y*******o
发帖数: 131 | 1 vector的antigen unmasking solution
Dako 的 citrate antigen retrieve buffer, ph=6
Dako tris/EDTA buffer, PH=9
版上面有高人指点一下么。
我要染 mouse VCAM-1。
查了文献，绝大多数都用frozen section，可我只有石蜡的
谢谢阿 | s******e
发帖数: 370 | 2 antigen retrieval 我做的不是太多，通常是用invitrogen 的20X citrate buffer，
> 95C煮15分钟
LZ不妨一试，再看看有什么需要改进的 | s******y
发帖数: 28562 | 3 It is more complicated than you said.
First, you need to remove the wax by xylene treatment,
then, you need to rehydrate the specimen by a serial concentration of
ethanol and finally the sodium citrate buffer
Then, boil in water
Finally, ready for staining.
I suggest you to obtain the complete protocol from a IHC handbook.
【在 y*******o 的大作中提到】
: vector的antigen unmasking solution
: Dako 的 citrate antigen retrieve buffer, ph=6
: Dako tris/EDTA buffer, PH=9
: 版上面有高人指点一下么。
: 我要染 mouse VCAM-1。
: 查了文献，绝大多数都用frozen section，可我只有石蜡的
: 谢谢阿
| h***a
发帖数: 145 | 4 i make sodium citrate buffer by myself.. works for most antibodies I tried. | P********R
发帖数: 1691 | 5 你得看抗体的datasheet上怎么说的.
【在 y*******o 的大作中提到】
: vector的antigen unmasking solution
: Dako 的 citrate antigen retrieve buffer, ph=6
: Dako tris/EDTA buffer, PH=9
: 版上面有高人指点一下么。
: 我要染 mouse VCAM-1。
: 查了文献，绝大多数都用frozen section，可我只有石蜡的
: 谢谢阿
| y***u
发帖数: 1467 | 6 每个抗体是不一样的，有的抗体不需要antigent unmasking,有的用EDTA，有的用
citrate buffer。vector 的antigen unmasking solution 好像是citrate buffer （
这个你也可以自己配）。你可以查查抗体的说明上有没有相应的信息，或是看看其他人
用这个抗体用的是什么类型的buffer。都没有信息的话，就自己拿几个片子做预实验了。
我觉得跟paraffin 还是cryosetion 关系不大，跟抗体自身关系大。
【在 y*******o 的大作中提到】
: vector的antigen unmasking solution
: Dako 的 citrate antigen retrieve buffer, ph=6
: Dako tris/EDTA buffer, PH=9
: 版上面有高人指点一下么。
: 我要染 mouse VCAM-1。
: 查了文献，绝大多数都用frozen section，可我只有石蜡的
: 谢谢阿
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