请教一个SDS-PAGE 电泳问题 - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 请教一个SDS-PAGE 电泳问题

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d*******e 发帖数: 110	1 最近一直在做WESTERNBLOT检测蛋白的表达，目的蛋白会形成一个五聚体，大小在60KDa 左右。电泳上样的时候没有煮沸变性，跑完电泳发现目的蛋白在40KDa的地方（和上样的MARKER比较），少了20多KDa，尝试用native-PAGE 胶跑电泳，但是条带size一下子又很大了（和上样的MARKER比较），偏差很大，还不如SDS-PAGE胶。请问站内的高手是怎么解决这个问题的？有构象的蛋白跑SDS-PAGE电泳size 不准确了。
s******s 发帖数: 13035	2 前面那些我不知道，不过蛋白修饰啥的改变表观分子量很正常 60KDa 【在 d*******e 的大作中提到】 : 最近一直在做WESTERNBLOT检测蛋白的表达，目的蛋白会形成一个五聚体，大小在60KDa : 左右。电泳上样的时候没有煮沸变性，跑完电泳发现目的蛋白在40KDa的地方（和上样 : 的MARKER比较），少了20多KDa，尝试用native-PAGE 胶跑电泳，但是条带size一下子 : 又很大了（和上样的MARKER比较），偏差很大，还不如SDS-PAGE胶。请问站内的高手是 : 怎么解决这个问题的？有构象的蛋白跑SDS-PAGE电泳size 不准确了。
k******0 发帖数: 1073	3 糖链修饰或超强输水，都引起表观分子量异常。非变性胶，不是用来测分子量的。检查抗体特异性如何或是否目标蛋白质发生降解或切除信号肽，等等。
n***w 发帖数: 2405	4 您的结果只有1条带吗？

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