s**********e 发帖数: 2888 | 1 从来没有用过flow cytometry,文献报道用flow cytometry去定量分析动物实验的一个
tissue的细胞分布,看着很简单,想试一下。
我的问题就是:我准备样品的时候,需要control/treated的动物的tissue一样重或者
100%取下来,最后的结果control/treated才可以比较吗?
flow cytometry最后的那个结果,反映的是某种polulation的cell的分布百分比,这个概
念对吗?我们每次杀动物的时候,那个tissue都很100%难取下来,每只动物都只能取下
一部分。
谢谢了,回答的兄弟给包子。 |
c***e 发帖数: 174 | 2 我的问题就是:我准备样品的时候,需要control/treated的动物的tissue一样重或者
100%取下来,最后的结果control/treated才可以比较吗?
::理论上应该取100%,但是因为常常细胞数太多,可以homogenize之后跑同样的
percentage。比如都跑总sample的10%
flow cytometry最后的那个结果,反映的是某种polulation的cell的分布百分比,这个概
念对吗?我们每次杀动物的时候,那个tissue都很100%难取下来,每只动物都只能取下
一部分。
::反应的是某种population 的百分比。尽量多取吧,如果tissue是均质的,你也可
以只取一部分,比如如果是肝脏细胞,但是如果你想看的population不均匀分布在
tissue里,就最好都取,才能最客观的反应在总的population里的百分比。当然你可以
不必要都跑完,原理如上。 |
H****H 发帖数: 11039 | 3 control和treated样品自然要有可比性才行啊!取样的时候尽量一致吧。 |
s**********e 发帖数: 2888 | |
b********h 发帖数: 348 | 5 再补充1小点。没包子也没关系,因为10块钱也太少了,看不上 :)
我的问题就是:我准备样品的时候,需要control/treated的动物的tissue一样重或者
100%取下来,最后的结果control/treated才可以比较吗?
::理论上应该取100%,但是因为常常细胞数太多,可以homogenize之后跑同样的
percentage。比如都跑总sample的10%
--这个不一定,只要是均质的组织细胞,取够染色的细胞量就够了。因为如下所述,最
终得出的是各个细胞所占的百分比。
****需要注意每个sample染色的时候ideally是1个million,细胞太多抗体量不够,BD
抗体一般是按着1微升/1million细胞/100微升体积里.
flow cytometry最后的那个结果,反映的是某种polulation的cell的分布百分比,这个概
念对吗?我们每次杀动物的时候,那个tissue都很100%难取下来,每只动物都只能取下
一部分。
::反应的是某种population 的百分比。尽量多取吧,如果tissue是均质的,你也可
以只取一部分,比如如果是肝脏细胞,但是如果你想看的population不均匀分布在
tissue里,就最好都取,才能最客观的反应在总的population里的百分比。当然你可以
不必要都跑完,原理如上。 |
s**********e 发帖数: 2888 | |
O***n 发帖数: 13127 | 7 比如说liver, 你也可以去一小块,然后称重,看how many cell in each gram of
tissue. 好多人定量细菌是这样做得。尽量去同一部位。
【在 s**********e 的大作中提到】 : 从来没有用过flow cytometry,文献报道用flow cytometry去定量分析动物实验的一个 : tissue的细胞分布,看着很简单,想试一下。 : 我的问题就是:我准备样品的时候,需要control/treated的动物的tissue一样重或者 : 100%取下来,最后的结果control/treated才可以比较吗? : flow cytometry最后的那个结果,反映的是某种polulation的cell的分布百分比,这个概 : 念对吗?我们每次杀动物的时候,那个tissue都很100%难取下来,每只动物都只能取下 : 一部分。 : 谢谢了,回答的兄弟给包子。
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