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Biology版 - HEK293细胞中出现了很多空泡,这是怎么回事?
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l**********t
发帖数: 138
1
最近培养293细胞时在显微镜下看到很多空泡样的东西,有没有哪位高手能指点一下这
是怎么回事?
冻的细胞在-80放了有半年,以前都长得挺好的,我现在用的培养基和血清也和以前一
样。不过我们实验室最近从东部搬到了中部,会不会是培养条件改变了?
先谢谢各位了!
r*****s
发帖数: 95
2
传代次数太多,细胞停止分裂了吧

【在 l**********t 的大作中提到】
: 最近培养293细胞时在显微镜下看到很多空泡样的东西,有没有哪位高手能指点一下这
: 是怎么回事?
: 冻的细胞在-80放了有半年,以前都长得挺好的,我现在用的培养基和血清也和以前一
: 样。不过我们实验室最近从东部搬到了中部,会不会是培养条件改变了?
: 先谢谢各位了!

l**********t
发帖数: 138
3
细胞正常增殖,但很容易成团

【在 r*****s 的大作中提到】
: 传代次数太多,细胞停止分裂了吧
l**********t
发帖数: 138
4
真心请教!自己顶一下
a*****x
发帖数: 901
5
细胞被stress了会这样。-80度不能放太久的。应该放液氮。
d***s
发帖数: 1062
6
关注。
我养的phoenix gp也这样,很容易成团。要每天换液才行,我觉得可能是细胞老了。
a*****x
发帖数: 901
7
ER stress 引起autophagy,形成lysosome的vacule。这是最常见的原因。
l**********t
发帖数: 138
8
挺有意思的,那是什么原因导致ER stress 的呢?

【在 a*****x 的大作中提到】
: ER stress 引起autophagy,形成lysosome的vacule。这是最常见的原因。
a*****x
发帖数: 901
9
查ER stress 和 autophagy有很多文献的。这里我认为是-80度放太久引起的。本来-80
度就不能用来长期冻存细胞(一般最长不超过1个月)。
w***a
发帖数: 133
10
stress的话 是不是同时会看到核收缩?

80

【在 a*****x 的大作中提到】
: 查ER stress 和 autophagy有很多文献的。这里我认为是-80度放太久引起的。本来-80
: 度就不能用来长期冻存细胞(一般最长不超过1个月)。

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这样的细胞是怎么回事?
在293T细胞中做CoIP,细胞最多可以培养几天?
是不是mini prep的plasmid不能做细胞转染?
关于biological vs technical replicate
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g***y
发帖数: 201
11
也有可能是被一种fungus感染了。

【在 l**********t 的大作中提到】
: 最近培养293细胞时在显微镜下看到很多空泡样的东西,有没有哪位高手能指点一下这
: 是怎么回事?
: 冻的细胞在-80放了有半年,以前都长得挺好的,我现在用的培养基和血清也和以前一
: 样。不过我们实验室最近从东部搬到了中部,会不会是培养条件改变了?
: 先谢谢各位了!

F*Q
发帖数: 3259
12
我最近从原来的实验室要来的一些我用过的细胞,应该是一直存在液氮里的,结果也发
现类似现象(我的印象是以前没有这种现象的),正纳闷呢。不知道还能用否。

【在 a*****x 的大作中提到】
: 细胞被stress了会这样。-80度不能放太久的。应该放液氮。
g*********5
发帖数: 2533
13
...so check my -80 and find one cell were freezed at 12/2011 and one freezed
at 1/2012...keep and try or just dump them?
thanks.

80

【在 a*****x 的大作中提到】
: 查ER stress 和 autophagy有很多文献的。这里我认为是-80度放太久引起的。本来-80
: 度就不能用来长期冻存细胞(一般最长不超过1个月)。

a*****x
发帖数: 901
14
可以看一下autophagy marker,比如LC3和p62。除了-80度,还有其他很多可能的
stress因素。
如果只是用来表达蛋白之类,关系应该不大。如果要做cell biology,最好不用。

freezed

【在 g*********5 的大作中提到】
: ...so check my -80 and find one cell were freezed at 12/2011 and one freezed
: at 1/2012...keep and try or just dump them?
: thanks.
:
: 80

l**********t
发帖数: 138
15
继续顶一下吧!
另外我发现这种虽然有空泡,但是转染效率比正常时候还高。
a*****x
发帖数: 901
16
转染效率高和autophagy不矛盾。autophagy强的时候trafficking也强。
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