由买买提看人间百态

boards

本页内容为未名空间相应帖子的节选和存档,一周内的贴子最多显示50字,超过一周显示500字 访问原贴
Biology版 - 我无意中搞出个大肠杆菌,8小时就能长成不小的菌落
相关主题
[合集] 为什么转化后的菌落,提不出质粒DNA【长段colony PCR】用什么酶?
请教:35 kb及以上的质粒化学转化法导入普通大肠杆菌菌株是否可行?大家交流一下作大载体的经验吧。
请推荐可以形成生物膜的大肠杆菌菌株,多谢!克隆失败了
colony PCR 牛人过来指点下有电穿孔装染bac的吗
再问gateway cloninghelp!dam methylation
农杆菌电击转化关于带研究菌株回国的问题
求助,单酶切连接全部反向怎么办?急求!!!QuikChange,没有colony,咋办?
Yeast Colony PCR protocol博士后方向挣扎中,想听听大家建议
相关话题的讨论汇总
话题: 菌落话题: 小时话题: 菌株话题: 早上话题: dna
进入Biology版参与讨论
1 (共1页)
i**n
发帖数: 283
1
有商用前景不?我觉得还是有点用的。 想想早上9点来,做转化。 下班的时候就可以
做 colony PCR, 或者上液体培养基过夜培养,第二天早上就可以 mini-prep. 用这个
菌株,悲催的生物研究生也能早几天毕业。
b******n
发帖数: 4225
2
NEB已经有商品化的fast growing turbo
visible colonies 6.5 hours after transformation
Isolate DNA after 4 hours of growth from a single overnight colony
http://www.neb.com/nebecomm/products/productC2984.asp

【在 i**n 的大作中提到】
: 有商用前景不?我觉得还是有点用的。 想想早上9点来,做转化。 下班的时候就可以
: 做 colony PCR, 或者上液体培养基过夜培养,第二天早上就可以 mini-prep. 用这个
: 菌株,悲催的生物研究生也能早几天毕业。

s******a
发帖数: 472
3
商业意思真敏锐

【在 i**n 的大作中提到】
: 有商用前景不?我觉得还是有点用的。 想想早上9点来,做转化。 下班的时候就可以
: 做 colony PCR, 或者上液体培养基过夜培养,第二天早上就可以 mini-prep. 用这个
: 菌株,悲催的生物研究生也能早几天毕业。

m*******n
发帖数: 387
4
这个买回来后
可以自己amplify,自己做competent cell吗?

【在 b******n 的大作中提到】
: NEB已经有商品化的fast growing turbo
: visible colonies 6.5 hours after transformation
: Isolate DNA after 4 hours of growth from a single overnight colony
: http://www.neb.com/nebecomm/products/productC2984.asp

C*******e
发帖数: 4348
5
这个不知道版上有没有人试过
当年刚出来的时候我们实验室试过
一般般

【在 b******n 的大作中提到】
: NEB已经有商品化的fast growing turbo
: visible colonies 6.5 hours after transformation
: Isolate DNA after 4 hours of growth from a single overnight colony
: http://www.neb.com/nebecomm/products/productC2984.asp

b******n
发帖数: 4225
6
我们实验室合作者提供了这个菌株的衍生菌株
用来表达蛋白,但是咱们还没试过

【在 C*******e 的大作中提到】
: 这个不知道版上有没有人试过
: 当年刚出来的时候我们实验室试过
: 一般般

b******n
发帖数: 4225
7
可以试试看,我觉得应该没什么问题
关键是感受态制备方法

【在 m*******n 的大作中提到】
: 这个买回来后
: 可以自己amplify,自己做competent cell吗?

d******1
发帖数: 709
8
10几年前就试过类似的菌株,而且克隆,表达一起用。
s********8
发帖数: 619
9
早就有了,MACH1 cells, 忘了是那个公司的了,不过invitrogen的gateway system就推
荐用这个,我给我们实验室做了很多感受态细胞,还挺好用的,八个小时可以挑菌.
d**l
发帖数: 1546
10
本来8小时就可以有可见菌落。 比如top10, DH5a

【在 i**n 的大作中提到】
: 有商用前景不?我觉得还是有点用的。 想想早上9点来,做转化。 下班的时候就可以
: 做 colony PCR, 或者上液体培养基过夜培养,第二天早上就可以 mini-prep. 用这个
: 菌株,悲催的生物研究生也能早几天毕业。

相关主题
农杆菌电击转化【长段colony PCR】用什么酶?
求助,单酶切连接全部反向怎么办?急求!!!大家交流一下作大载体的经验吧。
Yeast Colony PCR protocol克隆失败了
进入Biology版参与讨论
d**l
发帖数: 1546
11
自己试试就知道了。 不信拉倒

【在 i**n 的大作中提到】
: 有商用前景不?我觉得还是有点用的。 想想早上9点来,做转化。 下班的时候就可以
: 做 colony PCR, 或者上液体培养基过夜培养,第二天早上就可以 mini-prep. 用这个
: 菌株,悲催的生物研究生也能早几天毕业。

i**n
发帖数: 283
12
Top 10 8个小时够呛吧?这个8小时菌落比top 10 12个小时的大多了
这个本身来源于 top 10. 简单的遗传操作,就长得巨快。机理未名。
貌似可以通过类似操作,可能让其它菌种也这样。
无图无真相啊。上图。 BTW,这个是 15个小时的菌落。

【在 d**l 的大作中提到】
: 本来8小时就可以有可见菌落。 比如top10, DH5a
i**n
发帖数: 283
13
在俩个不同的菌株上重复出来同样的结果。 应该和一小段 DNA 有关。 具体的机制不
清楚。 但是有很好的线索。 研究起来不是很难。
我不是搞细菌的,就是这个比较好玩。 想问问大家的意见。 值得用业余时间追下去不?

【在 i**n 的大作中提到】
: Top 10 8个小时够呛吧?这个8小时菌落比top 10 12个小时的大多了
: 这个本身来源于 top 10. 简单的遗传操作,就长得巨快。机理未名。
: 貌似可以通过类似操作,可能让其它菌种也这样。
: 无图无真相啊。上图。 BTW,这个是 15个小时的菌落。

i**n
发帖数: 283
14
另外 top 10 长得实在不能算快的。 DH10B是我用过的长得最快的。 应该比Top10快一
些。

【在 d**l 的大作中提到】
: 本来8小时就可以有可见菌落。 比如top10, DH5a
d**l
发帖数: 1546
15
15个小时够overnight了, 长出来不奇怪。
我以前都是早上到实验室第一件事就做transformation,然后涂板, 然后下班的时候
就可以挑菌落摇过夜。

【在 i**n 的大作中提到】
: Top 10 8个小时够呛吧?这个8小时菌落比top 10 12个小时的大多了
: 这个本身来源于 top 10. 简单的遗传操作,就长得巨快。机理未名。
: 貌似可以通过类似操作,可能让其它菌种也这样。
: 无图无真相啊。上图。 BTW,这个是 15个小时的菌落。

i**n
发帖数: 283
16
我是拿出来比较一下菌落大小的。 你要看8小时的话,这个是8小时的。板子涂的不好
,但是结果应该很清楚。 top 10 8小时在左边,这个突变体在右边。 这个菌株,8小
时的菌落大小和top 10 14 小时的差不多。

【在 d**l 的大作中提到】
: 15个小时够overnight了, 长出来不奇怪。
: 我以前都是早上到实验室第一件事就做transformation,然后涂板, 然后下班的时候
: 就可以挑菌落摇过夜。

h**********r
发帖数: 671
17
如果把你这个NB的DNA,转到NEB的那个长的快的菌里面,会怎么样?会不会吃顿饭的功
夫就长好了?
另外,top10有时也挺招人烦的。早上做转化吧,得熬夜挑克隆。下午想做完转化早点
回家,第二天早上一不小心又出卫星菌落了。上午挑完克隆摇菌,晚上又得熬夜提质粒
酶切跑电泳。
有时为了省个一天半天的真是累死人。
b****r
发帖数: 17995
18
我觉得说不定能卖个几万刀,别让人知道了,啥时候有好机会自己去申请个专利
不过你还是要先和那几个最快的商业菌做几个titer严格比较一下

【在 i**n 的大作中提到】
: 有商用前景不?我觉得还是有点用的。 想想早上9点来,做转化。 下班的时候就可以
: 做 colony PCR, 或者上液体培养基过夜培养,第二天早上就可以 mini-prep. 用这个
: 菌株,悲催的生物研究生也能早几天毕业。

a*******a
发帖数: 4233
19
TG1 我已经用了6年了。
8小时长出克隆, 4小时摇出菌
h******e
发帖数: 44
20
MachT1本来就说长得快。
长得快的一般都是细胞壁有点突变,对amp敏感程度比较低,一般也只有amp有效,无抗
或者换别的抗生素都没效的。你试试MachT1上kana板,和DH5a长一样慢。
相关主题
有电穿孔装染bac的吗QuikChange,没有colony,咋办?
help!dam methylation博士后方向挣扎中,想听听大家建议
关于带研究菌株回国的问题Re: 有没有人碰到过转质粒入BL21PlysS效率很低的情况?
进入Biology版参与讨论
i**n
发帖数: 283
21
这个,貌似和AMP无关。 上面的 LB plate 是没有任何抗生素的。

【在 h******e 的大作中提到】
: MachT1本来就说长得快。
: 长得快的一般都是细胞壁有点突变,对amp敏感程度比较低,一般也只有amp有效,无抗
: 或者换别的抗生素都没效的。你试试MachT1上kana板,和DH5a长一样慢。

h******e
发帖数: 44
22
ei,amp无关的话好像很好玩。可以试试各种抗生素,一般就能看到是依赖于哪条基础
通路了,也有可能是新的原理。
m*****z
发帖数: 1451
23
说实话,我想要长得慢的,最好前一天5点接菌,第二天早上10点才长好。
多好啊,不怕摇过了,质粒都丢了。

【在 i**n 的大作中提到】
: 有商用前景不?我觉得还是有点用的。 想想早上9点来,做转化。 下班的时候就可以
: 做 colony PCR, 或者上液体培养基过夜培养,第二天早上就可以 mini-prep. 用这个
: 菌株,悲催的生物研究生也能早几天毕业。

1 (共1页)
进入Biology版参与讨论
相关主题
博士后方向挣扎中,想听听大家建议再问gateway cloning
Re: 有没有人碰到过转质粒入BL21PlysS效率很低的情况?农杆菌电击转化
我是不是吃饱了撑的?求助,单酶切连接全部反向怎么办?急求!!!
请问大肠杆菌为什么是微生物的模式生物?Yeast Colony PCR protocol
[合集] 为什么转化后的菌落,提不出质粒DNA【长段colony PCR】用什么酶?
请教:35 kb及以上的质粒化学转化法导入普通大肠杆菌菌株是否可行?大家交流一下作大载体的经验吧。
请推荐可以形成生物膜的大肠杆菌菌株,多谢!克隆失败了
colony PCR 牛人过来指点下有电穿孔装染bac的吗
相关话题的讨论汇总
话题: 菌落话题: 小时话题: 菌株话题: 早上话题: dna