r******k 发帖数: 446 | |
s*******1 发帖数: 188 | 2 这样的结果根本不能信,抗体非特异结合是很难说的,仅仅看公司的result是不对的,
一定要自己亲自做一下,即使是只有一条带,也不要把很多抗体放在一起,未知因素还
有很多。
多跑几个western什么都有了 |
b*****s 发帖数: 169 | 3 能剪开的剪开分开做,二抗一样的话也可不剪开,但前提是你对这些抗体的特异、非特
异性条带心中有数,尤其是CoIP的样品。 |
s******s 发帖数: 13035 | 4 一抗物种不一样可以,一样的,除非是你用的很熟悉的抗体才行,而且结果
你自己信,给别人解释别人肯定让你重做
【在 r******k 的大作中提到】 : 感觉每次加一个好麻烦 也不想剪开
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e****s 发帖数: 1125 | 5 有人这么做。
比如目标蛋白分得比较开的情况。最大的潜在问题是一个信号太强,另一个太弱。所以
,调整下抗体浓度是有必要的。但感觉得不偿失。
【在 r******k 的大作中提到】 : 感觉每次加一个好麻烦 也不想剪开
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r******k 发帖数: 446 | |
s*****g 发帖数: 7857 | 7 俺这么做过。但是要分子量相差大点,带之间才没有干扰。不是每种都行的。而且但一
每个抗体背景要好。
目前我最多的是PARP 和caspase-3混用可以。
p-AKT最好不要和其他抗体混用。 |