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Biology版 - 请推荐一个lentiviral vector能表达两个gene+shRNA
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话题: shrna话题: gene话题: rtta3话题: lentiviral话题: mice
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h********n
发帖数: 4079
1
高人们能不能推荐一个lentiviral vector, 可以表达两个外来的gene, 比如
luciferase 和 Cre, 同时还能表达一个shRNA?
tyler jacks的那个 UbC.Luciferase.PGK.Cre 好用吗?
谢谢谢谢.
r***e
发帖数: 2539
2
如果用一个promoter,可以用一个2A把两个基因连起来。
他那个情况是必须要两个不同的promoter。

【在 h********n 的大作中提到】
: 高人们能不能推荐一个lentiviral vector, 可以表达两个外来的gene, 比如
: luciferase 和 Cre, 同时还能表达一个shRNA?
: tyler jacks的那个 UbC.Luciferase.PGK.Cre 好用吗?
: 谢谢谢谢.

s******s
发帖数: 13035
3
2A是表达蛋白用的,他那个shrna不适用

【在 r***e 的大作中提到】
: 如果用一个promoter,可以用一个2A把两个基因连起来。
: 他那个情况是必须要两个不同的promoter。

r***e
发帖数: 2539
4
我回答他问题的第一部分,针对Tyler的那个载体。

【在 s******s 的大作中提到】
: 2A是表达蛋白用的,他那个shrna不适用
h********n
发帖数: 4079
5
谢谢.
有啥推荐不?

【在 r***e 的大作中提到】
: 如果用一个promoter,可以用一个2A把两个基因连起来。
: 他那个情况是必须要两个不同的promoter。

l**********1
发帖数: 5204
6
if by GFP not luciferase
you can try CAG (cytomegalovirus (CMV) early enhancer element and chicken
beta-actin) promoter
paper link:
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22378886
Mice strain link:
//jaxmice.jax.org/strain/016532.html
Description
The CAGs-rtTA3 transgene has a CAG (cytomegalovirus (CMV) early enhancer
element and chicken beta-actin) promoter driving widespread expression of
reverse tetracycline-controlled transactivator 3 (rtTA3). High rtTA3
expression is observed in most tissues examined. Mice hemizygous for the
CAGs-rtTA3 transgene are viable and fertile.
When crossed with mice carrying a TRE/tetO promoter-directed gene of
interest, progeny may be treated with doxycycline to initiate conditional
expression.
When crossed with TRE-GFP-shRNAmir (short hairpin microRNA) transgenic mice,
the donating laboratory was able to conditionally regulate RNA interference
(RNAi) with doxycycline with high efficiency and selectively mark gene
knockouts with GFP fluorescence.

【在 h********n 的大作中提到】
: 高人们能不能推荐一个lentiviral vector, 可以表达两个外来的gene, 比如
: luciferase 和 Cre, 同时还能表达一个shRNA?
: tyler jacks的那个 UbC.Luciferase.PGK.Cre 好用吗?
: 谢谢谢谢.

h********n
发帖数: 4079
7
thank you so much. I will read it.

【在 l**********1 的大作中提到】
: if by GFP not luciferase
: you can try CAG (cytomegalovirus (CMV) early enhancer element and chicken
: beta-actin) promoter
: paper link:
: //www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22378886
: Mice strain link:
: //jaxmice.jax.org/strain/016532.html
: Description
: The CAGs-rtTA3 transgene has a CAG (cytomegalovirus (CMV) early enhancer
: element and chicken beta-actin) promoter driving widespread expression of

l**********1
发帖数: 5204
8
De rein.
today just met that pdf file on my Mac downloads folder with largest
file size....

【在 h********n 的大作中提到】
: thank you so much. I will read it.
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