m****m 发帖数: 395 | 1 实验室的Amp用完了,Order要好久一段时间,于是就用Carbenicillin代替,加了同样
浓度同样体积的量,结果细菌产量减半,尤其是加 IPTG后的 M9 MEDIA,蛋白产量减半
。查了网上都说Carbenicillin好,就搞不懂了。难道是用量要减半吗?请指教!! |
l*******k 发帖数: 361 | 2 carb is more stable and more effective than amp. so I think it caused the
bug to grow slower. |
s******y 发帖数: 28562 | 3 你加了多少浓度?可以用 20 ug/mL
【在 m****m 的大作中提到】 : 实验室的Amp用完了,Order要好久一段时间,于是就用Carbenicillin代替,加了同样 : 浓度同样体积的量,结果细菌产量减半,尤其是加 IPTG后的 M9 MEDIA,蛋白产量减半 : 。查了网上都说Carbenicillin好,就搞不懂了。难道是用量要减半吗?请指教!!
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m****m 发帖数: 395 | 4 我用了 100 ug/mL 。。。
20ug/mL就够了吗? |
s******y 发帖数: 28562 | 5 太浓了!!
carbenicilin 很稳定,不象Amp那么容易降解,所以没有必要放那么多。
我们平时用carbenicilin都是放20,至多放50就够了。
你放的太多了!
(用Ampicilin的时候倒是应该放100,因为这个东西比较容易降解)
【在 m****m 的大作中提到】 : 我用了 100 ug/mL 。。。 : 20ug/mL就够了吗?
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m****m 发帖数: 395 | |
r***e 发帖数: 2539 | 7 你的说法很对,
但是100ug/ml没问题的,我们都用这个浓度,
虽然菌量会少,但是质粒产量没问题。
【在 s******y 的大作中提到】 : 太浓了!! : carbenicilin 很稳定,不象Amp那么容易降解,所以没有必要放那么多。 : 我们平时用carbenicilin都是放20,至多放50就够了。 : 你放的太多了! : (用Ampicilin的时候倒是应该放100,因为这个东西比较容易降解)
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m****m 发帖数: 395 | 8 我现在的问题是不想让蛋白产量减少,菌少了,蛋白也少了吧?还有人跟我说用50就够
了,说20太少了
【在 r***e 的大作中提到】 : 你的说法很对, : 但是100ug/ml没问题的,我们都用这个浓度, : 虽然菌量会少,但是质粒产量没问题。
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s******y 发帖数: 28562 | 9 20不少。
严格按照分子克隆那本教科书的话,如果是新鲜配备的ampicillin, 10ug/mL 就够了。
所以换成carbenicilin, 20绰绰有余
【在 m****m 的大作中提到】 : 我现在的问题是不想让蛋白产量减少,菌少了,蛋白也少了吧?还有人跟我说用50就够 : 了,说20太少了
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