V***b
发帖数: 3419 | 1 我用的是cycloheximide，24小时细胞就死了50%（浮起来了），如果这样的话我这实验
不可能延续2-3天。我用了500 uM，但是看文章里有人用150 uM，有人用50 uM，还有人
用8 uM，差别很大，我现在不知道抑制mRNA翻译，cycloheximide浓度该用多少，另外
我的细胞死亡是因为mRNA翻译被抑制了还是因为非特异性毒性（我用的浓度太高了）。
另：专门搞翻译的人总是强调那是mRNA翻译，不是蛋白质翻译，但平时交流，说蛋白质
翻译的占大多数，他们很不满。到底应该叫什么？还是无所谓？ |
b****r
发帖数: 17995 | 2 那也得看什么细胞，分裂慢代谢慢的原代细胞可能就可以活很久，不停分裂的细胞可能
一天就全死光光 |
w****w
发帖数: 12 | 3 concentration is too high. if you want to treat your cell longer, i suggest
you start with 1-10uM. if for overnight, 10-50uM max 100uM will be enough.
good luck. |
V***b
发帖数: 3419 | 4 我用的是cycloheximide，24小时细胞就死了50%（浮起来了），如果这样的话我这实验
不可能延续2-3天。我用了500 uM，但是看文章里有人用150 uM，有人用50 uM，还有人
用8 uM，差别很大，我现在不知道抑制mRNA翻译，cycloheximide浓度该用多少，另外
我的细胞死亡是因为mRNA翻译被抑制了还是因为非特异性毒性（我用的浓度太高了）。
另：专门搞翻译的人总是强调那是mRNA翻译，不是蛋白质翻译，但平时交流，说蛋白质
翻译的占大多数，他们很不满。到底应该叫什么？还是无所谓？ |
b****r
发帖数: 17995 | 5 那也得看什么细胞，分裂慢代谢慢的原代细胞可能就可以活很久，不停分裂的细胞可能
一天就全死光光 |
w****w
发帖数: 12 | 6 concentration is too high. if you want to treat your cell longer, i suggest
you start with 1-10uM. if for overnight, 10-50uM max 100uM will be enough.
good luck. |
V***b
发帖数: 3419 | 7 做了个小实验，
5 uM，30分钟，蛋白合成90%被抑制
5 uM，16小时，蛋白合成95%被抑制
50 uM，30分钟，蛋白合成95%被抑制
50 uM，16小时，蛋白合成100%被抑制
这玩意很强大，对浓度和处理时间没多大依赖性。 |
f*******e
发帖数: 354 | 8 这玩意不是得看你的半衰期和细胞耐受做预实验摸出来的吗?
【在 V***b 的大作中提到】
: 做了个小实验，
: 5 uM，30分钟，蛋白合成90%被抑制
: 5 uM，16小时，蛋白合成95%被抑制
: 50 uM，30分钟，蛋白合成95%被抑制
: 50 uM，16小时，蛋白合成100%被抑制
: 这玩意很强大，对浓度和处理时间没多大依赖性。
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