Re: purpose of DMSO in cell freezing - Biology版

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Biology版 - Re: purpose of DMSO in cell freezing

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y*k
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（三）、组织细胞的保存：
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现
变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，最佳的
策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深
低温保存法(－70℃—－196C)的特点。
细胞深低温保存的基本原理是：在－79C以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于
完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过0C-20C阶段的处理过
程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。用电镜观察，可见细胞
的核膜上有大量针尖样小孔。
生化研究发现，在此温度范围内，钾离子和钠离子集聚在细胞两侧，具有细胞毒性。因
此，为了避免0C——20C冰晶的形成和细胞膜两侧离子平衡的破坏，需要加保护剂。目前
常用的保护剂有甘油和二甲基亚矾(DM50)，它们可降低冰点，在缓慢的冻结条件下，能
使细胞内水分在冻结前透出
细胞外。贮存在-130C以下低温中能减少冰晶形成，DMSO和甘油对细胞无毒性，分子量小
，溶解度大，易穿透细胞，使用浓度范围为5％—15％，

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