may be posted at any time.
The published version—copyedited and in Nature journal format—may not be
posted on a preprint server or other website.
所以应该不会有影响的。不过最好核实一下你的目标刊物的政策
2. 要点脸面的应该都不会,但是发表的文章都能被抄袭不是?
具体到你这个东西,最大的可能是别人看到你的稿子,立刻开始进行改进
快速发表到visibility比较高的地方,然后claim自己原创
这几年的神仙打架都是这种情况

【在 h******y 的大作中提到】
:
: 在网上查了半天biorxiv,有两个问题不大确认:
: 1、在biorxiv上发了之后,会不会影响投稿?
: 2、是不是占了坑之后就不怕别人抢了?

B*******y
发帖数: 17
49
恭喜你的发现。我觉得能有自己的发现和突破是科研上非常愉快与自豪的事。
非常理解能说的技术思路不能透漏,但是我觉得你可以提供一些比较的参数,这样更方
便于大家对你的新方法进行效率上的比较。比如说:
(1)你提到传统实验需要几个星期(还不包括构建克隆),是否可以详细一些。按照
实验一切顺利,一次就成功计算,传统方法从构建克隆到达到鉴定蛋白结果需要多少个
星期,最好能有确切数字。如果用的是你的新方法,需要多少天,最好是确切数字。
(2)传统方法拿到的蛋白的质量、浓度、纯度等等和你的新方法的进行比较。
(3)你提到你的新方法是用大肠杆菌,传统方法用的是真核细胞吗?我在想会不会还
有真核细胞里面特定的修饰(比如说某些糖基化修饰)的issue。
我不是做生化的,另外根据你提供的信息很难知道对领域的贡献。我觉得 tfmm (不是
mm) 说的有道理,如果你想要发高些档次的文章,最好还是有 结合技术回答一些生物
学问题 的数据。

PCR

【在 h******y 的大作中提到】
:
: 在网上查了半天biorxiv,有两个问题不大确认:
: 1、在biorxiv上发了之后,会不会影响投稿?
: 2、是不是占了坑之后就不怕别人抢了?

q******g
发帖数: 3858
50
nature method...nature biotech....被拒之后再投其他
相关主题
再问一个pcr的问题J. Bacteriol 上好多测序的文章!!!
请专家谈谈德国的E. Coli事件☆有人用过Bugbuster Master Mix裂解大肠杆菌提蛋白吗?
德国豆芽大肠杆菌这件事,大家怎么看?弱问,transformation之后摇菌时间过长怎么办
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h******y
发帖数: 173
51

谢谢兄弟的鼓励。
实验时间:假如质粒构建好了,传统方法大约需要10天,我们的方法最多3天。
这个方法本质上就是通过细胞表现出特定的表型鉴定蛋白的某种特性。
理论上,这可以通过某个通路上的A点、B点或C点来实现
2000年,行业内的大佬就成功地在A点实现了这个方法,文章中也说明了他们做了C点,
没有成功,说如果C点成功的话会更有效。到2009年,同一个实验室又做了B点,现在成
为行业内认可的方法。
当然,上述方法都是在真核生物中。我们成功地在原核生物中实现了C点。这里不涉及
翻译后修饰,如果愿意的话,现在立刻就可以把我们的方法移植到真核生物中。
这里有实验设计上的突破,同时也有一点理论的进步——以前认为这类蛋白在大肠杆菌
中如果想表现出要检测的特性,必须同时引进真核中的特定蛋白因子。我们的结果证实
,根本不需要这个蛋白因子。
我们做这个方法是本身就是为了证实我们一个蛋白是否是这类蛋白,结果是阳性的(既
用了传统方法,又用的新方法)。我不知道这部分是否需要写到这个文章中去,毕竟那
是另一个故事。

【在 B*******y 的大作中提到】
: 恭喜你的发现。我觉得能有自己的发现和突破是科研上非常愉快与自豪的事。
: 非常理解能说的技术思路不能透漏,但是我觉得你可以提供一些比较的参数,这样更方
: 便于大家对你的新方法进行效率上的比较。比如说:
: (1)你提到传统实验需要几个星期(还不包括构建克隆),是否可以详细一些。按照
: 实验一切顺利,一次就成功计算,传统方法从构建克隆到达到鉴定蛋白结果需要多少个
: 星期,最好能有确切数字。如果用的是你的新方法,需要多少天,最好是确切数字。
: (2)传统方法拿到的蛋白的质量、浓度、纯度等等和你的新方法的进行比较。
: (3)你提到你的新方法是用大肠杆菌,传统方法用的是真核细胞吗?我在想会不会还
: 有真核细胞里面特定的修饰(比如说某些糖基化修饰)的issue。
: 我不是做生化的,另外根据你提供的信息很难知道对领域的贡献。我觉得 tfmm (不是

h******y
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52
多年之后好不容易过来汇报一下:
当时的初步验证结果符合理论预期,所以很兴奋,摆开摊子想大干一场,结果最初的结
果就重复不出来了。于是就换各种条件,还是不行。
于是这个课题就变成,实验室有新来的还有时间的学生,就重复一遍。但一直不成功。
去年年底,遇到一个机灵的本科毕业班学生,我跟他谈起这个课题,他想到了一种可能
,我一听茅塞顿开,于是赶紧让他验证,成功!
现在回想起来,当初的设计是有严重缺陷的,这也是为啥以前别的实验室失败的根本原
因。
不知道原因的时候,总感觉是玄学,一旦知道原因,豁然开朗。等过几天国内都上班后
,开始干。
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