a*****i
发帖数: 2108 | 1 还有Feng Zhang和doudna的矛盾？不得不说CAS9这玩意儿确实好用，亲身体验啊，感觉
又是个诺奖大热。 |
T*G
发帖数: 600 | 2 和大火的cell-based therapy 结合上能上临床效果不错的话，诺奖没得跑。feng
zhang我没见过，karl party时见过几次，对FZ当年工作推崇有加，一个人在不同的地
方能repeat自己的成功，尤其是生物领域，是很不容易的
【在 a*****i 的大作中提到】
: 还有Feng Zhang和doudna的矛盾？不得不说CAS9这玩意儿确实好用，亲身体验啊，感觉
: 又是个诺奖大热。
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b*****n
发帖数: 34 | 3 Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
有前辈能点评一下其他可能的途径吗? |
r******g
发帖数: 600 | 4 真是牛人，从来没想过这个问题
你说的完全对！ 体外扩增CD8 细胞是可以实现的～ 所以，这个办法可靠~ 不知道敲掉
HLA难度有多大了
【在 b*****n 的大作中提到】
: Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
: 我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
: 独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
: 有前辈能点评一下其他可能的途径吗?
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K**4
发帖数: 1015 | 5 平心而论，Crispr的最初几次突破，包括98年，02年，05，06年的工作奠定了分子基
础，而zhang feng进入这个领域实在太晚了。
【在 a*****i 的大作中提到】
: 还有Feng Zhang和doudna的矛盾？不得不说CAS9这玩意儿确实好用，亲身体验啊，感觉
: 又是个诺奖大热。
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z*t
发帖数: 863 | 6 不是做免疫的，这么做的风险性如何？
【在 b*****n 的大作中提到】
: Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
: 我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
: 独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
: 有前辈能点评一下其他可能的途径吗?
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w***r
发帖数: 709 | 7 Reversible epigenetic down-regulation of MHC molecules by devil facial
tumour disease illustrates immune escape by a contagious cancer.
防止癌化?
【在 z*t 的大作中提到】
: 不是做免疫的，这么做的风险性如何？
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z*t
发帖数: 863 | 8 嗯，而且我觉得你TCR要没了，怎么调节这些进入体内非自体的t细胞呢？要是t细胞短
期起作用倒还好关键是你这细胞要长期在体内存在？
【在 w***r 的大作中提到】
: Reversible epigenetic down-regulation of MHC molecules by devil facial
: tumour disease illustrates immune escape by a contagious cancer.
: 防止癌化?
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b*****n
发帖数: 34 | 9
CD19CAR 体外扩增以后在体内主要是靠B细胞激活的
肿瘤杀完自然就降低 留了记忆性的细胞在体内 所以可以长期控制复发
当然加一个suicide gene会更保险
【在 z*t 的大作中提到】
: 嗯，而且我觉得你TCR要没了，怎么调节这些进入体内非自体的t细胞呢？要是t细胞短
: 期起作用倒还好关键是你这细胞要长期在体内存在？
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z*t
发帖数: 863 | 10 不过TCR没有了残留下来的T cell activation 是不是就不好使了？
但是用Crispr screening来找增强肿瘤免疫的分子倒是可以，记得之前nature上有一篇
类似的in vivo screen的paper
【在 b*****n 的大作中提到】
:
: CD19CAR 体外扩增以后在体内主要是靠B细胞激活的
: 肿瘤杀完自然就降低 留了记忆性的细胞在体内 所以可以长期控制复发
: 当然加一个suicide gene会更保险
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b*****n
发帖数: 34 | 11 另一个方案可以敲掉checkpoint比如PD1,这样可以特定的增强CD19CAR的杀伤能力。
对，那篇文章针对的是实体瘤,敲掉这些基因应该会很有帮助。不过对于血液瘤，
CD19CAR已经可以体内扩增，而且现在80%以上的患者都有反应，存活率也很高。我个人
感觉现在诺华的问题主要是怎么降低成本，实现量产的问题。
【在 z*t 的大作中提到】
: 不过TCR没有了残留下来的T cell activation 是不是就不好使了？
: 但是用Crispr screening来找增强肿瘤免疫的分子倒是可以，记得之前nature上有一篇
: 类似的in vivo screen的paper
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x******3
发帖数: 111 | |
a*****i
发帖数: 2108 | 13 好多大牛啊！本人做工程的，用yeast。自从用了这个以后，真是啥都能干啊，缺失，
整合，定点诱变，以前那些经典方法全都不用了。而且最牛X的是，这玩意效率太高啊
，缺失整合诱变啥的基本都是接近100%positive rate……我这生物做了这么多年，唯
一见过的最没水分实打实的研究成果就是这个了…… |
w***r
发帖数: 709 | 14 你是在yeast里用crispr？
【在 a*****i 的大作中提到】
: 好多大牛啊！本人做工程的，用yeast。自从用了这个以后，真是啥都能干啊，缺失，
: 整合，定点诱变，以前那些经典方法全都不用了。而且最牛X的是，这玩意效率太高啊
: ，缺失整合诱变啥的基本都是接近100%positive rate……我这生物做了这么多年，唯
: 一见过的最没水分实打实的研究成果就是这个了……
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a*****i
发帖数: 2108 | 15 嗯是的。我们实验室在这块算是走在前面的了。算是赌对了。
【在 w***r 的大作中提到】
: 你是在yeast里用crispr？
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w***r
发帖数: 709 | 16 用yeast 能做啥工程，应用方向？
【在 a*****i 的大作中提到】
: 嗯是的。我们实验室在这块算是走在前面的了。算是赌对了。
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a*****i
发帖数: 2108 | 17 对的
【在 w***r 的大作中提到】
: 用yeast 能做啥工程，应用方向？
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b****r
发帖数: 17995 | 18 敲掉MHC I的话会被自体的其他细胞识别认为是异体细胞攻击吧。同种异体移植的排斥
反应我记得就是基于这个。
这个思路这么直接怎么可能没人想过试过
【在 b*****n 的大作中提到】
: Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
: 我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
: 独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
: 有前辈能点评一下其他可能的途径吗?
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n**e
发帖数: 574 | 19 敲掉pd1,ctla4是比较现实的选择。
对于实体瘤，关键还是抗原怎么选。
【在 b*****n 的大作中提到】
: Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
: 我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
: 独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
: 有前辈能点评一下其他可能的途径吗?
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m****a
发帖数: 270 | 20 感觉Feng Zhang就是个做技术的工匠，不管是开始的optogenetics，还是后来的TALEN
，最近的CRISPR，他都是在改进和实现技术。即使拿不了诺贝尔，他还是做出了非常大
的贡献的。 |
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c********e
发帖数: 598 | 21
精确敲掉primary T cells不容易的吧。
【在 n**e 的大作中提到】
: 敲掉pd1,ctla4是比较现实的选择。
: 对于实体瘤，关键还是抗原怎么选。
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a*****i
发帖数: 2108 | 22 还有Feng Zhang和doudna的矛盾？不得不说CAS9这玩意儿确实好用，亲身体验啊，感觉
又是个诺奖大热。 |
T*G
发帖数: 600 | 23 和大火的cell-based therapy 结合上能上临床效果不错的话，诺奖没得跑。feng
zhang我没见过，karl party时见过几次，对FZ当年工作推崇有加，一个人在不同的地
方能repeat自己的成功，尤其是生物领域，是很不容易的
【在 a*****i 的大作中提到】
: 还有Feng Zhang和doudna的矛盾？不得不说CAS9这玩意儿确实好用，亲身体验啊，感觉
: 又是个诺奖大热。
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b*****n
发帖数: 34 | 24 Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
有前辈能点评一下其他可能的途径吗? |
r******g
发帖数: 600 | 25 真是牛人，从来没想过这个问题
你说的完全对！ 体外扩增CD8 细胞是可以实现的～ 所以，这个办法可靠~ 不知道敲掉
HLA难度有多大了
【在 b*****n 的大作中提到】
: Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
: 我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
: 独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
: 有前辈能点评一下其他可能的途径吗?
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K**4
发帖数: 1015 | 26 平心而论，Crispr的最初几次突破，包括98年，02年，05，06年的工作奠定了分子基
础，而zhang feng进入这个领域实在太晚了。
【在 a*****i 的大作中提到】
: 还有Feng Zhang和doudna的矛盾？不得不说CAS9这玩意儿确实好用，亲身体验啊，感觉
: 又是个诺奖大热。
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z*t
发帖数: 863 | 27 不是做免疫的，这么做的风险性如何？
【在 b*****n 的大作中提到】
: Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
: 我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
: 独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
: 有前辈能点评一下其他可能的途径吗?
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w***r
发帖数: 709 | 28 Reversible epigenetic down-regulation of MHC molecules by devil facial
tumour disease illustrates immune escape by a contagious cancer.
防止癌化?
【在 z*t 的大作中提到】
: 不是做免疫的，这么做的风险性如何？
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z*t
发帖数: 863 | 29 嗯，而且我觉得你TCR要没了，怎么调节这些进入体内非自体的t细胞呢？要是t细胞短
期起作用倒还好关键是你这细胞要长期在体内存在？
【在 w***r 的大作中提到】
: Reversible epigenetic down-regulation of MHC molecules by devil facial
: tumour disease illustrates immune escape by a contagious cancer.
: 防止癌化?
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b*****n
发帖数: 34 | 30
CD19CAR 体外扩增以后在体内主要是靠B细胞激活的
肿瘤杀完自然就降低 留了记忆性的细胞在体内 所以可以长期控制复发
当然加一个suicide gene会更保险
【在 z*t 的大作中提到】
: 嗯，而且我觉得你TCR要没了，怎么调节这些进入体内非自体的t细胞呢？要是t细胞短
: 期起作用倒还好关键是你这细胞要长期在体内存在？
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z*t
发帖数: 863 | 31 不过TCR没有了残留下来的T cell activation 是不是就不好使了？
但是用Crispr screening来找增强肿瘤免疫的分子倒是可以，记得之前nature上有一篇
类似的in vivo screen的paper
【在 b*****n 的大作中提到】
:
: CD19CAR 体外扩增以后在体内主要是靠B细胞激活的
: 肿瘤杀完自然就降低 留了记忆性的细胞在体内 所以可以长期控制复发
: 当然加一个suicide gene会更保险
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b*****n
发帖数: 34 | 32 另一个方案可以敲掉checkpoint比如PD1,这样可以特定的增强CD19CAR的杀伤能力。
对，那篇文章针对的是实体瘤,敲掉这些基因应该会很有帮助。不过对于血液瘤，
CD19CAR已经可以体内扩增，而且现在80%以上的患者都有反应，存活率也很高。我个人
感觉现在诺华的问题主要是怎么降低成本，实现量产的问题。
【在 z*t 的大作中提到】
: 不过TCR没有了残留下来的T cell activation 是不是就不好使了？
: 但是用Crispr screening来找增强肿瘤免疫的分子倒是可以，记得之前nature上有一篇
: 类似的in vivo screen的paper
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x******3
发帖数: 111 | |
a*****i
发帖数: 2108 | 34 好多大牛啊！本人做工程的，用yeast。自从用了这个以后，真是啥都能干啊，缺失，
整合，定点诱变，以前那些经典方法全都不用了。而且最牛X的是，这玩意效率太高啊
，缺失整合诱变啥的基本都是接近100%positive rate……我这生物做了这么多年，唯
一见过的最没水分实打实的研究成果就是这个了…… |
w***r
发帖数: 709 | 35 你是在yeast里用crispr？
【在 a*****i 的大作中提到】
: 好多大牛啊！本人做工程的，用yeast。自从用了这个以后，真是啥都能干啊，缺失，
: 整合，定点诱变，以前那些经典方法全都不用了。而且最牛X的是，这玩意效率太高啊
: ，缺失整合诱变啥的基本都是接近100%positive rate……我这生物做了这么多年，唯
: 一见过的最没水分实打实的研究成果就是这个了……
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a*****i
发帖数: 2108 | 36 嗯是的。我们实验室在这块算是走在前面的了。算是赌对了。
【在 w***r 的大作中提到】
: 你是在yeast里用crispr？
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w***r
发帖数: 709 | 37 用yeast 能做啥工程，应用方向？
【在 a*****i 的大作中提到】
: 嗯是的。我们实验室在这块算是走在前面的了。算是赌对了。
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a*****i
发帖数: 2108 | 38 对的
【在 w***r 的大作中提到】
: 用yeast 能做啥工程，应用方向？
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b****r
发帖数: 17995 | 39 敲掉MHC I的话会被自体的其他细胞识别认为是异体细胞攻击吧。同种异体移植的排斥
反应我记得就是基于这个。
这个思路这么直接怎么可能没人想过试过
【在 b*****n 的大作中提到】
: Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
: 我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
: 独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
: 有前辈能点评一下其他可能的途径吗?
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n**e
发帖数: 574 | 40 敲掉pd1,ctla4是比较现实的选择。
对于实体瘤，关键还是抗原怎么选。
【在 b*****n 的大作中提到】
: Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
: 我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
: 独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
: 有前辈能点评一下其他可能的途径吗?
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m****a
发帖数: 270 | 41 感觉Feng Zhang就是个做技术的工匠，不管是开始的optogenetics，还是后来的TALEN
，最近的CRISPR，他都是在改进和实现技术。即使拿不了诺贝尔，他还是做出了非常大
的贡献的。 |
c********e
发帖数: 598 | 42
精确敲掉primary T cells不容易的吧。
【在 n**e 的大作中提到】
: 敲掉pd1,ctla4是比较现实的选择。
: 对于实体瘤，关键还是抗原怎么选。
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j****n
发帖数: 3370 | 43 赞 同做yeast 偏应用
比如一把敲掉10个基因
一把整合100个copy到基因组上
随机ko库 转录激活库等
虽然idea不新 可以做的或者用到的地方 还真不少
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.7
【在 a*****i 的大作中提到】
: 好多大牛啊！本人做工程的，用yeast。自从用了这个以后，真是啥都能干啊，缺失，
: 整合，定点诱变，以前那些经典方法全都不用了。而且最牛X的是，这玩意效率太高啊
: ，缺失整合诱变啥的基本都是接近100%positive rate……我这生物做了这么多年，唯
: 一见过的最没水分实打实的研究成果就是这个了……
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n**e
发帖数: 574 | 44 可以先分离细胞再敲吧。
【在 c********e 的大作中提到】
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: 精确敲掉primary T cells不容易的吧。
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w*********d
发帖数: 82 | 45 我怎么没有你们那么幸运？用在人的THP1上，成功率很低呀? GFP sorting 后得到的细
胞，提出DNA后测序，几乎没有阳性的。
各位可以给些指导吗？
我用的是Sigma的系统。
多谢了！ |
