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Biology版 - 11kb gene 5'RACE
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S*********e
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1
I am dealing with a gene with incomplete 5' CDS. 5.5kb 3' CDS already known.
Need to RACE 5' end (~5kb left). Does anyone have a good kit to recommend
for long cDNA synthesis and 5'RACE? many thanks,
S*********e
发帖数: 127
2
re
Z******5
发帖数: 435
3
用invitrogen的这个kit
5' RACE System for Rapid Amplification of cDNA Ends, version 2.0
说明书上说貌似50min反转录4kb没问题。 我之前做大约10kb的,反转录2个小时,结果
很好。 不过我那个基因表达丰度非常高。如果表达丰度很低的,不知道效果会如何。
另外,建议在预测的TSS后面1-2kb的地方同时设计一个引物做5'RACE, 看看和你从
11kb的位置拉出来的是不是同一个起始位点。
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