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Biology版 - 薄后刚开工做个最简单的实验被笑话了,大家帮看看
相关主题
薄厚刚开工做个最简单实验被笑话了,大家帮看看神经干细胞与学习和记忆 六.抽丝剥茧 下
谁养过Caco-2 细胞? 诚心请教神经干细胞与学习和记忆 七.踏上征途 完
MTT 和 [3H]thymidine问题:BrdU和TUNEL的prok用量
MTT Cell Viability Assay问问24孔板培养蛋白质晶体,是否可以用于氯仿溶液?
what kind of shaker do you use for ELISA?How to do brdU staining?
用peppitte太多,大拇指疼,我该怎么办?问题请教 乙醇处理细胞离心过程大量损失
(update: 求建议)我什么时候才能学会not trusting anybody求教版上大牛,怎样区分clump 里的细胞是分裂来的还是自发地凑在一起的?
神经干细胞与学习和记忆 五.抽丝剥茧 中用Cleaved caspase-3抗体做IF-P
相关话题的讨论汇总
话题: 孔板话题: viability话题: 96话题: 细胞话题: 薄后
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c****n
发帖数: 1108
1
【 以下文字转载自 Postdoc 讨论区 】
发信人: XIXIHAHAGG (XIXI), 信区: Postdoc
标 题: 薄后刚开工做个最简单的实验被笑话了,大家帮看看
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Mar 8 00:03:03 2011, 美东)
刚毕业开始做薄后,老板底下加我一起5个薄厚,没有学生。其余4个在老板底下做了6
年以上了,呵呵
我以前做肿瘤的,现在的老板做神经领域。老板希望我做某一个环境毒物(他们实验室
以前没做过)对神经细胞的影响等等。查了一下文献,做这个的不多,用这个chemical
处理过神经细胞的文章只有一篇。他们文章中有viability data等。我准备自己先做做
viability 看看浓度,处理时间等。准备开工,结果被其余博后嘲笑了一番。不知道我
是不是真的科研思维太弱了,很郁闷:
1, 他们说别人都做过viablity了,你为什么还要做?直接用他们的结果选浓度不就行
了么?难道你不看别人的文献么?觉得比较郁闷,文献我看了,我总得自己看看结果吧
,不对么
2,我准备用96孔板做viability,细胞还没好,今天只是准备,我在那里找排枪。另一
个薄厚过来看见了说:你怎么用96孔板做?我们从来不用的,这个结果怎么能信呢,最
后收蛋白什么的都用dish,比96孔大多了,这样出来的viability 和最后处理细胞的肯
定差异很大。哎,只有肿瘤的现在还在用96孔板吧。虽然有点不高兴,我还是笑着问他
那你们怎么做?然后他说都用24孔板做,然后说24孔板细胞数多,误差就会小等等,听
着觉得有那么一点点道理,但也没觉得96孔板做有何不妥。大家一般都怎么做呢?
就事论事,大家给点意见,谢谢!
s**********e
发帖数: 2888
2
我还看过一个组发的一系列的cancer research,报道一个分子在各种癌细胞的
proliferation,就是MTT assay做出来的。我就去重复了,atcc新买的细胞,各种浓度
,时间,serum starvation, collagen coating,mtt, brdu,能试的都试了,什么效果
也看不到。
给那个组发信,没有任何回复。给合作小组写信,合作组说他们也什么都没有看到,而
且那个分子理论上应该被cancer research的cell line很快的降解掉,所以应该是什么
效果也看不到。

6
chemical

【在 c****n 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Postdoc 讨论区 】
: 发信人: XIXIHAHAGG (XIXI), 信区: Postdoc
: 标 题: 薄后刚开工做个最简单的实验被笑话了,大家帮看看
: 发信站: BBS 未名空间站 (Tue Mar 8 00:03:03 2011, 美东)
: 刚毕业开始做薄后,老板底下加我一起5个薄厚,没有学生。其余4个在老板底下做了6
: 年以上了,呵呵
: 我以前做肿瘤的,现在的老板做神经领域。老板希望我做某一个环境毒物(他们实验室
: 以前没做过)对神经细胞的影响等等。查了一下文献,做这个的不多,用这个chemical
: 处理过神经细胞的文章只有一篇。他们文章中有viability data等。我准备自己先做做
: viability 看看浓度,处理时间等。准备开工,结果被其余博后嘲笑了一番。不知道我

n***w
发帖数: 2405
3
1、你没有错。我们基本也会试一下。
2、无所谓,都能做。
s******y
发帖数: 28562
4
对于第一个,你的做法是正确的。不同实验室的不同细胞株对药物敏感型不一样。
对于第二个,各有各的道理。24孔板每个孔细胞多,偏差是会小一些,对于
后续的生化试验因为样品量大一些也会准一些。但是96板可以一个板上作
好几个重复,所以平均下来后并不比24孔的差多少。尤其是对于做ELISA
而言,其实96孔板反而更好(因为探头很小,多出来的地方反正探不到)
不过,96孔板的孔小,溶液表面张力明显,对于那些对环境敏感的细胞不好。
不知道你们的神经细胞是否属于这样的范围? 对于那些特别大或者特别长的
细胞(比分说某些神经元细胞),的确是大孔板好一些。

6
chemical

【在 c****n 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Postdoc 讨论区 】
: 发信人: XIXIHAHAGG (XIXI), 信区: Postdoc
: 标 题: 薄后刚开工做个最简单的实验被笑话了,大家帮看看
: 发信站: BBS 未名空间站 (Tue Mar 8 00:03:03 2011, 美东)
: 刚毕业开始做薄后,老板底下加我一起5个薄厚,没有学生。其余4个在老板底下做了6
: 年以上了,呵呵
: 我以前做肿瘤的,现在的老板做神经领域。老板希望我做某一个环境毒物(他们实验室
: 以前没做过)对神经细胞的影响等等。查了一下文献,做这个的不多,用这个chemical
: 处理过神经细胞的文章只有一篇。他们文章中有viability data等。我准备自己先做做
: viability 看看浓度,处理时间等。准备开工,结果被其余博后嘲笑了一番。不知道我

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用Cleaved caspase-3抗体做IF-Pwhat kind of shaker do you use for ELISA?
同一个基因用不同的方法knock-down 对细胞的行为会有不同的影响?用peppitte太多,大拇指疼,我该怎么办?
总是在trouble shooting(update: 求建议)我什么时候才能学会not trusting anybody
心肌细胞BrDU染色FACs求助神经干细胞与学习和记忆 五.抽丝剥茧 中
薄厚刚开工做个最简单实验被笑话了,大家帮看看神经干细胞与学习和记忆 六.抽丝剥茧 下
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MTT Cell Viability Assay问问24孔板培养蛋白质晶体,是否可以用于氯仿溶液?
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话题: 孔板话题: viability话题: 96话题: 细胞话题: 薄后