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Biology版 - 有没有保留原有启动子,通过增强子之类提高蛋白表达的方法?
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m***7
发帖数: 62
1
我的目的蛋白内源表达太弱,很难检测到。希望能在不改变表达特异性的基础上,提高
蛋白的表达量。
请问有什么比较通用的方法么?尤其可以用到老鼠身上做knockin的。
谢谢!
m******5
发帖数: 1383
2
既然要做knock in,别动启动子了,在protein CDS 上加tag!

【在 m***7 的大作中提到】
: 我的目的蛋白内源表达太弱,很难检测到。希望能在不改变表达特异性的基础上,提高
: 蛋白的表达量。
: 请问有什么比较通用的方法么?尤其可以用到老鼠身上做knockin的。
: 谢谢!

n***w
发帖数: 2405
3
加了tag怎么提高表达效率?

【在 m******5 的大作中提到】
: 既然要做knock in,别动启动子了,在protein CDS 上加tag!
s******s
发帖数: 13035
4
不知道怎么增加表达,不过有时候加tag增加稳定性。
小鼠的不知道,普通细胞转点BAC,或者查查有没有高活性的突变knock in?

【在 n***w 的大作中提到】
: 加了tag怎么提高表达效率?
m******5
发帖数: 1383
5
他的目的是监测到蛋白,不是提高表达。

【在 n***w 的大作中提到】
: 加了tag怎么提高表达效率?
h**********r
发帖数: 671
6
yeast里有很多这样的例子,都是牛人们看不上眼的小paper:(
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22565375
其实Alper是metabolic engineering的真牛人
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