q****2 发帖数: 208 | 1 目前在研究的蛋白中间有个flexible loop,如何做突变才能把这个flexible的linker
变成刚性(Rigid)的呢? 谢谢 |
a***e 发帖数: 1010 | |
q****2 发帖数: 208 | 3
除了delete掉这个loop,应该对哪些氨基酸突变呢?谢谢了
【在 a***e 的大作中提到】 : delete that loop?
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a***e 发帖数: 1010 | 4 it is hard to control the final conformation by mutation. |
S**I 发帖数: 15689 | 5 换成一串脯氨酸?
【在 q****2 的大作中提到】 : : 除了delete掉这个loop,应该对哪些氨基酸突变呢?谢谢了
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q****2 发帖数: 208 | |
T**********t 发帖数: 1604 | |
a***e 发帖数: 1010 | 8 but introduce a Pro may change your protein folding a lot. |
s*******i 发帖数: 69 | 9 It's a gamble, just try more mutation such as Pro. If you want to crystalize
it. sometimes mixing with protease may work. |
n****e 发帖数: 1677 | 10 不行,最好是全切掉,然后加一个或者更多的Ala(加到蛋白能稳定表达为止),当然如果
这个loop对蛋白的功能很重要的话另当别论。
【在 q****2 的大作中提到】 : pro 可行么???
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q****2 发帖数: 208 | 11 加Ala啥目的? Ala好像不怎么rigid吧? |
n****e 发帖数: 1677 | 12 flexible loop一般是连接两个二级结构的,比如alpha-helix----loop----alpha-
helix,如果直接删掉loop,这两个alpha-helix就都被破坏了,因为没法turn了。所以要
加至少一个aa来提供连接,ala是有侧链的最小的aa,加了一般不会引起任何机构上的变
化。如果一个不行,就要再多加。
基本上的思路就是把那个loop变得最短。
【在 q****2 的大作中提到】 : 加Ala啥目的? Ala好像不怎么rigid吧?
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a*****v 发帖数: 128 | 13 同源置换,找一个解了结构的同源蛋白质,换同源的loop |