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Biology版 - Re: western blotting杂带太多怎么办?
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话题: 杂带话题: blotting话题: western话题: 抗体话题: 怎么办
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l****c
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可以试着降低二抗稀释倍数.我曾经在用一个抗体时遇到过同样的问题, 当把protein A从
1:3000 dilution 降到1:5000后就只有一条很清楚的带了.提高特异性的办法还有: 适当
增加一抗incubation时间, 洗膜的时候条件剧烈一些, 二抗中加一些牛奶,etc. (如果你
不想换抗体, 也不愿意纯化抗体的话.) 需要注意的是提高特异性的同时很有可能一牺牲
信号强度为代价, 需要大大增加曝光时间.
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