x*****o
发帖数: 441 | 1 一种蛋白, 提纯之后refold然后保存在-80, 之前那个人保存的体积很大, 所以已经解冻4次了. 我现在要用这个样品.
反复多次解冻会造成什么问题,是降解还是denature, 还是两者都有? | i***0
发帖数: 160 | 2 If it is an enzyme, each thaw and freeze cycle will reduce its activity. If
IgG or other immunoproteins, you'd better thaw the sample and separate in 20
uL aliquotes. Freeze thaw is not good for most proteins, mostly because it
might disrupt protein folding. | d****u
发帖数: 1553 | 3 我记得我当年学的好像是因为反复冻融，细小冰晶的剪切力会导致大分子蛋白的降解。
同时因为PH的变化也会导致蛋白构象的变化。 | d******1
发帖数: 709 | 4 Freeze–Thaw Cycle is a way to make protein amyloid. | x*****o
发帖数: 441 | 5 这个是沉淀还是形成多聚物的意思？
【在 d******1 的大作中提到】
: Freeze–Thaw Cycle is a way to make protein amyloid.
| d******1
发帖数: 709 | 6 A more recent, biophysical definition is broader, including any polypeptide
which polymerizes to form a cross-beta structure, in vivo, or in vitro. Some
of these, although demonstrably cross-beta sheet, do not show some classic
histopathological characteristics such as the Congo red birefringence.
http://en.wikipedia.org/wiki/Amyloid
【在 x*****o 的大作中提到】
: 这个是沉淀还是形成多聚物的意思？
| D*a
发帖数: 6830 | | x*****o
发帖数: 441 | 8 是前面一个已经走了的人一直在用，解冻了4次，我最近想用，在冰箱里面找出来
，发现已经解冻了好几次了（我们是每解冻一次就在tube上面点个点），现在就是犹豫
要不要继续用。再提纯要花很多时间。
【在 D*a 的大作中提到】
: 前三次解冻的时候就没有想到分成小份？？
| h****n
发帖数: 2552 | |
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