g*********y
发帖数: 69 | 1 大家是怎么解决普通商用细胞系yeast污染问题的？
我每次都加fungizone，从100ul/10ml(DMEM, 10%FBS)，到200ul/10ml。现在已经第三
代了（1：10 split)，还是看得到yeast。 |
f*********g
发帖数: 958 | |
g*********y
发帖数: 69 | 3 谢谢。明天给老板推荐一下。
【在 f*********g 的大作中提到】
: Primocin™
: http://www.invivogen.com/primocin
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s******y
发帖数: 28562 | 4 不要和酵母斗争。直接把细胞都扔了， 消毒培养箱，重新买新的细胞系。
【在 g*********y 的大作中提到】
: 大家是怎么解决普通商用细胞系yeast污染问题的？
: 我每次都加fungizone，从100ul/10ml(DMEM, 10%FBS)，到200ul/10ml。现在已经第三
: 代了（1：10 split)，还是看得到yeast。
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s********x
发帖数: 472 | 5 一招很的，limiting dilution后挑单克隆细胞。 |
s**2
发帖数: 1287 | 6 most likely not gonna work. yeasts easily out-grow your mammalian cells.
【在 s********x 的大作中提到】
: 一招很的，limiting dilution后挑单克隆细胞。
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s**2
发帖数: 1287 | 7 2nd this
【在 s******y 的大作中提到】
: 不要和酵母斗争。直接把细胞都扔了， 消毒培养箱，重新买新的细胞系。
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g*********y
发帖数: 69 | 8 今天直接把培养皿扔了。液氮里冻着的那一大盒等老板自己扔。
【在 s******y 的大作中提到】
: 不要和酵母斗争。直接把细胞都扔了， 消毒培养箱，重新买新的细胞系。
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s******y
发帖数: 28562 | 9 作的对。不要把有限的生命投入无限的和酵母的战斗。
不过，你确定肯定是酵母感染么？对于没有经验的人，有可能会把Mycoplasma感染造成
细胞死亡的碎片错看成酵母。
最简单的办法是把你们培养过细胞的培养液直接涂在YPD 板上，看看能长出什么样的东
西来。细菌，霉菌，酵母，都能在YPD 板上长，Mycoplasma不能。
如果是Mycoplasma，或者酵母，或者霉菌，这些东西绝对会没完没了，阴魂不
散。最简单的办法就是把感染了的细胞全部扔了买新的。
如果是霉菌或者酵母，你们的培养箱必须拆了把内壁全部高温消毒两次（一定要两次，
因为包子一次是蒸不熟的）。箱内循环风扇啥的全部扔了换新的。
如果嫌麻烦而且老板有钱的话，直接把培养箱扔了买个新的。
液氮罐最好把液氮都化掉，然后清洗晾干后再使用。因为酵母，霉菌，和Mycoplasma是
可以通过液氮从一个管传到另外一个管的。
【在 g*********y 的大作中提到】
: 今天直接把培养皿扔了。液氮里冻着的那一大盒等老板自己扔。
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s******s
发帖数: 13035 | 10 就算能把酵母灭掉，用了这么多药处理，你的细胞也不知道变成什么不可逆的状态了
【在 s******y 的大作中提到】
: 作的对。不要把有限的生命投入无限的和酵母的战斗。
: 不过，你确定肯定是酵母感染么？对于没有经验的人，有可能会把Mycoplasma感染造成
: 细胞死亡的碎片错看成酵母。
: 最简单的办法是把你们培养过细胞的培养液直接涂在YPD 板上，看看能长出什么样的东
: 西来。细菌，霉菌，酵母，都能在YPD 板上长，Mycoplasma不能。
: 如果是Mycoplasma，或者酵母，或者霉菌，这些东西绝对会没完没了，阴魂不
: 散。最简单的办法就是把感染了的细胞全部扔了买新的。
: 如果是霉菌或者酵母，你们的培养箱必须拆了把内壁全部高温消毒两次（一定要两次，
: 因为包子一次是蒸不熟的）。箱内循环风扇啥的全部扔了换新的。
: 如果嫌麻烦而且老板有钱的话，直接把培养箱扔了买个新的。
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r******g
发帖数: 600 | 11 我们实验室之前出现过一次～ 把所用东西全部扔了，还是不管用！ 最后过了一个月，
发现biosafety cabinet (hood)检查没通过，修好以后再没出现过了 |
g*********y
发帖数: 69 | 12 没想到sunnyday MM战斗经历这么丰富！学习了。我养细胞时间不长，很多都在慢慢摸
索。我在40X下可以看到一种椭圆形的生物，很薄，像一片树叶，或者鞋底，一边扭动
翻转，一边前进。
【在 s******y 的大作中提到】
: 作的对。不要把有限的生命投入无限的和酵母的战斗。
: 不过，你确定肯定是酵母感染么？对于没有经验的人，有可能会把Mycoplasma感染造成
: 细胞死亡的碎片错看成酵母。
: 最简单的办法是把你们培养过细胞的培养液直接涂在YPD 板上，看看能长出什么样的东
: 西来。细菌，霉菌，酵母，都能在YPD 板上长，Mycoplasma不能。
: 如果是Mycoplasma，或者酵母，或者霉菌，这些东西绝对会没完没了，阴魂不
: 散。最简单的办法就是把感染了的细胞全部扔了买新的。
: 如果是霉菌或者酵母，你们的培养箱必须拆了把内壁全部高温消毒两次（一定要两次，
: 因为包子一次是蒸不熟的）。箱内循环风扇啥的全部扔了换新的。
: 如果嫌麻烦而且老板有钱的话，直接把培养箱扔了买个新的。
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s******y
发帖数: 28562 | 13 你看到的应该不是酵母。酵母是圆滚滚的圆球状的或者椭圆球状的，本身没有运动能力
。而且绝大部分种类的酵母小得很，在40倍镜头下不可能看到那么多的结构细节。
你看到的那个更象是什么细胞寄生虫，听你的描述中推测的大小和形状看来，弄不好是
toxoplasma gondii.
这个东西会感染人体的，注意处理细胞的时候一定要戴好眼镜保护眼睛（因为这东西会
穿透眼睛的黏膜）。我的建议是立刻把所有细胞都扔到消毒袋里高温处理再扔掉。
另外，不要乱叫MM, 我是个中年胖大叔。
【在 g*********y 的大作中提到】
: 没想到sunnyday MM战斗经历这么丰富！学习了。我养细胞时间不长，很多都在慢慢摸
: 索。我在40X下可以看到一种椭圆形的生物，很薄，像一片树叶，或者鞋底，一边扭动
: 翻转，一边前进。
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g*********y
发帖数: 69 | 14 谢谢分享。有点像。
不好意思，原来此sunnyday非彼sunnyday（艳阳天）。
【在 s******y 的大作中提到】
: 你看到的应该不是酵母。酵母是圆滚滚的圆球状的或者椭圆球状的，本身没有运动能力
: 。而且绝大部分种类的酵母小得很，在40倍镜头下不可能看到那么多的结构细节。
: 你看到的那个更象是什么细胞寄生虫，听你的描述中推测的大小和形状看来，弄不好是
: toxoplasma gondii.
: 这个东西会感染人体的，注意处理细胞的时候一定要戴好眼镜保护眼睛（因为这东西会
: 穿透眼睛的黏膜）。我的建议是立刻把所有细胞都扔到消毒袋里高温处理再扔掉。
: 另外，不要乱叫MM, 我是个中年胖大叔。
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