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Biology版 - Immunohistochemistry 只用有荧光标记的一抗效果怎样?
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a*****3
发帖数: 565
1
我很久以前做过IHC,但也做得不多,那时我们都是用一抗加二抗做的,现在的老板
喜欢直接用荧光标记的一抗,不知道这样做出来效果和加二抗哪个好?我没做过直接
加荧光标记的一抗,所以也不清楚哪种效果好,老板说直接用荧光标记的一抗,不加
二抗能减少干扰,但我觉得二抗能放大信号,洗得干净的话不会有很深的背景,谁有
经验的给说说呀,我老板他自己也没什么IHC经验,他以前倒做过Flow Cytometry,那
都是直接用荧光标记的一抗,所以他就说要用荧光标记的一抗直接做。
另外再问一下,做组化是用OCT包埋好还是石蜡好呀?是小鼠脑组织。
s******y
发帖数: 28562
2
直接标记的一抗比较贵,而且信号比较弱,一般仅仅用于某些含量比较高的蛋白以及用
来当辅助定位用。但是如果你老板那么有钱的话,那就直接用一抗吧。

【在 a*****3 的大作中提到】
: 我很久以前做过IHC,但也做得不多,那时我们都是用一抗加二抗做的,现在的老板
: 喜欢直接用荧光标记的一抗,不知道这样做出来效果和加二抗哪个好?我没做过直接
: 加荧光标记的一抗,所以也不清楚哪种效果好,老板说直接用荧光标记的一抗,不加
: 二抗能减少干扰,但我觉得二抗能放大信号,洗得干净的话不会有很深的背景,谁有
: 经验的给说说呀,我老板他自己也没什么IHC经验,他以前倒做过Flow Cytometry,那
: 都是直接用荧光标记的一抗,所以他就说要用荧光标记的一抗直接做。
: 另外再问一下,做组化是用OCT包埋好还是石蜡好呀?是小鼠脑组织。

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