请教一个Knock In 策略的问题 - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 请教一个Knock In 策略的问题

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m******5 发帖数: 1383	1 在一个endogenous site 想knock-in一个 GeneA-IRES-GeneB-polyA 理想状况下Gene A和GeneB会在一个大mRNA上分别translate出来现在面临的问题是，理论上说，核内有一套和核外不同的non sense mediated decay机制，负责降解stop code和polyA离得太远的情况。在我的case里GeneA的stop code和 polyA是很远的，因为中间隔了一个IRES，问问有经验的同学，这种情况下geneA有危险么？
m******5 发帖数: 1383	2 自己顶一下
R***t 发帖数: 14	3 应该不会。你也可以考虑以下用 2A linker。【在 m******5 的大作中提到】 : 在一个endogenous site : 想knock-in一个 GeneA-IRES-GeneB-polyA : 理想状况下Gene A和GeneB会在一个大mRNA上分别translate出来 : 现在面临的问题是，理论上说，核内有一套和核外不同的non sense mediated decay机 : 制，负责降解stop code和polyA离得太远的情况。在我的case里GeneA的stop code和 : polyA是很远的，因为中间隔了一个IRES， : 问问有经验的同学，这种情况下geneA有危险么？
n********k 发帖数: 2818	4 if u are really concerned, test it in cells... 【在 m******5 的大作中提到】 : 在一个endogenous site : 想knock-in一个 GeneA-IRES-GeneB-polyA : 理想状况下Gene A和GeneB会在一个大mRNA上分别translate出来 : 现在面临的问题是，理论上说，核内有一套和核外不同的non sense mediated decay机 : 制，负责降解stop code和polyA离得太远的情况。在我的case里GeneA的stop code和 : polyA是很远的，因为中间隔了一个IRES， : 问问有经验的同学，这种情况下geneA有危险么？

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