w***y
发帖数: 493 | 1 我把3xHA的tag接到蛋白的N端, 然后做了in vitro transcription得到了mRNA. 接着把
mRNA注射到了鱼的卵里,另外准备了一些uninjected fish作为negative control, 一段
时间后做western观察蛋白表达情况. 我发现在那些negative control的样品里也有带,
而且量还不少, 大概在75KD 左右. 我试过两个不同的 anti-HA的抗体, 结果都一样.
请问有人在zebrafish里面表达过HA-tag的蛋白么, 有没有看到这种情况呢? | s*********y
发帖数: 1189 | 2 请问你试过的两种Ab 都具体是什么公司的，Cat# 是什么？我个人觉得单克隆的可能会
好一点。 | n***w
发帖数: 2405 | 3 你的目的条带应该是多少？
你试过anti-你的target protein吗？
HA的话，我用过millipore的，背景挺多的。。。。我觉得抗体可能会bind到一些非特
异性的major bands。。。 |
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