k****n 发帖数: 158 | 1 现要电转一个基因带GFP到3t3细胞,实验室的电转仪比较老BTX630,只有三个参数可以
调节,我参考以前文献设定为250V(LV,还有一个是HV模式),电阻为125Ω,电容为0
.25μF,效果极其惨烈,
我想请问一下,我是应该固定电阻和电容,逐步升高电压来摸索条件吗?比如电阻电容
不变,逐步升高电压到600v?或者用HV模式?
还是固定电压,改变电阻和电容?希望有经验的给我不吝赐教, 拜谢!!! | k****n 发帖数: 158 | | s*****g 发帖数: 7857 | 3 Electroporations were performed with a Gene PulserXcell unit (Bio-Rad) under
conditions of 125 V, 25 ms, and a square-wave pulse.
PMID: 20215638
"Optimizing electroporation conditions in primary and other difficult-to-
transfect cells." PMID: 19183796
把electroporation和你的型号打入,大概可以看看别人在同类机器上是怎么做的.
我们现在都用Lonza的机器和溶液.选择不同的程序来转. 所以对你的问题没有经验. | c*******y 发帖数: 161 | 4 我电转过DNA片段到大肠杆菌细胞,用的是Bio-Rad的仪器,只是设定电压2.5KB,其他条件
不用设置,效果很好.还有制备好的电转感受态细胞很重要的.我的意见仅供参考. | m******5 发帖数: 1383 | 5 不明白你为啥用电转3T3 Fugene work得挺好啊 |
|